Штамм бактерий viвriо сноlеrае еlтоr 80 - источник умеренного фага хп серотипа х гетероиммунной категории

Штамм бактерий viвriо сноlеrае еlтоr 80 - источник умеренного фага хп серотипа х гетероиммунной категории

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

Изобретение относится к микробиологии , в частности к лабораторной диагностике холерных вибрионов. Цель изобретения - новый лизогенный неэпидемический штамм 80 Vibrio cholerae eltor, несущий фаг X гетероиммунной категории 80. Цтамм 80..обладает типичными для вида культурально-морфологическими и физиологическими признаками , относится серологически к серовару Огава. Фаг 80 относится к XII серототипу холерных фагов II морфологической группе по систематике А.С.Тихоненко. При лизогенизации реципиентного штамма Vibrio cholerae 570 фаг 80 создает специфический иммунитет . Субкультуру 570/80 используют для прямого фаготипирования холерных вибрионов Эльтор. 1 табл. с S

СОЮЗ СОВЕТСНИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ

РЕСПУБЛИН (19) (11) (51)5 С 12 N 7/00

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Н АВТОРСИОМЪ(СвйДЕТЕПЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТНРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР (21) 4654141/1 3 (22) 22,02.89 (46) 28,02.91. Бюл. К- 8 (71) Всесоюзный научно-исследовательский противочумный институт "Микроб" (72) Н М.Остроумова, Г.И.Коровкина, Т.Б. Караваева, В.П.Мороз и Н.П.Коннов (53) 576.858.9(088.8) (56) Авторское свидетельство СССР

Р 761560, кл. С 12 N 7/00, 1978. (54) ШТАММ БАКТЕРИЙ ЧТВКХО СНОЕЕКАЕ

ELT0R 80 — ИСТОЧНИК УМЕРЕННОГО ФАГА

XII СЕРОТИПА Х ГЕТЕРОЮЯУННОЙ КАТЕГОРИИ (57) Изобретение относится к микробиологии, в частности к лабораторной

Изобретение относится к микробиологии, в частности к лабораторной диагностике.

Цель изобретения — дикий лиэогенный неэпидемический штамм 80 Vibrio

cholerae eltor несущий новый фаг Х гетероиммунной категории 80, используемый в системе тест-культур фаготипирования холерных вибрионов классического и эльтор биотипа.

Культурально-морфологические признаки.

Подвижные слегка изогнутые палочки 1,1-2ъб мкм в длину и 0,2-0,4 мкм в ширину с одним полярно расположенным жгутиком, спор и капсул не образуют, грамотрицательны.

На твердых питательных средах (агар Мартена, агар Хотингера рН бй0,2) образуют через 18 ч выращивания при 37+1 С круглые диаметром

2 диагностике холерных вибрионов. Цель изобретения — новый лизогенный неэпидемический штамм 80 Vibrio с11о1егае

eltor, несущий фаг Х гетероиммунной категории 80. Штамм 80 обладает типичными для вида культурально-морфологическими и физиологическими признаками, относится серологически к серовару Огава. Фаг 80 относится к

XII серототипу холерных фагов II морфологической группе по систематике

А.С.Тихоненко. При лизогенизации реципиентного штамма Vibrio cholerae

570 фаг 80 создает специфический иммунитет. Субкультуру:570/80 используют для прямого фаготипирования холерных вибрионов Зльтор. 1 табл.

Э,О+0,3. мм полупрозрачные колонии с голубоватым оттенком, ровным краем, слегка уплотненным центром. На жидких питательных средах (бульон Мартена, 17-ная пептонная вода, бульон

Хотингера, рН 7,8+0,2) через 6 ч выращивания при 37+1 С образует равномерную муть и нежную пленку на поверхности ти.

Физиологические признаки.

