Препарат для определения плазмокоагулирующей активности стафилококков

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

Изобретение относится к микробиологии и предназначено для определения коагулирующей активности: стафилококков при их идентификации. Цель изобретения - улучшение качества препарата за счет повышения его чувствительности, упрощение и ускорение процесса определения, а также увеличение срока годности. Используемый препарат содержит сухую цитратную кроличью плазму, полиэтиленгликоль с мол.м. 4000, бычий сывороточный альбумин, сахарозу и глицерин при следующем соотношении компонентов, мас.%: сухая цитратная кроличья плазма 36,54-39,62; полиэтиленгликоль 4000 35,85-40.38; бычий сывороточный альбумин 3,84-5,66: сахароза 3,77-5,77: глицерин остальное. 3 табл.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

ВСЕСОЮЗИЯ

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

ЙА:: 4!. Й- 1 . АЫ1Мь.i .,&ЛИСТЕ iA

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4714368/13 (22) 31.05.89 (46) 15.05.91. Бюл . hh 18 (71) Кишиневский государственный медицинский институт (72) В.М.Никитин и Н.Н.Морарь (53) 577.15 (088.8) (561 Никитин В.M. Справочник методов биохимической экспресс-индикации микробов.—

Кишинев: Картя молдовеняскэ, 1986, с. 98-108. (54) ПРЕПАРАТ ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ПЛАЗМОКОАГУЛИРУЮЩЕЙ АКТИВНОСТИ СТАФИЛОКОККОВ (57) Изобретение относится к микробиологии и предназначено для определения коаИзобретение относится к микробиологии и предназначено для ускоренного определения плазмокоагулирующей активности

Стафилококков при их идентификации.

Цель изобретения — улучшение качества препарата за счет повышения его чувствительности, упрощение и ускорение процесса определения, а также увеличение срока годности.

Используемый для определения плазмокоагулирующей активности твердофазный препарат- плазмокарандаш постоянно готов к быстрому применению на стекле, содержит сухую цитратную кроличью плазму и допалн ительно полиэтиленгликол ь, бычий сывороточный альбумин, сахарозу и глицерин при следующем соотношении ингредиентов, мас. :

Сухая цитратная кроличья плазма 36,54- 39;62

„„. Ц „„1 648977 А1 (я)э С 12 0 1/00, 1/14, 1/56 гулирующей активности стафилококков при их идентификации. Цель изобретения— улучшение качества препарата за счет повышения его чувствительности, упрощение и ускорение процесса определения, а также увеличение срока годности. Используемый препарат содержит сухую цитратную кроличью плазму, полиэтиленгликоль с мол,м, 4000, бычий сывороточный альбумин, сахарозу и глицерин при следующем соотношении компонентов, мас.g. сухая цитратная кроличья плазма 36,54-39,62; полиэтиленгликоль 4000 35,85-40,38; бычий сывороточный альбумин 3,84-5,66; сахароза

3,77-5,77: глицерин остальное . 3 табл, Полиэтиленгликоль с мол. м. 4000 35,85-40,38

Бычий сывороточный альбумин 3,84 — 5.66

Сахароза 3,77 — 5,77

Глицерин Остальное 0

Твердый препарат имеет форму карэн- Фь даша и.обладает пишущими свойствами по 00 стеклу, пластмассе, фарфору, О

В качестве ингредиентов в препарате используют: сухую цитратную кроличью плазму — порошок белого цвета; полиэтиленгликоль с мол.м. 4000- кристаллы белого цвета; бычий сывороточный альбумин — лиофилизированный порошок белого цвета; сахарозу ЧДА — кристаллический порошок белого увета: глицерин чистый — бесцветную прозрачную жидкость.

Сухую цитратную кроличью плазму вводят в препарат в качестве специфического субстрата, полиэтиленгликоль — в качестве

1648977

10 вносят подиэтиленгликоль, сухую цитрат- 15 ную кроличью плазму, бычий сывороточный альбумин, сахарозу и растирают до получе20 мол.м. 4000, 2 г сухой цитратной кроличьей плазмы, 0,25 r бычьего сывороточного альбумина, 0,25 r сахарозы и тщательно расти- 30 ремеаивании добавляют 0,75 мл глицерина до образования однородной массы вязкой консистенции, которой придают форму ка- 35

Как видно из табл. 1, все плаэмокарандлительной сохранностью. 55

Плазмокарандаш применяют следующим образом. твердофазного носителя субстрата, консерsama и стабилизатора; обусловливающего форму и пишущие свойства препарата, бычий сывороточный альбумин — в качестве связывающего агента, улучшающего пишущие свойства препарата, сахарозу как стабилиэатор и связывающий компонент и глицерин как агент, регулирующий консистенцию, пластичность и способствующий сохранению физико-химических свойств препарата, Препарат получают следующим образом.

В фарфоровую ступку последовательно ния белой пудры, затем каплями добавляют глицерин и перемешивают до образования однородной массы вязкой консистенции, которую формуют в виде карандаша, используемого впоследствии многократно для определения плазмокоагулирующей активности стафилококкав на предметном стекле;

Пример. В фарфоровую ступку последовательно вносят 2 г полиэтиленгликоля с рают в течение 20 мин до получения мелкой пудры. Затем каплями при постоянном перандаша. Полученный плазмокарандаш вводят в пластмассовый футляр и хранят в холодильнике при 4 С, По мере надобности плазмокарандаш используют в работе (срок наблюдения 3 года).

