Способ индукции чешуй лилий к луковичкообразованию

Способ индукции чешуй лилий к луковичкообразованию

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

Изобретение относится к биотехнологии , а именно к микроклональному размножению растений, в частности к размножению лилий луковицами, полученными из чешуи. Целью изобретения является повышение коэффициента размножения лилий при сокращении времени их получения. Способ состоит в том, что отделенные чешуи луковиц замачивают на 8-12 ч в цитокининовом препарате Микроцит (5-15 мл/л) и последующее получение дочерних луковичек осуществляют при.23-27°С. 3 табл.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (SI)S А 01 Н 4/00

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТ

Н ABTOPCHOMY СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

IlO ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР (21) 4655720/13 (22) 27.02.89 (46) 28.02.91. Бюл. 1 - 8 (7t) Латвийский государ"твенный университет им.П.Стучки и Институт микробиологии им.А.Кирхенштейна

AH ЛатвССР (72) Д.X Гертнере, А.К.Зоргевиц, М.Я.Карклинь, И.В.Мишке и M.Ê.Òåâåëåâà (53) 578.085.23 (088.8) (56) Иванова Н.В. Влияние регуляторов роста на размножение лилий.

Бюлл. ГБС АН СССР, 1983, вып.127, с.64-62.

Изобретение относится к биотехно-; логии, а именно. к клональному размножению растений луковицами, в частности чешуями луковиц.

Цель изобретения — повышение коэффициента размножения лилий при сокращении времени их получени.".

Способ состоит в том, что отделен ные от материнской луковицы чешуи выдерживаются в цитокининовом препарате Микроцит в концентрации от 5 до

15 мп/л. Микроцит в отличие от синтетических цитокининов (бензиламинопурин или bAII) стимулирует индукцию и рост луковичек и его стимулирующее| действие выше по сравнению с некоторыми препаратами из группы,ауксинов (НУК) .

Для получения препарата Микроцит ведут культивирование эпифитной бак» терии Pseudomonas stutzeri 136 в те„„Я0„„163О710

2 (54) СПОСОБ ИНДУКЦИИ ЧЕИУЙ ЛИЛИЙ

К ЛУКОВИЧКООБРАЗОВАНИЮ (57) Изобретение относится к биотехнологии, а именно к микроклональному . размножению растений, в частности к размножению лилий луковицами, полученными из чешуй. Целью изобретения является -повышение коэффициента размножения лилий при сокращении времени их получения. Способ состоит в том, что отделенные чешуи луковиц замачивают на 8-12 ч в цитокининовом препарате Микроцит (5-15 мл/л) и последующее получение дочерних луковичек осуществляют при .23-27 0. 3 табл. чение 24 ч в 250 мл колбах при соотношении инокулянт:среда = 0,08 сухих клеток на 1 л питательной среды, на качалках 220 об/мин при 28 С. Через, 24 ч культуральную жидкость отфильтровывают и концентрируют на роторном вакуумном испарителе в 10 раз.

Затем стерилизуют при 0 5 атм в течение 10-15 мин. Препарат Микроцит содержит пуриновые вещества с цитокининовой активностью, витамины, органические кислоты, индолилуксусную кислоту, образующиеся как продукты жизнедеятельности эпи@итной бактерии.

Пример 1. Лабораторный опыт.

От выкопанных в сентябре луковиц лилий отделяют по 5-10 наружных чешуй от каждой луковицы. Чешуи выдерживаются в течение 8-12 ч в водных растворах препарата Микроцит от 4 до

16 мл/л. После обработки чешуи по1630710

Таблица

Образование луковичек на чешуях разных сортов лилий после обработки в течение 10 ч

0 регуляторами роста и выдеркивания при температуре 25 С в течение 5 недель

Вариант обработки

Обработка

L.regaie

"Dzelme"

Общая числ,, Индуц. чеш., й

Число луковичек щая Индуц. сл. чеш., шу,шт.

Всего, шт.

На l чеш., шт. чеш. „ шт.

60 82 БО 82

60 66

60 80

60 80

60 82

60 80

60 75

50 80

50 82

50 74

50 80.

50 80.

50 100

50 93

50 90

НУК 25 мг/л

Вода

ВАЛ 10 иг/л

Иикроцит 4. мп/л

Иикроцит 5 ил/л .

Никроцит 10 ип/л

Иикроцит 15 ил/л

Иикроцит 16 ил/л

113 1,89+0,32.2 1,20+0,20.

59 0,98+0,08

78 1,30+0,09

99 1,65 0,21!

3& 2,2т+О, 13

118 1,9600,09

84 1,40+0,10

157 !

82

106 !

37 !

89

l63

ll6

Известная

Контроль, Предлагаемая

Продолжение табл.

"Ьае1ше" :

Вариант обработки

"Dzintars"

Обработка

Число луковичек

К Общая Индуц. числ. чеш., чеш., - Ж шт ° . 141 80 80

100 80, 69

Число луковичек

Всего, На l чеш., шт. шт.

Всего, Иа чеш., шт. mT °

92 1,84+0, 14

65. 1,30+0,09

Известная НУК 25 мг/л

Контроль Вода

86 1,07+0,09 !47

58 0,72+0, 12 100 мещают в полиэтиленовые мешки са сфагновым мхом (антисептик) и выдерживают в термостате при температуре

22-28 С, где в течение 7 недель и!! о дуцируется образование дочерних луко-. вичек.

