Способ определения азота, окисленного в растении

Способ определения азота, окисленного в растении

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

Изобретение относится к сельскому хозяйству, з частности к способам определения форм азота в растениях , и может быть использовано при разработке основ комплексного использования минеральных и органических удобрений. Целью изобретения является повышение точности и ускорение процесса. Определение азота, окисленного в растении, проводят путем отбора пробы растения, культивируемого в стерильных условиях на питательной среде, содержащей восстановленный азот, меченный 5N, после чего осуществляют барьерный кнкрононофорез растительной пробы на полиакриламидном геле с ацетатцеллкхпозной мембраной . Далее в пробу вводят окись магния и сплав Деварда и проводят паровую дистилляцию аммиака из нитратов, причем содержание окисленного в растении азота определяют на масс-спектрометре . Предлагаемый способ позволяет повысить точность на 60% и значительно сократить время подготовки образца к анализу. 1 табл.

СО1ОЭ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ

РЕСПУБЛИК (51)5 А 01 С 7/00

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К А ВТОРСНОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТНРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР (21) 4672019/13 (22) 31.03.89 (46) 28.02.91. Нюп. Р 8 (71) Московская сельскохозяйственная академия им. К.А.Тимирязева (72) Н.А.Савидон, Б.А.Ягодин и И.Ч.Верниченко (53) 631.811.1(088.8) (56) Ягодин Б.А. и Верниченко И.В.

Возможность окисления аммиачного азота в тканях растений до нитратов (опыты с "N). — Известия АН СССР, сер. биологическая, 1984, У ",с.268-272. (54) СПОСОБ ОПРГДЕЛЕНИЯ АЗОТА,ОКИСЛЕННОГО В РАСТЕНИИ (57) Изобретение относится к сельскому хозяйству, в частности к способам определения форм азота в растениях, и может быть использовано при разработке основ комплексного испольИзобретение относится к сельскому хозяйству, в частности к способам определения форм азота н растениях, и может быть использовано при разработке основ комплексного использонания минеральных и органических удобрений.

Цель изобретения — повышение точности и ускорение процесса.

Пример. Растения картофеля высаживают в стерильные пробирки с

5 см стандартной среды Мурасиге-Ску1 гз, содержащей 4 мг азота н форме (NH4) SO с обогащением И 96,3 ат., и культивируют в стерильных условиях

„„SU„„1630680 А 1

2 зования минеральных и органических удобрений. Иелью изобретения является повышение точности и ускорение процесса, Определение азота, окисленного в растении, проводят путем отбора пробы растения, культивируемого в стерильных условиях на питательной среде, содержащей восстановленный азот, меченный 5N, после чего осуществляют барьерный кикроионофорез растительной пробы на полиакриламидном геле с ацетатцеллежозной мембраной. Далее н пробу вводят окись магния и сплав Деварда и проводят паровую дистилляцию аммиака из нитратов, причем содержание окисленного н рапении азота определяют на масс-спектрометре. Предлагаемый способ позволяет повысить точность на 60/ и значитель- но сократить время подготовки образца к анализу. 1 табл. в течение 2 мес. Затем отбирают пробу свежих листьев картофеля массой 0,5 г, растирают н фарфоровой ступке и переносят в стакан емокостью 50 см с

10 см дистиллированной воды для определения концентрации нитратов потенциометрическим способом с помощью ионоселективного электрода и иономера.- Затем растительную пробу упаривают до 1,0 см на водяной бане, в

3 нее вводят 4,см насыщенного растноз ра сахарозы и серной кислоты таким ообразом, чтобы обший объем не превышал 6,0 см, а рН 3-3,5. Гомогенат з наносят на предварительную мембрану

1630680

Полученный конденсат содержит аммиак, который B дальнейшем испо.:-.— зуют для определения азотопного сос5 тана на масс-спектрометре (см. таблицу) .

