Препарат для определения плазмокоагулирующей активности стафилококков
Иллюстрации
Показать всеРеферат
Изобретение относится к микробиологии и предназначено для определения коагулирующей активности: стафилококков при их идентификации. Цель изобретения - улучшение качества препарата за счет повышения его чувствительности, упрощение и ускорение процесса определения, а также увеличение срока годности. Используемый препарат содержит сухую цитратную кроличью плазму, полиэтиленгликоль с мол.м. 4000, бычий сывороточный альбумин, сахарозу и глицерин при следующем соотношении компонентов, мас.%: сухая цитратная кроличья плазма 36,54-39,62; полиэтиленгликоль 4000 35,85-40.38; бычий сывороточный альбумин 3,84-5,66: сахароза 3,77-5,77: глицерин остальное. 3 табл.
СОЮЗ СОВЕТСКИХ
СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ
РЕСПУБЛИК
ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ
ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ
ПРИ ГКНТ СССР
ВСЕСОЮЗИЯ
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
ЙА:: 4!. Й- 1 . АЫ1Мь.i .,&ЛИСТЕ iA
К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4714368/13 (22) 31.05.89 (46) 15.05.91. Бюл . hh 18 (71) Кишиневский государственный медицинский институт (72) В.М.Никитин и Н.Н.Морарь (53) 577.15 (088.8) (561 Никитин В.M. Справочник методов биохимической экспресс-индикации микробов.—
Кишинев: Картя молдовеняскэ, 1986, с. 98-108. (54) ПРЕПАРАТ ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ПЛАЗМОКОАГУЛИРУЮЩЕЙ АКТИВНОСТИ СТАФИЛОКОККОВ (57) Изобретение относится к микробиологии и предназначено для определения коаИзобретение относится к микробиологии и предназначено для ускоренного определения плазмокоагулирующей активности
Стафилококков при их идентификации.
Цель изобретения — улучшение качества препарата за счет повышения его чувствительности, упрощение и ускорение процесса определения, а также увеличение срока годности.
Используемый для определения плазмокоагулирующей активности твердофазный препарат- плазмокарандаш постоянно готов к быстрому применению на стекле, содержит сухую цитратную кроличью плазму и допалн ительно полиэтиленгликол ь, бычий сывороточный альбумин, сахарозу и глицерин при следующем соотношении ингредиентов, мас. :
Сухая цитратная кроличья плазма 36,54- 39;62
„„. Ц „„1 648977 А1 (я)э С 12 0 1/00, 1/14, 1/56 гулирующей активности стафилококков при их идентификации. Цель изобретения— улучшение качества препарата за счет повышения его чувствительности, упрощение и ускорение процесса определения, а также увеличение срока годности. Используемый препарат содержит сухую цитратную кроличью плазму, полиэтиленгликоль с мол,м, 4000, бычий сывороточный альбумин, сахарозу и глицерин при следующем соотношении компонентов, мас.g. сухая цитратная кроличья плазма 36,54-39,62; полиэтиленгликоль 4000 35,85-40,38; бычий сывороточный альбумин 3,84-5,66; сахароза
3,77-5,77: глицерин остальное . 3 табл, Полиэтиленгликоль с мол. м. 4000 35,85-40,38
Бычий сывороточный альбумин 3,84 — 5.66
Сахароза 3,77 — 5,77
Глицерин Остальное 0
Твердый препарат имеет форму карэн- Фь даша и.обладает пишущими свойствами по 00 стеклу, пластмассе, фарфору, О
В качестве ингредиентов в препарате используют: сухую цитратную кроличью плазму — порошок белого цвета; полиэтиленгликоль с мол.м. 4000- кристаллы белого цвета; бычий сывороточный альбумин — лиофилизированный порошок белого цвета; сахарозу ЧДА — кристаллический порошок белого увета: глицерин чистый — бесцветную прозрачную жидкость.
