Способ определения содержания морфоциклина
Иллюстрации
Показать всеРеферат
Изобретение относится к медицине , а именно к способам определения морфоциклина, и может быть применено для качественного и количественного определения этого соединения при биохимических , токсикохимических и биофармацентических исследованиях.Цель - повышение чувствительности и избирательности определения. Способ заключается в экстрагировании анализируемого вещества этилацетатом из биоматериала , прибавлении диметилформамида и ацетата магния с последующим измерением интенсивности флуоресценции с максимумом возбуждения при 425 нм и излучения при 490 нм. 2 табл. С S
СООЗ С06ЕТСНИХ
СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ
РЕСПУБЛИК
09) (1!) А1 (5!)5 G О1 !1 21/64
ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ
ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ
ПРИ ГННТ СССР
1
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
К Д ВТОРСНОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ
«. :.ь, )««"Щя !) .Ф
- «:,, «!« . /; ;«. «, « «
« (46) 07.08. 92. Бил. Р 29 (21) 47033!9/35 (22} 18.04.89 (71) Курский государственный медицинский институт (72) A.À.Хабаров, И.В.Ельков, С.Ç.Пискунов и С.П.Разиньков (53) 543.42 (Одд.д) (56) 13денфренд С. Люминесцентный анализ в биологии и медицине. И.:
Иир, 1965, с.50.
Сааведра Ф.Э., Соловей Н.С. Фотоколориметрическое определение морфоциклина в олеморйоциклине. — Фармация, !9 78, ХХЧТТ, 1!" 1, с ° 88-89. (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ СОДЕРЖАНИЯ
140РФОЦИ КЛИНА
Изобретение относится к медицине, а именно к способам определения морфоциклина и может быть применено для качественного и количественного on" ределения этого соединения при биохимических, токсикохимических и био" фармацевтических исследованиях.
Целью изобретения является повышение чувствительности и избирательности анализа биоматериалов.
Способ осуществляется следующим образом.
К анализируемой пробе биологического материала (кровь, моча, слюна)
Ъ прибавляют этилацетат, встряхивают, центрифугируют и к аликвотной части слоя этилацетата прибавляют диметилформамид, магния ацетат и блуориметрируют при во. )уждении флуоресценции с максимумом 425 нм, излучения
«алуоресценции с максимумом 490 нм.
2 (57) Изобретение относится к медици. не, а именно к способам определения морфоциклина, и может быть применено для качественного и количественного определения этого соединения при биохимических, токсикохимических и биофармацевтических исследованиях. Цельповышение чувствительности и избирательности определения. Способ заключается в экстрагировании анализируемого вещества этилацетатом из биоматернала, прибавлении диметилформамида и ацетата магния с последуюшим измерением интенсивности флуоресценции с максимумом возбуждения при 425 нм и излучения при 490 нм. 2 табл.
Линейная зависимость между концентрацией морфоциклина и интенсивностью флуоресценции лежит от О,! до 20 мкг/мл (см.табл.!). Оптималь.ная концентрация раствора ацетата магния составляет 2Х (см.табл.2}.
Экстрация морфоциклина иэ крови и мочи при его концентрации 20 мкг/мл достигается полная. СР
Пример l. Качественное определение морфоциклина препарата. )
К 1 - 2 мг препарата прибавляют
4 — 5 мл диметилфсрмамида, 1 мл
27-ного раствора ацетата магния, перемешивают и в ультрафиолетовом свете наблюдают желто-зеленую флуоресценцию;
Пример 2. Качественное определение морфоцнклина в биоматериале
\ (крови н моче).
16!107!
Ъ
К 1 мл плазмы крови или мочи прибавляют 2 мл буферного раствора с
РН 5-6, 3 мл этилацетата и встряхивают 3 мин. Затем центрифугируют прн
3000 об/мин 2 мин. К 1 мл этилацетата прибавляют 8 мл диметилформамида, ! мл 2%-ного раствора ацетата магния перемешивают и .флуориметрируют. В ультрафиолетовом свете наблюдают жел- 1р тую флуоресценцию.
Пример 3. Количественное определение морфоциклина в крови и моче.
Относительная интенсивность флуоресценции,Е
Концентрация, мкг/мл
0,1 1 3
0,2 2 6
0,3 3 9
0,4 4 12
05 5 15
06 6 18
0,7 . 7 21
0,8 8 24
0,9 9 27
1,0 10 30!
О 10
19 20
28 29
38 39
49 49
58 58
68 68
77 78
85 86
94 95!
О
68
74
83 нмй способ для определения морфоциклина в биологических жидкостях. Способ обладает также большей избирательностью за счет образования внутрикомплексного соединения морбоцикли" на с катионом Mg в среде Я".Ф, Подобной реакции не дают, все антибиотики, которые могут одновременно назначаться больным (группы пенициллина, группы цефалоспоринов, группы стрептомицнна, антибиотики-аминогликозиды, антибиотики макролиды, группы левомицитина, группы рифампицина,разных
f5 групп лиикомицин гидрохлоридgpBсто
К 1 мл плазмы крови или мочи прн- мицин сульфат, фузидин, натрия, полибавляют 2 мл буферного .раствора с миксин сульфат, грамицидин, иистаРН 5 — 6,3 мл этилацетата и встряхи- тин, леворин, амфотерицин В) и суль" вают 2 мин, центрифугируют 2 мин при фаииламиды, 5000 об/мин. К 1 мл слоя этилацета- 20 Ф о р м у л а н s î б р е т e H H R та прибавляют 8 мл диметилформамида. мп 2%-ного раствора ацетата Способ определения содержания мормагния в д!!фА перемешивают и Алуо- фоциклнна, включающий обработку анариметрируют относительно стандартно- лизируемой пробы химическим реагенz о раствора морфоциклина, для чего 25 том и измерение оптической характев ряд пробирок прибавляют 0,1, 0,5, Ристики полУченного продукта, по вв1,pp стандартного раствора морфо- личине которой проводят определение циклина в диметилформамиде, с сойеР- отличающийся тем что с
I 1 жанием 50 мкг/мл, соответственно целью повышения чувствительности и
8,9, 8,5, 8 мл диметилформамида,1 мл 30 избирательности анализа биоматериа2%-ного раствора ацетата магния в ди- . лов, пробу предварительно экстрагиметилформамиде, перемешивают и фпуо- Руют.из бноматериала этилацетат м
Ф риметрируют одновременно .с испытуе- экстракт растворяют в диметилформамыми растворами, миде, в качестве реагента используТаким образом, способ позволяет - ют ацетат магния и измеряют интенповысить чувствительность определе- сивность флуоресценцин раствора при
35 ння в 50 раз по сравнению с прототи" длине волны возбуждения 425 нм и дпнпом, что позволяет использовать дан- не волны регистрации 490 нм, Таблица l
Зависимость интенсивности флуоресцеиции анутрикомплексного соединения морфоциклина с магнием от концентрации морфоциклина
1611071
Та блица 2
Зависимость интенсивности флуоресценцни комплекса морфоциклина с магнием от концентрации ацетата магния в, днметилформамиде (кон.центрация мордоциклина
20 мкг/мл). ч
Концентрация аце- Относительная тата магния, Х интенсивность флуоресценции,X
Составитель С.Бадтиева
Техред Л.Сердюкова Корректор 11.Шароши Редактор Н.Коляда
Заказ 3469 Тира к Подписное
ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР
113035, Москва, Ж-35, Раукская наб., д. 4/5
Производственно-издательский комбинат "Патент", г.улсгород, ул. Гагарина, 101
0,1
0,5
1,0
2,0
3,0
36
73
82
82