Для того, чтобы рассчитать точность определения окисленного азота в 16,1 г сухих листьев картофеля (т. е. на 1000 растений), использова- ли следующие данные: содержание нит-, ратов 1, 72%; избыток обогащения N сер нокислого аммония, введенного в питательную среду в начале культивирования растений картофеля 95,2 ат.%, избыток обогащения 1 N нитратного а з от а ра с т е ний, опр едел енног о в конце вегетации предлагаемым способом, 0,036 ат.% и н известном способе

0,096 ат.%. Далее рассчитывают: общее количество азота нитратов

16 1 1 72 "1000

75 . где 1000 — коэАЬициент перевода граммон в милиграммы;

О мг/1000 растений, I количество избыточного <

290, Oi О, 096 1000

278,4 мкг/1000 растений

У

У где 1000 — коэАйициент перевода Н 278 4 100 граммон и микрограммы; j5-2 — — = 292,4 мкг/,000 Растений; количество азота, окисленного в количество избыточного ЗЯ, сорастениях согласно известному способу держащегося в нитратах согласно согласно предлагаемому способу

290,0 0,038 1000

110 2 мкг

/1000 растений; количество окисленного в растениях азота согласно предлагаемому способу

110. 2.100 — 115,8 мкг!1000 растений, 45 точность известного способа (принимаемая точность предлагаемого метода 100%):

115 8 ° 100 — — — -=396%

292,4

Таким образом, способ определения . азота, окисленного в растениях согласно изобретению,позволяет значительно (до

60%) повысить точность с однонременным сокращением времени ня подготовку образца к анализу в 25-30 раз. из ацетата целлюлозы, которая непосредственно примыкает к кислому синтезированному полиакриламидному гелю.

В качестве электролита используют

0,905 н.раствора И 804, катод опускают в верхний электродный буферный раствор. Барьерный микроионофорез ведут при плотности тока 20-30 мА ня см в течение 30 мин. "-атем анодный электролит полностью переносят н колбу кнарценого аппарата "полумикрокьельдаль", в которую одновременно добавляют прокаленную окись магния и сплав Деварда и проводят паровую дистилляцию аммиака, образовавшегося при восстановлении нитратов, со скоростью отгона 7,5 см /мин до

3 объема конденсата 30 см в стакане, 3

3 первоначально содержащим 10 см

О, 01 н.раствор HgSOy, <

Формула изобретения

Способ определения азота, окисленного в растении, включающий отбор пробы растения, культивируемого н сте- . рильных условиях на питательной среде, содержащей восстановленный азот, меченный 1 И, подготовку пробы к масс-спектрометрическому анализу и анализ содержания окисленного азота, отличающийся тем, что, с целью повышения точности и ускорения процесса, подготовку к масс-спектрометрическому анализу осуществляют путем барьерного микроиноЬореза растительной пробы на полиакрилямидном геле с ацетатцеллюпозной мембраной, после чего н нее вводят окись магния и сплав Деварда для восстановления окисленного азота и проводят первую .стилляцию аммиака.

1630680

Опрцзеленне аэотопного состава нитратов н количество азота, окисленного в стери ьнью растаю>ях квртореля зеестю>й способ агав>оо> способ

Пробы Тип раститапьной пробн ение вота тон>

1000 раО, 096

О, 708

О, 192

О, 462

1,074

О, 557

1 Листья 16,8. 1,72 0,405 0,039 118,8

2 Вц бни 4,1 0,81 0,570 0,204 71 1

3 Хорна 1,t 0>50, 0,401 0,035 2,0

Ф

Рассчитинвлся следующем образонл обогащение 8 азота нитрвтоэ >юнус пряропное обогащение 5N <0>366 ат.Х). аз Припер расчете дан з описании изобретения.

Составитель С.Куваева

РеДактоР Н.КиштУлинед ТехРеД П,0ли1внык КоРРектоР И.Иаксинииинед

Заказ 504 Тираж 389 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ L;t;CP

113035, Иосква, Ж-35, Раушская наб«з д. 4/5

Производственно-издательский комбинат Патент, r,Óæãîðîä, ул. Гагарина, » >1

Г а ина 101

Сухая са рве ний г/t000 стений

1збь>ток

N азота нитра«е1 тоэ,вт..Х

Хопнчестео азота. окисленное н рвстеюп1х, нкг/1000 з растений

Обогащение

Я азота ннтратон, вт.Х

Извитая зМ азоте > ннтра тоз, ат. оюзч ест зета кисленное стенн292,4

247,4

11> 1