Сухую цитратную кроличью плазму вводят в препарат в качестве специфического субстрата, полиэтиленгликоль — в качестве
1648977
10 вносят подиэтиленгликоль, сухую цитрат- 15 ную кроличью плазму, бычий сывороточный альбумин, сахарозу и растирают до получе20 мол.м. 4000, 2 г сухой цитратной кроличьей плазмы, 0,25 r бычьего сывороточного альбумина, 0,25 r сахарозы и тщательно расти- 30 ремеаивании добавляют 0,75 мл глицерина до образования однородной массы вязкой консистенции, которой придают форму ка- 35
Как видно из табл. 1, все плаэмокарандлительной сохранностью. 55
Плазмокарандаш применяют следующим образом. твердофазного носителя субстрата, консерsama и стабилизатора; обусловливающего форму и пишущие свойства препарата, бычий сывороточный альбумин — в качестве связывающего агента, улучшающего пишущие свойства препарата, сахарозу как стабилиэатор и связывающий компонент и глицерин как агент, регулирующий консистенцию, пластичность и способствующий сохранению физико-химических свойств препарата, Препарат получают следующим образом.
В фарфоровую ступку последовательно ния белой пудры, затем каплями добавляют глицерин и перемешивают до образования однородной массы вязкой консистенции, которую формуют в виде карандаша, используемого впоследствии многократно для определения плазмокоагулирующей активности стафилококкав на предметном стекле;
Пример. В фарфоровую ступку последовательно вносят 2 г полиэтиленгликоля с рают в течение 20 мин до получения мелкой пудры. Затем каплями при постоянном перандаша. Полученный плазмокарандаш вводят в пластмассовый футляр и хранят в холодильнике при 4 С, По мере надобности плазмокарандаш используют в работе (срок наблюдения 3 года).
В табл. 1 приведены показатели качества плаэмокарандаша в зависимости от содержания ингредиентов; в табл. 2 — оценка экономичности определения плаэмокоагулирующей активности стафилококков с помощью известного и предлагаемого препаратов; в табл. 3 — оценка скорости определения плазмокоагулирующей активности стафилококков с помощью известного и предлагаемого препаратов. даши, содержащие ингредиенты в пределах граничных значений, обладают хорошими пишущими свойствами, пластичностью и
На чистое предметное стекло наносят плазмокарандашом 2 — 3 пересекающихся
50 штриха, каждый длиной до 1 см. Затем на штрихи наносят каплю физраствора и в ней тщательно эмульгируют бактериальную петлю 18-24-часовой исследуемой культуры стафилококка. Контролем служат любые коагулазоотрицательные микробы. Предметное стекло помещают во влажную камеру и инкубируют в термостате при 37 С. Через каждые 15 мин учитывают результаты.
В опытной капле через 30-40 мин наступает частичная, в через 60-90 мин полная коагуляция плазмы. Окончательный результат можно учитывать через 2 ч. Контрольная капля через 2 ч остается жидкой.
Применение плазмокарандаша в качестве препарата для определения плазмокоагулирующей активности стафилококков является более экономичным. чем применеwe сухой цитратной плазмы, так как поэволяет использовать минимальное количество сухой цитратной плазмы и других реагентов без потерь, что снижает себестоимость препарата (табл. 2).
Кроме того, применение плазмокарандаша по сравнению с использованием сухой цитратной плазмы позволяет ускорить выдачуокончательного ответа о плаэмокоагулирующей активности исследуемой культуры в среднем в 5 раз (табл. 3).
Таким образом, технико-экономическая эффективность предлагаемого препарата состоит в уменьшении себестоимости препарата, увеличении срока его годности,- упрощении и ускорении определения плазмокоагулирующей активности стафилококков.