Тест на оксидазу положителен, Штамм разлагает до кислоты без газа маннозу, глюкозу, сахарозу, маннит, не разлагает арабинозу, инозит, лакторух ферментирует и окисляет глюкозу на среде Хью-лейфсона, ферментирует крахмал и желатину, не образует дигидролазУ аргинина, образует декарбоксилазы лизина и орнитина, не растет при повышенной (7-10K) концентрации хлорида натрия, гемолизирует эри1631078

Формула изобретения

Нтамм бактерий Vibrio cholerae

eltor KM-24 (80) — источник умеренного фага XII серотина Х гетероиммунной категории. ного Aara штамма V.eltor 80

Лизогенна по фагу им-. мунной категории

Чувствительна к фагу иммунной категории

I II III IV V VI

41 70 222Н 132 98,х 611

Субкультура

VII VIII IX Х

893 583 6901 80

570 и 485

485/41

485/70 .485/222Н

485/132

485/98,х .

570/611

570/893

570/583 .570/6901

570/80 °

+ +

+ +

+ + + +

+ + + +

III

VI

VII

VIII

1Х

+ +

+ +

+ +

+ +

+, +

+ +

+ +

+ + +

+ + +

+ + +

+ + +

+ + +

+.

t У

Примечание. Плюс — культура чувствительна к фагу; минус — культура резистентна к фагу. троциты барана по Грейгу,. агглютинирует куриные эритроциты, не чувствителен к полимиксину.

Серологические свойства.

Нтамм агглютинируется до титра холерными сыворотками РО и Инаба.

Исследования умеренного фага 80 под электронным микроскопом показывают, что он относится к II MopAO 10 логической группе по классификации

А.С.Тиохоненко, по серологическим свойствам принадлежит к XII серотипу холерных фагов., Ha газоне индикаторного штамма Vibrio cholerae eltor..

570 образует очень мелкие неправильной формы мутные колонии 1,0 0 2 мм в диаметре.

Нтамм 80, депонирован в музее живых культур Всесоюзного научно-иссле- 20 довательского противочумного института "Микроб" под номером КМ-24 (80).

Пример. Для получения специфической тест-культуры 570-80 готовят фильтрат (фильтрацией через бактерио- 25 логические фильтры Ф-5) бульонной культуры 18 ч роста при 37 С штамма о, 80 и в количестве 1 мл соединяют с 0,2 мл бульонной культуры трехчасового роста индикаторного штамма 570 и 5,0 мл 0.77,-ного агара Мартена (расплавленного и охлажденного до

45") перемешивают и выливают на 27-ную агаровую пластинку в чашке Петри даЭ ют застыть и инкубируют 18 ч при 37 С.

При просмотре чашек отбирают одну типичную негативную колонию фага. Уколом платиновой иглы в центр негативI

Характеристика типа иммунитета умерен ной колонии забирают фагорезистентные вибрионы и переносят в пробирку с

0,1 мл бульона, из которого готовят десятикратные разведения в бульоне.

Из каждого разведения высевают на агаровые пластинки в чашках Петри по

0,1 мл и распределяют шпателем по поверхности агара. Через 18 ч инкубироо вания при 37 С на поверхности агара обнаруживают изолированные колонии лизогенных по Aary 80 клонов штамма

570, отбор которых ведут по методу

Н.Н.Жукова-Вережникова и А.С.Пехова.

Лизогенный клон 570/80 принимают в качестве тест-культуры в системе других тест-культур 485/41, 570/70, 485/222Н, 485/132, 485/98,х, 570/611, 570/893, 570/6901, несущих умеренные фаги других девяти гетероиммунных категорий. Для определения типа иммунитета умеренных фагов вибрионов эльтор различной эпидемической значимости, I

Результаты испытаний представлены в таблице.

Результат проверки на наличие умеренного фаша штамма Ч.eltor 80 методом "капли" и Грациа на индикаторном штамме Ч.eltor 570: Грациа — сливнбй лизис, "каплей" — много колоний.