Штамм вируса лихорадки долины сырдарьи для приготовления диагностических препаратов

Штамм вируса лихорадки долины сырдарьи для приготовления диагностических препаратов

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

Изобретение относится к вирусологии. Целью изобретения является повышение оптической и иммуногенной активности диагностических препаратов для лабораторной диагностики лихорадки долины Сырдарьи у людей. Оригинальный штамм вируса лихорадки долины Сырдарьи № Каз- 4909 км (ГКВ № 810) изолирован от комаров Anopheles macullpennls. Штамм прошел 6 пассажей, инкубационный период составляет 3-4 дня на новорожденных белых мышах . Инфекционный титр достигает 8,1 Ig LDso/0,02 мл. Взаимодействие штамма с культурами клеток СПЭВ, ВНК-21, Vero цитопатологического действия не вызывает, но титр вируса в культуральной жидкости достигает 4,0-5,0 Ig LDso/0,02 мл, Штамм не обладает гемагглютинирующей способностью . Штамм не чувствителен к дезоксихолату натрия и хлороформу. Штамм № Каз-4909 км показал антигенное родство с вирусом лихорадки долины Сырдарьи штаммом LEIV - Каз-3 Бол, но отличается высокой антигенной и иммуногенной активностью . Штамм используется для приготовления специфических препаратов (антигена, иммунной асцитной жидкости), которые употребляются при идентификации вновь выявленных штаммов вируса лихорадки долины Сырдарьи, повышения диагностической эффективности лабораторных исследований больных лихорадкой долины Сырдарьи и изучения иммунологической структуры населения, домашних и диких животных . 3 табл. Ј О СА) 4 ч| Ю

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (51)5 С 12 N 7/00

ГОСУДАРСТВЕННЫИ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

6 (21) 4664333/14 (22) 21.03.89 (46) 15.03.91. Бюл. М 10 (71) Научно-исследовательский институт эпидемиологии, микробиологии и инфекционных болезней и Институт вирусологии им. Д.И.Ивановского (72) Д.К.Львов, А.В.Чижов, Н.И.Дробищенко, С.К.Каримов, Т.В.Кирющенко и А.В,Гагари нова (53) 576.8.094,29(088.8) (56) Гайдамович С,Я., Львова А.И„Обухова В.P. и др. Антитела к арбовирусам в асците иммунизированных мышей. — Вопросы вирусологии, 1969, N 6, с. 676 — 683.

Львов Д.К,, Каримов С.К., Кирющенко Т.В. и др. Выделение вируса лихорадки долины

Сырдарьи. — Вопросы вирусологии, 1984, N 5, с. 553 — 558. (54) ШТАММ ВИРУСА ЛИХОРАДКИ ДОЛИНЫ СЫРДАРЬИ ДЛЯ ПРИГОТОВЛЕНИЯ

ДИАГНОСТИЧЕСКИХ ПРЕПАРАТОВ (57) Изобретение относится к вирусологии.

Целью изобретения является повышение оптической и иммуногенной активности диагностических препаратов лря лабораторной диагностики лихорадки долины

Сырдарьи у людей. Оригинальный штамм

Изобретение относится к вирусологии.

Штамм вируса лихорадки долины Сырдарьи М Каз-4909 км хранится в лаборатории трансмиссивных вирусных инфекций

НИИ эпидемиологии, микробиологии и инфекционных болезней Минздрава Казахской

CCP и в государственной коллекции вирусов

Института вирусологии им. Д.И.Ивановского

A MH С С С P под номером 810.

„„!Ж„„1634712 А1 вируса лихорадки долины Сырдарьи М Каз-, 4909 км (ГКВ М 810) изолирован от комаров

Anopheles macullpennls. Штамм прошел 6 пассажей, инкубационный период составляет 3 — 4 дня на новорожденных белых мышах. Инфекционный титр достигает 8,1 Ig

10иу0,02 мл. Взаимодействие штамма с культурами клеток СПЭВ, ВНК-21, Чего цитопатологического действия не вызывает, но титр вируса в культуральной жидкости достигает 4,0-5,0 lg 1 05о/0,02 мл, Штамм не обладает гемагглютинирующей способностью. Штамм не чувствителен к дезоксихолату натрия и хлороформу. Штамм

М Каз — 4909 км показал антигенное родство с вирусом лихорадки долины Сырдарьи штаммом LE IV — Каз-3 Бол, но отличается высокой антигенной и иммуногенной активностью, Штамм используется для приготовления специфических препаратов (антигена, иммунной асцитной жидкости), которые употребляются при идентификации вновь выявленных штаммов вируса лихорадки долины Сырдарьи, повышения диагностической эффективности лабораторных исследований больных лихорадкой долины

Сырдарьи и изучения иммунологической структуры населения, домашних и диких животных, 3 табл.

Цель изобретения — повышение антигенной и иммуногенной активности для диагностических препаратов для лабораторной диагностики лихорадки долины Сырдарьи у людей.

При идентификации штамма N Каз-4909 км по реакции связывания комплемента с набором иммунных асцитных жидкостей к вирусам, относящимся к раз1634712

55 личным группам, установлена его антигенная связь со штаммом вируса лихорадки долины Сырдарьи LE IV — Каз-3 Бол (табл. 1), Предлагаемый штамм вируса лихорадки долины Сырдарьи М Каз-4909 км имеет следующую морфологическую и физиологическую характеристику.

