Патент ссср 162086
Иллюстрации
Реферат
СОеа СОВЕТС )4)
СОЦИААИСТИЧЕСг11Х
1 ЕСПУ БЛИК
Класс
6а, 22о, ОПМСЛИИЕ
И ЗОБ РЕТЕН ИЛ
К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ № 162086
МПК
С 121
Заявлено 13.Ч.1963 (_#_s 836317/31-16) Опубликовано 16.IV.1964. Бюллетень М 9
ГОСУДАРСТВБННь1И
КОМИТБТ 110 АБЬАМ
ИЗОБРБТБНИН И ОТКРЫТИИ
СССР
Подписная группа Лб 252
z
Ф. Л. Лейтес и Б. Л. Лемперт
1:
1 1
Ч
СПОСОБ ВЫЯ ВЛ ЕН ИЯ ВНУТРИТКАН ЕВОЙ ЛОКАЛИЗАЦИИ
ФЕРМЕНТА ЛИПОПРОТЕИНОВОЙ ЛИПАЗЫ
Предмет изооретения
Изобретение относится к способам выявления внутритканевой локализации фермента липопротеиповой липазы.
Известсн биохимический способ определения липопротеиновой липазы смешением субстрата с ферментом и другими компонентами при О=С и инкубации при 37 С. Субстрат состоит из 2%-ной эмульсии кокосового мас1а, активированной свежей сывороткой крови человека, а фермент липопротеиновой липазы получают экстракцией сердца крысы с ацетоновым порошком н аммиаком с последующей фильтрацией полученного экстракта.
При известном способе локализацию фермента в ткани определить нельзя.
Предложенный способ отличается от известного тем, что позволяет выявлять локализацию фермента липопротеиновой липазы в тканях гистохимическим методом с применением в качестве субстрата эмульсии триглицсридов, активированной сывороткой крови человека.
Пример. Исследуемые на локализацию фермента органы и ткани (сердце, печень, легкое, жировая клетчатка и т. д.) подвергают фракции в 10о о-ном формалине при 4 С, готовят из пих гистологические срезы толщиной 10 лк, наклеивают на предметные стекла и помешают в инкубационную среду.
Субстрат готовят в компрессионной коллоидной мельнице с зазором 0,2 лл и скоростью ротора 4500 об)мин. Субстрат состоит из
50%-ной эмульсии абрикосового масла, сгабилизированной 10 /о -ным расгвором сывороточного альбумина. Эмульсио смешивают (1: 1) со свежей сывороткой крови человека и инкубируют при 37 С 1 час, центрифугпруют со скоростью 15000 об/лин, снимают верхний слой и добавляют 0,5% тимола.
Инкубацию срезов в указанной среде производят 48 час при 37"С, далее срез помещают в раствор 10 "е-ного хлористого кальция, который переводит освобожденные от субстрата жирные кислоты B кальциевые мыла.
Срез обрабатывают 10%-пым азотнокислым свинцом и 0,570 -hbIAI сернистым натрием, в результате чего в месте расположения в тканях жирных кислот образуется коричневый осадок сернистого свинца. Расположение ферментов определяют по локализации этого осадка в тех или иных элементах ткани.
Способ выявления BHутритканевой локализации фермента липопротеиновой липазы, отл и и а ющи йс я тем, что определение проводят гистохимпческим путем с субстратом-эмульсией триглицеридов, активированной сывороткой крови человека.
l ñëàêòîð А. Байнова
Составитель 3. И. Вальковская
Тскред Ю. Баранов
Корректор И. Шпынева
Г!одп. к печ. 23 г — 64 г. Формат бум. 60К90 -/, Объем О,11 изд, л.
Заказ 881 !7 Тираж 475 Цена 5 кои.
ЦНИИП11 Государственного комитета по делам изобретений и открытий СССР
Москва, Центр, пр. Серова, д. 4
Типография, пр. Саганова, 2