Ф о р мул а изобретения
Препарат:для определения плазмокоагулирующей активности стафилококков, содержащий сухую цитратную кроличью плазму, отличающийся тем, что, с целью улучшения качества препарата за счет повышения его чувствительности, упрощения и:ускорения процесса определения, а также увеличения срока годности, он дополнительно ".одержит полиэтиленгликоль с мол.м. 4000, бычий сывороточный альбумин, сахарозу и глицерин при следующем соотношении компонентов, мас. :
Сухая. цитратная кроличья плазма :36,54-39,62
Полиэтиленгликоль с мол. м. 4000 I 35,85-40,38
Бычий сывороточный ельбумин 3.84-5,66
Сахароза 3,77-5,77
Глицерин Остальное
164897Т
Ф Ю Ф
Я ® с щ с
:,Я о o
3O
S ® CL сото а о
Ф В Ф с с
Ф Ф о Фф.
Щ
Ф о о
Ф
cII С
Ь ф S . III ф я, с S
gSC2
3 cc @ c 0 Z,I
Z CII O CL S 1 м и о. Я f т *
Ф щ Э
vs с во ол
СС
CO а
Ф
S g) )K
a О, Д
1а о
Б о
С:
С9 сО
ООО
cI С Ъ - 0«cO
С > CI IO. IO CO
S о.
Ф
S с
L о
Я в
cII «г
МЪ » IO ce ЯЪ (у)
cCl - I» «CO
О О ООО О сО
0I t л
<О ССЪ
c0I О В
I» СО СО
° Ф С"Ъ СЧ
Щ о а
IO С,Ъ IO СЧ CO
С"Ъ - N а»
О О ООО О
° Ф
° Ф ceca W
Сп СО Л СО IO В
СЧ СЪ т иЪ а Л
IO N IO c«l IO
О ООО - О
0Ъ о
IO Ф
СЧ СО 0)МЪ Ф Се
С» ОСОа Г
СЧ О . C6IOri 3 сй С Ъ С9 С Ъ С Ъ
СЪ
СЧ
СЧ О СЪЪ СО
СЧ СЧ Сч -= :
МЪ O О> СЧ СЧ СЪЪ
О) и ОФ»- IO
«О СО Э СЧ
С Ъ С Ъ С"Ъ С"Ъ M 3
СО 0I O - СЧ Е Э
СЧСЧ N N х о о
S с
Ф
1" о
C х о а> о,, Ф с
iS х 3
< о
У
IJl с о
hC
S с
Ф с
I6)
K с о
=Т
Ф о
S о
Z о
S а, о „з
I- Z B
Фоо сса
cII cLI O
О -ЪС и э о
Ф с д о Ф с(ь:л
Э а
1648977
Таблица 2
Критерии экономичности
Сухая цитратная кроличья плазма
Плаэмокарандаш
2 — 3
25-30
Пробирки, пипетки
Растворение сухой плазмы, ее разведение и разливка в пробирки
До 25 — 30
Предметные стекла
Нанесение штрихов на стекло
Время постановки опыта, мин
Срок годности используемого и епа ата, лет
До 3 — 5
* После открытия ампулы 3 — 4 дня
Табл ица 3
В емя пол чения ез льтата, мин
Исследуемая культура .
Плазмокарандаш
Сухая цитратная кроличья плазма и ототип
Составитель. Н. Чаплина
Редактор Л, Веселовская Техред M,Moðãåíòàë Корректор М. Максимишинец
Заказ 1499 Тираж 374 Подписное
ВНИИПИ Государственного комитета.по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР
113035, Москва, Ж-35„Раушская наб., 4/5
Производственно-издательский комбинат "Патент", г; Ужгород, yn,Ãaãàðèíà, 101
Количество исследований при использовании содержимого 1 амп. сухой цитратной плазмы
Используемая посуда
Подготовительная работа
Золотистый стафилакокк 209
243
"Кован-1"
"Королев"
"Иванов"
12600
" Смит"
Э пидермальный стафилококк
Сапрофитовый стафилококк
Микрококк лизодейктикус
Кишечная палочка 0-55
168
252.
282
288
246
348
62
48
66
74
74
82