Питательная среда для получения сферопластов микобактерий туберкулеза

Питательная среда для получения сферопластов микобактерий туберкулеза

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

Изобретение относится к медицинской микробиологии и может быть использовано при диагностике туберкулеза . Цель изобретения - ускорение получения сферопластов при сохранении продуктивности. Питательная среда содержит, мас.%: калий фосфорнокислый однозамещенный 0,1-0,15; натрий фосфорнокислый двузамеценный 0,15-0,17; магний сернокислый 0,05- 0,075; сахароза 15-20; 20%-ный раствор хлоргексидин глюконата 1-2; дистиллированная вода остальное. Соли и сахарозу растворяют в воде и стерилизуют . После охлаждения к среде с рН 7,2 добавляют 20%-ный раствор хлоргексидин глюконата. В полученную среду вносят микобактерии и инкубируют при 37°С в течение 3-4 ч. Полученные сферопласты отмывают изотоническим раствором. Выход около 90% от исходного веса культуры. S

СОЮЗ СОВЕТСНИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (19) (1И (g1)g С 12 N 1/20

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

Фосфорнокислый двузамещенный натрий

Сернокислый магний

Сахароза

Хлоргексидин глюконат, 20 ; — ный раствор

Дистиллированная вода

0,15

0,05

15,0

1,0

Остальное

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР (21) 4645683/13 (22) 02.02.89 (46) 15.01.91. Бюл. № 2 (71) Центральный научно-исследовательский институт туберкулеза и Казахский научно-исследовательский ветеринарный институт Восточного отделения ВАСХНИЛ (72) И.P.Äîðîæêîâà и Б.Ф.Керимжанова (53) 576.8.093.33 (088.8) (56) Авторское свидетельство СССР № 1057533, кл. С 12 N 1/20, 1981. (54) ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ

СФЕРОПЛАСТОВ МИКОБАКТЕРИЙ ТУБЕРКУЛЕ3А (573 Изобретение относится к медицинской микробиологии и может быть использовано при диагностике туберИзобретение относится к медицинской микробиологии и может быть использовано при диагностике туберкулеза.

Цель изобретения — ускорение получения сферопластов при сохранении продуктивности.

Приготовление и использование среды .иллюстрируется следующими примерами.

Пример 1. Готовят среду следующего состава, мас.Е:

Фосфорнокислый однозамещенный калий .0,1

2 .кулеза. Цель изобретения — ускорение получения сферопластов при сохранении продуктивности. Питательная среда содержит, -мас.Е: калий фосфорнокислый однозамеценный 0,1-0,15; натрий фосфорнокислый двузамеценный

0,15-0,17; магний сернокислый 0,050,075; сахароза 15-20; 207.-ный раствор хлоргексидин глюконата 1-2; дистиллированная вода остальное. Соли и сахарозу растворяют в воде и стерилизуют. После охлаждения к среде с рП 7,2 добавляют 20#-ный раствор хлоргексидин глюконата. В полученную среду вносят микобактерии и инкубируют при 37 С в течение 3-4 ч. Полученные сферопласты отмывают изотоническим раствором. Выход около 90Х от исходного веса культуры.

Соли и сахарозу растворяют в

100 мл дистиллированной воды и сте(рилизуют в автоклаве при 0,5 атм в течение 30 мин. рН среды 7,2. После охлаждения к раствору добавляют пре1б20481

Формула изобретения

0,15

2,0

О, 15-0, 17

0,05-0,075

15,0-20,0

0,1б

0,0б

17,5

Составитель Г.Смирнова

Редактор. M.Íåäîëóæåíêî Техред >.0ëèéíûê Корректор M,Äåì÷èê

Заказ 4220 Тираж Подписное

ВНИИПИ Госудагственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г.Ужгород, ул. Гагарина, 101 парат хлоргексидин глюконат в виде

207.-ного раствора.

В приготовленную среду помещают микобактерии любого вида в концент5 рации 0,05 г отжатого веса культуры на 1 мл среды или 5 г на 100 мл среды. Посуду с полученным содержанием встряхивают и помещают в термостат при 37 С на 3-4 ч, после чего получе, ные сферопласты трижды отмывают изотоническим раствором путем центрифугирования при 3 тыс. об/мин. При этом общий выход биомассы сферопластов составляет 4,0-4,5 г или около

907. от исходного веса культуры.

П р и м. е р 2. Готовят среду в соответствии с примером 1, но компо" ненты среды берут в следующих концентрациях, мас%:

Фосфорнокислый однозамеп;енньп кали "

Фосфорнокислый двузамещенный натрий 0,17

Сернокислнй магний 0,075 25

Сахароза 20,0

Хлоргексидин глюконат, 20%-ный раствор

Дистиллированная вода Остальное

Выход 95-98% через 3-4 ч инкубирования.

Пример 3. Готовят среду в соответствии с примером 1, но компоненты среды берут в следующем коли- 35 чественном соотношении, мас.%:

Фосфорнокислый однозамещенный калий 0,125

Фосфорнокислый двузамещенный натрий

Сернокисльп магний

Сахароза

Хлоргексидин глюконат, 20%-ный раствор 1.5

Дистиллированная водя Остальное

Выход 85-90% через 3 ч инкубированйя, 95-98% через 4 ч инкубироваНИ i °

При использовании известной среды выход клеток на уровне 90-97% через

24 ч инкубирования.

Использование среды позволяет ускорить получение сферопластов и тем самым повысить производительность процесса.

Питательная среда для получения сферопластов микобактерий туберкулеза, содержащая фосфорнокислый одно замещенный калий, фосфорнокислый двузамещенный натрий, сернокислый магний, сахарову, лизирующий агент и дистиллированную воду, отличающаяся тем, что, с целью ускорения получения сферопластов при сохранении продуктивности, она в качестве лизирующего агента содержит 20%-ный раствор хлоргексидин глюконата при следующем количественном соотношении компонентов, мас.7:

Фосфорнокислый однозамещенный калий 0,1-0,15

Фосфорнокислый двузамещенный натрий

Сернокислый магний

Сахароза

207-ный раствор хлоргексидин глюконата 1,0-2,0

Дистиллированная вода Остальное