В табл. 1 приведены показатели качества плаэмокарандаша в зависимости от содержания ингредиентов; в табл. 2 — оценка экономичности определения плаэмокоагулирующей активности стафилококков с помощью известного и предлагаемого препаратов; в табл. 3 — оценка скорости определения плазмокоагулирующей активности стафилококков с помощью известного и предлагаемого препаратов. даши, содержащие ингредиенты в пределах граничных значений, обладают хорошими пишущими свойствами, пластичностью и

На чистое предметное стекло наносят плазмокарандашом 2 — 3 пересекающихся

50 штриха, каждый длиной до 1 см. Затем на штрихи наносят каплю физраствора и в ней тщательно эмульгируют бактериальную петлю 18-24-часовой исследуемой культуры стафилококка. Контролем служат любые коагулазоотрицательные микробы. Предметное стекло помещают во влажную камеру и инкубируют в термостате при 37 С. Через каждые 15 мин учитывают результаты.

В опытной капле через 30-40 мин наступает частичная, в через 60-90 мин полная коагуляция плазмы. Окончательный результат можно учитывать через 2 ч. Контрольная капля через 2 ч остается жидкой.

Применение плазмокарандаша в качестве препарата для определения плазмокоагулирующей активности стафилококков является более экономичным. чем применеwe сухой цитратной плазмы, так как поэволяет использовать минимальное количество сухой цитратной плазмы и других реагентов без потерь, что снижает себестоимость препарата (табл. 2).

Кроме того, применение плазмокарандаша по сравнению с использованием сухой цитратной плазмы позволяет ускорить выдачуокончательного ответа о плаэмокоагулирующей активности исследуемой культуры в среднем в 5 раз (табл. 3).

Таким образом, технико-экономическая эффективность предлагаемого препарата состоит в уменьшении себестоимости препарата, увеличении срока его годности,- упрощении и ускорении определения плазмокоагулирующей активности стафилококков.

Ф о р мул а изобретения

Препарат:для определения плазмокоагулирующей активности стафилококков, содержащий сухую цитратную кроличью плазму, отличающийся тем, что, с целью улучшения качества препарата за счет повышения его чувствительности, упрощения и:ускорения процесса определения, а также увеличения срока годности, он дополнительно ".одержит полиэтиленгликоль с мол.м. 4000, бычий сывороточный альбумин, сахарозу и глицерин при следующем соотношении компонентов, мас. :

Сухая. цитратная кроличья плазма :36,54-39,62

Полиэтиленгликоль с мол. м. 4000 I 35,85-40,38

Бычий сывороточный ельбумин 3.84-5,66

Сахароза 3,77-5,77

Глицерин Остальное

164897Т

Ф Ю Ф

Я ® с щ с

:,Я о o

3O

S ® CL сото а о

Ф В Ф с с

Ф Ф о Фф.

Щ

Ф о о

Ф

cII С

Ь ф S . III ф я, с S

gSC2

3 cc @ c 0 Z,I

Z CII O CL S 1 м и о. Я f т *

Ф щ Э

vs с во ол

СС

CO а

Ф

S g) )K

a О, Д

1а о

Б о

С:

С9 сО

ООО

cI С Ъ - 0«cO

С > CI IO. IO CO

S о.

Ф

S с

L о

Я в

cII «г

МЪ » IO ce ЯЪ (у)

cCl - I» «CO

О О ООО О сО

0I t л

<О ССЪ

c0I О В

I» СО СО

° Ф С"Ъ СЧ

Щ о а

IO С,Ъ IO СЧ CO

С"Ъ - N а»

О О ООО О

° Ф

° Ф ceca W

Сп СО Л СО IO В

СЧ СЪ т иЪ а Л

IO N IO c«l IO

О ООО - О

0Ъ о

IO Ф

СЧ СО 0)МЪ Ф Се

С» ОСОа Г

СЧ О . C6IOri 3 сй С Ъ С9 С Ъ С Ъ

СЪ

СЧ

СЧ О СЪЪ СО

СЧ СЧ Сч -= :

МЪ O О> СЧ СЧ СЪЪ

О) и ОФ»- IO

«О СО Э СЧ

С Ъ С Ъ С"Ъ С"Ъ M 3

СО 0I O - СЧ Е Э

СЧСЧ N N х о о

S с

Ф

1" о

C х о а> о,, Ф с

iS х 3

< о

У

IJl с о

hC

S с

Ф с

I6)

K с о

Ф о

S о

Z о

S а, о „з

I- Z B

Фоо сса

cII cLI O

О -ЪС и э о

Ф с д о Ф с(ь:л

Э а

1648977

Таблица 2

Критерии экономичности

Сухая цитратная кроличья плазма

Плаэмокарандаш

2 — 3

25-30

Пробирки, пипетки

Растворение сухой плазмы, ее разведение и разливка в пробирки

До 25 — 30

Предметные стекла

Нанесение штрихов на стекло

Время постановки опыта, мин

Срок годности используемого и епа ата, лет

До 3 — 5

* После открытия ампулы 3 — 4 дня

Табл ица 3

В емя пол чения ез льтата, мин

Исследуемая культура .

Плазмокарандаш

Сухая цитратная кроличья плазма и ототип

Составитель. Н. Чаплина

Редактор Л, Веселовская Техред M,Moðãåíòàë Корректор М. Максимишинец

Заказ 1499 Тираж 374 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета.по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35„Раушская наб., 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г; Ужгород, yn,Ãaãàðèíà, 101

Количество исследований при использовании содержимого 1 амп. сухой цитратной плазмы

Используемая посуда

Подготовительная работа

Золотистый стафилакокк 209

243

"Кован-1"

"Королев"

"Иванов"

12600

" Смит"

Э пидермальный стафилококк

Сапрофитовый стафилококк

Микрококк лизодейктикус

Кишечная палочка 0-55

168

252.

282

288

246

348

62

48

66

74

74

82