Пример 2. Полевой опыт. Аналогично лабораторному опыту отделен. ные и обработанные чешуи лилий вы-, 10 саживают в ящики, наполненные на 2/3

: высоты нейтрализованным и обогащен, ным минеральными элементами торфом

;и покрытым слоем перлита . Чешуи высаживают в перлитный слой, углубляя 15 на 2/3 их высоты. Ящики помещают в теплице при 18-20 С на 8 недель, посо ле чего выставляют на зимовку в пар-. ник. Результаты оценивают в мае, Результаты опытов по примерам 20 представлены в табл. 1-3.

Таким образом, настоящий способ обработки чешуй лилий препаратом

Микроцит в концентрации от S до 15 мл/л в течение 8-12 ч с последующим выдерживанием их при температуре .

23-27 С сроком до 5 недель увеличива-. о ет число образовавшихся луковичек °

Их число выше контроля (вода) от 37 до 89% в зависимости от сорта и вьппе 30 ранее известной обработки (НУК) от

11 до 48%. Коэффициент размножения после обработки Микроцитом от 137 до 184%, Особенно чувствите!!ьными в обработке являются трудно размножаемые лилии из группы трубчатых лилий (L.regale, "Dzelme"), число луковичек вьппе контроля на 89%, коэффициент размножения — 189%.

Предлагаемая обработка увеличивает число индуцированной чеш3и от

82 до 100% от всей чешуи, используемой в эксперименте. В контроле (вода) луковицы образуют от 69 до 82%, после обработки НУК вЂ” от 80 до 82% всех чешуй.

Формула изобретения

Способ индукции чешуй лилий к лу.— ковичкообразованию, включающий отделение чешуй, обработку их фитогормонами и помещение на субстрат с последующим получением дочерних.луковичек, отличающийся тем, что, с целью повышения коэффициента размножения лилий при сокращении времени их получения, обработку чешуй после их отделения проводят путем их замачивания на 8-12 ч в водном растворе,,содержащем 5-15 мл/л цитокининового препарата Микроцит, и последующее получение луковичек осуществляют при 23-?7 С.!

630710

Продолжение табл, Обработка

"Dzintars"

"Dze1me"

Вариант обработки

Число луковнчек

Инцуц. чеш., Число луковичек

Общая числ. чеш., шт.

Всего, На 1 чеш,, шт. шт.

На 1 чеш»

mr, Всего, шт.

ВАП 10 мг/л 61

Иикроцит 4 мй/л 70

Иикроцнт 5 мп/л 100

ПредлагаемаяИикроцнт 10 мп/л 123

Иикроцит 15 мп/л !10

Иикроцит t6 мп/л 65

80 90 86

80 91 6t

80 90 36

80 95 87

80 92 85

80 90 59 число луковичек íà 1 чеш. в orrr,rve

>100Е число луковичек на 1, чеш. в контроле

44

К - коз>1)фициент разинонення .

Таблица 2

Образование луковнчек на чешуях разных сортов лнянй в полевом олнте

Г Dze lare"

Обрабатнл

L.геВа1е

Вариант обработки

Число луко- К

Число луковнчск на

t чеш., шт.

Число луковнчек на

1 чеш, шт. г->чек на

1 чеш» шт.

1,42о,09

1,36+0,!О

1,35+0,08

1>60 0>10 .1,60+0,! 1

1,7!+О,!2

f,46+0>09

1,20+0,!8

М» Известная ,Контроль

1 ,;Предлагаемая

Табчнца 3

Влияние ллителъиост» обработки Иикроцнтом на 10 мл/л, температУры и срока янлук>Фн на число луковичек сорта "вае1тен °

Длительность обработки 1нндукция лрн 23 c), ч

Температура во время индукннн (обработка !0 ч), С срок ннлукняи, неА

7 8 f0!

2 !3

Число луковнчак на чешу>а, вт

1,!зло>!О !>!4+0,09 1,28+0>!4 1,20+0 ° 13 f,f820,IÎ 7,!020,fO r,!4+0 ° 09 1,28iO,!4 f>raa0,09 i>00+0>!0

2,30+0>09 2,39+0,20 2>46ао>!8 2,3020>09 2,00+0>20 2,30+0,!4 2,3220,!4 2>46+0,fs 2>30+0,08 2>0020>09

2,. 40+0,09 2,4020,!5 2,47ь0,20 2,2920>!f 2,20 0,09 2 ° 20+0,09 2,32+0,>8 2,4730,20 2,32+б,!4 2,32то f0" а

Составитель В.Демкин редактор С>Лисина Техред Я.Моргентал Корректор Л.Пилипенко

,Заказ 505 Тираж 352 Подписное ! ВНИИХИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб, д. 4/5 и

Производственно-издательский комбинат Патент, г. Ужгород, ул. Га ар

ri л Гага ина 101

НУК 25 ит/л

Вода

БАП:10 мг/л

Инкроцнт 4 мл/л

Инкроцнт 5 мл/л

Иикроцнт !О мп/л

Инкроцнт t5 нн/л

Инкроцнт 16 мл/л

1,23ЧО, 11

f 40+0, 11

2,00+0,09

2,46+0, 18

2,38+0, 09

1,3120, 10

106

154

189

183

102

103

1ÎO

99

1!8

118

126

107

1, 80209 12

1,78+0,09

2>0+0>2f

t 80+),!!

t>8220>!3

2,54+0,12

1,784.0 !4

t,50+Î,09

10!

tt2

10!

t02 !

43

1,07+0,08

0,76+3, 10

1,67+0>08

1,19+0 10

1,06 0 09

0,74+0,09

,35+0, 18

1,28 0,09

1, 13+0,!4

t>20+0 ° f0

1, 20+0 14

1,67+0,О9

1,43+0,12

1,20+0,09

147 1 07

147

147

104

105 .100

88

94

94

130 !

12