Морфологические признаки. При фильтрации вируссодержащей суспенэии через миллипоровые фильтры размером 100 и 500 нм снижения инфекционного титра не наблюдается, Обработка вируссодержащей мозговой суспензии дезоксихолалатом натрия и хлороформом не приводит к снижению титра вируса.

На основании морфологических, морфогенетических и антигенных признаков изолированный штамм вируса относят к семейству Plcornavlrldae, антигенной группе энцефаломиокардита, штамму вируса лихорадки долины Сырдарьи.

Культуральные свойства. При заражении перевиваемых культур клеток Чего, СПЭВ, BHK-21 штаммов N. Каз-4909 км цитопатологического действия не наступает, но титр вируса в культуральной жидкости достигает 4,0 — 5,0 Ig LDso/0,02 мл.

Адаптационные свойства. Исходный штамм вируса лихорадки долины Сырдарьи

М Каз — 4909 км выделен от комаров

Anopheles macullpennIs, адаптирован к организму 1 — 2-дневных белых мышей, прошел

6 пассажей. Инкубационный период составляет 8 дн при первичном заражении и сокращается до 3-4 дн в последующих пассажах. Инфекционный титр составляет 8,51

lg LD/0,02 мл. При заражении взрослых мышей в мозг гибель животных наступает на

4 — 5 день, а под кожу на 6 — 7 день с титром

7,5 Ig LD/0,03 мл, Антигенные свойства. Штамм не обладает гемагглютинирующей способностью.

Сахароацетоновый антиген штамма не вызывает агглютинацию эритроцитов гуся, барана, морских свинок и бельЬ мышей, При серологической идентификации в РСК штамм М Каз — 4909 км показывает антигенное родство со штаммом вируса лихорадки долины Сырдарьи, но отличается более высокой антигенной и иммуногенной активностью.

При иммунизации лабораторных животных штамм М Каз — 4909 км вызывает образование комплементсвяэывающих и вирусонейтралиэующих антител.

У больных людей с остролихорадочными заболеваниями в, сыворотках крови также выявляет комнлементсвязывающие, преципитирующие и вируснейтрэлиэующие антитела к штамму N Каз-4909 км.

Патогенные свойства штамма для животных. Вызывает смертельную инфекцию у новорожденных и взрослых белых мышей при заражении в мозг и под кожу, с инфекционным титром 8,5 Ig LD/0,02 мл и 7,51

IgLD/0,03 мл соответственно.

Патогенные свойства штамма вируса лихорадки долины Сырдарьи, Штамм является патогенным и для человека. При обследовании остролихорадочных больных роль его в инфекционной патологии установлена в 5 случаях. Данные подтве зждены лабораторными исследованиями с применением диэгностикумов, приготовленных из этого штамма.

Как показывают результаты в РСК и

РДПА с антигеном штамма N Каз-4909 км специфические антитела в сыворотках крови людей выявляются в 2 и 2,5 раза соответственно чаще по сравнению с антигеном из штамма вируса лихорадки долины Сырдарьи LE IV — Каз-3 Бол и в более высоких титрах.

Диагностический препарат антиген из штамма N Каз — 4909 км получают путем внутри мозгового заражения новорожденных белых мышей, Из мозга животных, взятых на высоте клинических проявлений заболеваний, готовят антиген путем сахароэо-ацетоновой экстракции.

Диагностическую иммунную асцитную жидкость готовят по известному методу.

Изобретение иллюстрируется следующим примером.

Пример 1, Лабораторная диагностика заболеваний человека, вызванных вирусом лихорадки долины Сырдарьи, с использованием диагностикумов, приготовленных из штамма вируса N. Каз-4909 км, Материал для исследования — сыворотки крови от больных людей с подозрением на арбовирусные инфекции, взятые в начальном периоде заболевания и реконвалесценции. Проводят постановку серологических реакций — PCK, РДПА с использованием сахарозо-ацетонового антигена, приготовленного иэ штамма вируса лихорадки долины Сырдарьи N Каэ — 4909 км, Реакцию ставят по общепринятому способу— микрометодом на аппарате Такачи, Результаты исследования сыворотки крови больного приведены в табл. 2.

Таким образом, использование предлагаемого штамма для приготовления диэгностикума способствует повышению диагностической эффективности лабораторных исследований больных лихорадкой долины Сырдарьи.

1634712

Таблица1

П р им е ч а н и е . Числитель — обратная величина титра антител, знаменатель — обратная величина титра антигена.

Таблица2

Таблица3

Составитель И.Тареева

Редактор М,Недолуженко Техред М.Моргентал Корректор О.Кравцова

Заказ 733 Тираж 366 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г, Ужгород, ул.Гагарина, 101

Пример 2, Идентификация вируса лихорадки долины Сырдарьи в биологических объектах, Материал для исследования — 10 -ная суспензия из клещей и комаров, собранных в природных очагах арбовирусных инфекций, Проводят постановку РНГА с эритроцитарными диагностикумами, приготовленными на основе иммунной асцитной жидкости иэ предлагаемого штамма вируса

ЛДСД (Ф Каз-4909 км и известного штамма

LEIV-Каз-3 6оп. РНГА ставится по известной методике (табл. 3).

Как показывают результаты исследования, препараты, приготовленные из предлагаемого штамма М Каз — 4909 км, позволяет в короткий срок и с максимальной достовер5 ностью провести идентификацию вируса лихорадки долины Сырдарьи в биологических объектах.

Формула изобретения

Штамм вируса лихорадки долины Сырдарьи ГКВ N. 870 для приготовления диагностических препаратов.