Устройство для определения ингибиторов и активаторов холинэстераз
Иллюстрации
Показать всеРеферат
Изобретение относится к аналитическим методам исследования ферментных систем, к устройствам для определения ингибиторов и активаторов холинэстераз. Цель изобретения - повышение чувствительности и точности измерений. Устройство содержит реакционную емкость 1 с патрубком 2 для подвода субстрата, воды или воздуха, патрубком 3 для подвода газа и патрубком 4 для отвода среды, размещенные внутри емкости 1 ферментный электрод 5 и электрод сравнения 6. Ферментный электрод 5 содержит гофрированную пленку 7 из нитрата целлюлозы с иммобилизованной холинэстеразой, которая размещена в центре емкости 1 и прикреплена к электроду 5 прижимными кольцами 8. Емкость 1 снабжена теплообменной рубашкой 9 с патрубками 10 и 11. Устройство обеспечивает определение низких концентраций ингибиторов и активаторов холинэстераз в окружающей среде. 1 ил.
СОЮЗ СОВЕТСНИХ
СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ
РЕСПУБЛИК (51) 5 С 12 M 1/40
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
К А ВТОРСКОМ У СВИДЕТЕЛЬСТВУ
ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ
ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ
ПРИ ГКНТ СССР (21) 4458197/31-13 (22) 11. 07.89 (46) 23. 12. 90. Бюл. № 47 (71) Казанский государственный университет им. В.И.Ульянова-Ленина (72) Г. К. Будников, С. С. Бабкина и Э.П.Медянцева (53) 663. 18 (088.8) (56) Gray D.N Immobilized Enzymes
in Analytical Chemistry. J. Analytical
Chemistry. 1977, vol. 49, ¹ 12, р. 106 7А. (54) УСТРОЙСТВО ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ИН
ГИБИТОРОВ И АКТИВАТОРОВ ХОЛИНЭСТЕРАЗ (57) Изобретение относится к аналитическим методам исследования ферментных систем, к устройствам для .определения ингибиторов и активато-. ров холинэстераз. Цель изобретения
ÄÄSUÄÄ 1615173 А1 повышение чувствительности и точнос-. ти измерений, Устройство содержит реакционную емкость 1 с патрубком 2 для подвода субстрата, воды или воздуха, патрубком 3 для подвода газа и патрубком 4 для отвода среды, размещенные внутри емкости 1 фермент,— ный электрод 5 и электрод сравне— ния 6. Ферментный электрод 5 содержит гофрированную пленку 7 из нитрата целлюлозы с иммобилнзованной хопинэстеразой, которая размещена в центре емкости 1 и прикре; лена к электроду 5 прижимными кольцами 8. Емкость 1 снабжена теплообменной рубашкой 9 с патрубками 10 и 11 ° Устройство обеспечивает определение низких концентраций ингибиторов и активаторов холинэстераз в окружающей среде. 1 ил.
1615173
Изобретение относится к аналитическим методам исследования ферментных систем, к устройствам для определения ингибиторов и активаторов холинэстераз, при анализе окружающей среды.
Целью изобретения является повышение чувствительности и точности измерений. 10
На чертеже изображено устройство, общий вид, в аксонометрии.
Устройство. для определения ингибиторов холинэстераз содержит реакционную емкость 1 с патрубком 2 для подвода субстрата, служащим также для подвода воды или воздуха, патрубком 3 для подвода газа и патрубком ч для отвода среды, размещенные
РМКосТН 1 ферментный электрод 20
5 и электрод 6 сравнения. Ферментный электрод 5 содержит в своей нижней части гофрированную пленку 7 из нитрата целлюлозы с иммобилизованной холинэстеразой, размещенную вокруг 25 корпуса электрода, при этом стенка реакционной емкости 1 выполнена в виде усеченного конуса, обращенного ! большим основанием вверх а гофрироУ ванная пленка 7 размещена в центре ! емкости. Гофрированная пленка 7 прикреплена к ферментному электроду 5 прижимными колъцами 8. Реакционная емкость 1 снабжена теплообменной рубашкой 9 с патрубками для подвода
10 и отвода 11 хладагента.
Устройство работает следующим об) раз ом.
Перед началом работы устройства подготавливают к работе ферментный электрод 5. Поверхность электрохимической части ферментного электрода 5 шлифуют до зеркального блеска и опускают в ртуть на 2 мин„ затем его извлекают из нее и излишки ртути 45 стряхивают. После этого прикрепляют к электроду 5 прижимными кольцами 8 гофрированную пленку 7 из нитрата целлюлозы и вводят электрод 5 в реакционную емкость 1. По патрубку 2 подают воду или воздух, в которых оп ределяются ингибиторы и активаторы холинэстераз, скорость протока поддерживается не более 2 л/мин, а затем поток выводится по натрубку ч, 55
Периодически поток перекрывается, и в емкость 1 через патрубок 2 вводят до 5 мп раствора субстрата холинэстеразы — бутирклтиохолиниоцида (концентрации до 6 10 4 г/мл) в обратном буферном растворе с рН 9,05, при этом в емкость вставляют электрод
6 сравнения (насыщенный каломельный электрод) ° Температуру реакции поддерживают в пределах 25 С, а через патрубок 3 продувают среду в емкости
1 водородом или аргоном для удаления растворенного кислорода в течение.15 мин, до достижения равнове— сия реакции гидролиза. Затем снимают вольтамперограмму в интервале потенциалов (-0,1) — (0,8) В. На вольтамперограмме измеряют высоту пика при потенциале -0,55 В и по градуировочному графику, выражающему зависимость величины тока в пике от концентрации ингибитора или активатора, нахоцят содержание ингибитора или активатора в потоке исследуемой воды или воздуха.
Использование ферментного электрода 5 с гофрированной пленкой 7 из нитрата целлюлозы с иммобилизованной холинэстеразой в сочетании с реакционной емкостью 1, имеющей конусообразную стенку, и размещение пленки 7 в центре емкости 1 позволяют осуществить равномерное обтекание электрода 5 исследуемой средой без изменения условий диффузии субстрата к холинэстеразе.
Стабильность этого режима позволяет снизить влияние различных возмущений на величину электрохимического сигнала, то есть на результат анализа, определять более низкие концентрации ингибиторов холинэстераз и таким образом повысить чувствительность и точность анализов.
Формула изобретения
Устройство для определения ингибиторов и активаторов холинэстераз, содержащее реакционную емкость с патрубками для подвода субстрата, газа, воды или воздуха и патрубком для их отвода, размещенные в емкости ферментный электрод и электрод сравнения, о т л и ч а ю щ е е с я тем, что, с целью повьш ения чувствитель.ности и точности определения, ферментный электрод содержит в нижней части гофрированную пленку из нитрата целлюлозы с иммобилизованной холинэстеразой, размещенную вокруг корпуса электрода и прикрепленную к нему прижимными кольцами, при этом
Составитель Н.Осипов
Техред Л. Сердюкова Корректор А.Обручар
Редактор Ч.Гунько
Заказ 3961 Тирам 483 Подписное
ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР
113035, Москва, Ж-35 ° Раушская наб., д. 4/5
Производственно;издательский комбинат "Патент", r.Óàãîðîä, ул. Гагарина, 101
5 стенка реакционной емкости выполнена в виде усеченного конуса, обращенного большим основанием вверх, 1615173 6 а гофрированная пленка из нитрата целлюлозы размещена в центральной части емкости.