Способ определения общего белка в моче
Иллюстрации
Показать всеРеферат
СОЮЗ СОВЕТСКИХ
СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ
РЕСПУБЛИК (я)л G 01 N 33/50
ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ
ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ
ПРИ ГКНТ СССР
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4608975/14 (22) 25.11.88 (46) 30,01.91, Бюл. М 4 (71) Институт физико-органической химии и углехимии АН УССР (72) О,Л. Миронов, В.М. Билобров, T.Н, Соломойченко, В.А. Савелова и В,Г. Заславский (53) 612.461. 174(088. 8)
56) Clln. chem., 1973, ч. 19, р. 1265—
267. (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ОБЩЕГО
БЕЛКА В МОЧЕ (57) Изобретение относится к области клинической медицины и касается способов onИзобретение относится к области клинической медицины, конкретно к способам определения количествел ного содержания белка в моче.
Целью изобретения является повышение точности.
Способ осуществляют следующим образом.
В центрифужную пробирку емкостью 510 мл вносят пробу мочи человека 0,2 мл.
Далее добавляют в пробирку 2 мл раствора
3 трихлоруксусной кислоты, содержащего краситель ПК-144 с концентрацией 0,01;ь.
Проба центрифугируется 10 — 15 мин при
2000 — 4000 об/мин, супернатант сливают и капли оставшегося раствора удаляют фильтроввльной бумагой. К оставшемуся осадку добавляют 4 мл 0,2 N раствора NaOH и центрифужную пробирку встряхивают до полного растворения осадка. В качестве контроля используют физиологический раствор, над которым последовательно выполняют те же операции, Далее на,, БЫ„„1624323 А1 ределения концентрации общего белка в моче. Целью способа является повышение точности. Сущность изобретения заключается в использовании триметинового красителя — тетракалиевой соли бис-((1-(4сул ьфофе нил)-3-карбоксипиразолон-5))-триметоксанина, имеющего высокий коэффициент экстинкции (е = 4,6 10 л моль см
4 . -1 при А,акс540 нм в растворе 0,2 í. NaOH). К пробе мочи добавляют раствор трихлоруксусной кислоты и красителя, центрифугируют пробу и определяют оптическую плотность при Я 540 нм, по которой и определяют концентрацию белка. Предложенный способ может быть использован для серийных измерений в клинических лабораториях. 1 ил., 1 табл, спектрофотометре СФ-26 (или спектрофотометрах того же класса точности) измеряют оптическую плотность (D) раствора при
1=540 нм, содержащего комплекс белок— краситель в 1 см кювете против контроля.
Значение концентрации общего белка в моче (С мг/л) определяют по калибровочному графику оптическая плотность — концентрация белка в моче.
Для построения калибровочного графика используют растворы человеческого сывороточного альбумина с концентрацией белка,мг/л: 25; 50; 100; 250; 500; 750; 1000;
1250, Растворы готовят методом гравиметрии, Уравнение линейной регрессии
С=1187,3; D -2,48; г=0,999; 506щ=19,7 (см. чертеж).
Пример 1. Указанным способом определяют концентрацию общего белка в моче здорового человека. Для 10 параллельных анализов пробы среднее арифметическое значение концентрации белка в моче составило С=46 мг/л (см. таб1624323
1,0
О,E
0,9
0,2
Ф20 оО 500 510 58D 620660 Цни) Составитель В. Митюшин
Техред М,Моргентал Корректор С.Шекмар
Редактор О. Спесивых
Заказ 184 Тираж Подписное
ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР
113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5
Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул,Гагарина, 101 лицу, проба N 1). Полученные результаты, статистически обработанные известным методом, сведены в таблицу, Как видно из приведенной таблицы, общая дисперсия (Яо6щ. и коэффициент вариации (КВ) ниже для данного способа, чем для прототипа, Особенно это выражено в области малых концентраций общего белка.
Формула изобретения
Способ определения общего белка в моче путем добавления к пробе раствора трихлоруксусной кислоты и красителя, центрифугиравания образца, растворения осадка в рстворе едкого натра и определения содержания белка в пробе по величине оптиче5 ской плотности, отл и ч а ю щи йся тем, что, с целью повышения точности. в качестве красителя используют триметиловый краситель — тетракалиевую соль бис-((1-(4сул ьф оф е н ил)-3-ка рбо к си и и резал он-5))три10 метоксанина и измерение оптической плотности проводят при Х= 540 нм,