Способ приготовления препарата розеткообразующих клеток

Способ приготовления препарата розеткообразующих клеток

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

Изобретение относится к медицине, в частности к лабораторным методам приготовления препаратов иммунокомпетентных клеток. Целью изобретения является повышение качества препарата. Цель достигается за счет применения смеси, состоящей из глицерина, этилового спирта, поливинилацетата и воды в соотношении 4:16:1:4 соответственно . Для этого готовят раствор глицерина и 96%-ного спирта в соотношении 1:2. Затем отдельно готовят второй раствор , содержащий 1 ч. поливинилацетатной эмульсии, 4 ч. дистиллированной воды и 5 ч. 96%-ного спирта. К4ч. первого раствора добавляют 1 ч второго раствора и хорошо перемешивают. Приготовленную смесь в виде тонкого слоя наносят на чистое предметное стекло, после чего делают мазок. Повышается качество препарата, так как мазок распределяется по поверхности стекла очень равномерно.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (si)s G 01 N 33/53

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР. »

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4625966/14 (22) 22.11.88 (46) 15,05.91. Бюл, № 18 (71) Курский государственный медицинский институт (72) Ю,С.Яхонтов (53) 615.375 (088,8) (56) Тущин И,С. и др, Иммунология, 1981, ¹5, 85 — 87, (54) СПОСОБ ПРИГОТОВЛЕНИЯ ПРЕПАРАТА РОЗЕТКООБРАЗУЮЩИХ КЛЕТОК (57) Изобретение относится к медицине, в частности к лабораторным методам приготовления препаратов иммунокомпетентных клеток. Целью изобретения является повыИзобретение относится к медицине, в частности к лабораторным методам приготовления препаратов иммунокомпетентных клеток.

Цель изобретения — повышение качества препарата путем равномерного распределения клеток на стекле.

Способ осуществляется следующим образом.

Предварительно готовят два раствора.

Раствор ¹ 1. Динамитный глицерин смешивают с 98%-ным этиловым спиртом в соотношении 1:2, Раствор № 2, Последовательно к 1 ч. поливинилацетатной эмульсии добавляют 4 ч. дистиллированной воды, затем 5 ч. 96%ного этилового спирта.

К 4 ч. раствора № 1 прибавляют 1 ч. раствора № 2 и хорошо перемешивают пу, Ж 1649441 А1 шение качества препарата. Цель достигается за счет применения смеси, состоящей из глицерина, этилового спирта, поливинилацетата и воды в соотношении 4:16:1:4 соответственно. Для этого готовят раствор глицерина и 96%-ного спирта в соотношении 1:2. Затем отдельно готовят второй раствор. содержащий 1 ч, поливинилацетатной эмульсии, 4 ч. дистиллированной воды и 5 ч.

96%-ного спирта, К4ч, первого раствора добавляют 1ч.второго раствора и хорошо перемешивают.

Приготовленную смесь в виде тонкого слоя наносят на чистое предметное стекло, после чего делают мазок. Повышается качество препарата, так как мазок распределяется по поверхности стекла очень равномерно, тем взбалтывания, Приготовленную смесь в виде тонкого слоя наносят на чистое предметное стекло, после чего делают мазок.

Пример. К 0,1 мл взвеси лимфоцитов добавляют 0,1.мл 0,5$ взвеси эритроцитов и полученную взвесь осаждают центрифугированием в течение 5 мин при 200g. Осадок фиксируют 0,05 мл 0,5% глютаральдегида при комнатной температуре в течение 20 мин. Действие глютаральдегида прекращают добавлением 1 мл дистиллированной воды и осаждают взвесь центрифугированием при 200g в течение 5 мин. Супернатант удаляют пастеровской пипеткой, а осадок осторожно ресуспендируют в 2 — 3 каплях оставшегося в пробирке супернатанта. Полученную взвесь используют для приготовления препарата розеткообразующих клеток: на сухое чистое протертое предметное стек1649441

Составитель Ю, Васильева

Редактор С, Лисина Техред М.Моргентал Корректор Т. Малец

Заказ 1519 Тираж 416 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб„4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул.Гагарина, 101 ло стеклянной палочкой наносят каплю приготовленной смеси в виде пятна размером

5 — 8 мм и растирают ее равномерно по поверхности ватным или марлевым тампоном до исчезновения следов жидкости. После этой операции стекло должно быть чистым и сухим. На подготовленную поверхность выливают полученную ранее клеточную смесь, легким покачиванием равномерно распределяют ее по всей необходимой поверхности стекла и дают просохнуть, Фиксацию и окраску производят по общепринятым методикам, например по

Романовскому.

Предлагаемый способ обеспечивает высокое качество препарата, так как мазок распределяется на поверхности стекла очень равномерно даже при исключении тщательного процесса обезжиривания стекол, например с помощью спиртозфирной смеси Никифорова или с помощью двухромовокислого калия и серной кислоты, исключается большой расход проточной воды.

В момент фиксирования препарата в мета5 ноле клеточные элементы прочно удерживаются на поверхности стекла и хорошо прокрашиваются.

Формула изобретения

10 Способ приготовления препарата розеткообразующих клеток, включающий нанесение суспензии клеток на стекло с последующей их фиксацией, о т л и ч а ющ и и с sl тTеeмM, что, с целью повышения

15 качества препарата за счет равномерного распределения клеток, перед нанесением суспенэии клеток стекло обрабатывают смесью, состоящей из глицерина, этилового спирта, поливинилацетата и воды в соотно20 шении 4:16;1;4.