Способ консервирования вируса инфекционного ринотрахеита
Иллюстрации
Показать всеРеферат
Изобретение относится к биотехнологии , а именно к культивированию и долгосрочной стабилизации биологических свойств вирусов, и может быть использовано в биологической промышленности, медицине и ветеринарии. Целью изобретения является повышение сохранности вируса. Для этого замораживание осуществляют со скоростью 0,2 0,8°С/мин, после чего погружают в жидкий азот и замораживают до -196°С.
СОЮЗ СОВЕТСКИХ
СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ
РЕСПУБЛИК (51)-5 С 12 N 7/00
ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ
ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ
ПРИ ГКНТ СССР
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4675353/13 (22) 06.04.89 (46) 15.06.91. БюлЛФ22 (71) Институт проблем криобиологии и криомедицины АН УССР (72) А.А.Цуцаева, М.Ю.Стегний и Т.Ф.Петренко (53) 66.099.4 (088.8) (56) Лярски 3. Хранение вируса в замороженном состоянии. Диагностика вирусных болезней животных, М.: Колос, 1980, 139—
141.
Никитин Е.Е., Звягин И.В. Замораживание вирусосодержащих препаратов. — В кн.:
Изобретение относится к биотехнологии, а именно к культивированию и долгосрочной стабилизации биологических свойств вирусов, и может быть использовано в биологической промышленности, медицине и ветеринарии.
Целью изобретения является повышение сохранности вируса.
Для этого в способе консервирования вируса, включающем замораживание до
70 С с последующим хранением, замораживание осуществляют со скоростью 0;2—
0,8 С/мин, после чего погружают в жидкий азот и эамораживают до - 196 С.
Замораживание осуществляют в два этапа: сначала со скоростью 0,2—
0,8 C /ì и н до -70 С, а затем путем погружения в жидкий азот до -196 С и хранят при этой температуре.
Пример 1. Монослойную перевиваемую клеточную культуру почки теленка (ПТ) инфицируют вирусом инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота, штамм
"Молдавский" по общепринятой методике.
В качествероддерживающей среды испольЯЛ 1655984 А1
Замораживание и высушивание биологических препаратов, M,: Колос, 1971. c,65 — 69. (54) СПОСОБ КОНСЕРВИРОВАНИЯ ВИРУСА ИНФЕКЦИОННОГО РИНОТРАХЕИТА. (57) Изобретение относится к биотехнологии, а именно к культивированию и долгосрочной стабилизации биологических свойств вирусов, и может быть использовано в биологической промышленности, медицине и ветеринарии. Целью изобретения является повышение сохранности вируса.
Для этого замораживание осуществляют со скоростью 0,2 -- 0,8 С/мин, после чего погружают в жидкий азот и замораживают до
-1960C. зуют среду 199. После полной дегенерации монослоя клеток полученную вирусосодержащую суспензию очищают от клеточного детрига центрифугированием при
16000 об/мин. После этого вирусную суспензию расфасовывают в контейнеры из нержа веющей стали и с помощью поограммного замораживателя охлаждают от+6 до -70 С со скоростью 0,2 С/мин, после чего погружают в жидкий азот и замораживают до -196 С и хранят в течение 1,5 лет.
Размораживают на водяной бане при +40 С
Контролем служит вирус, не подвергнутый замораживанию. О сохранности размороженного вируса судят по его инфекционному титру, который определяют по цитопатическому действию (ЦПД) на перевиваемую клеточную культуру ПТ. Вычисление титра проводят методом РИДА и
МЕН4А. Инфекционный титр размороженного вируса соответствует контролю и равен
Ig 5,32 0,22 ЦПД 50/мл, Пример 2. Вирус инфекционного
9инотрахеита консервируют способом, описанным в примере 1, охлаждение от +6 до
1655984
Составитель И. Агафонова
Редактор Т. Лазоренко Техред М.Моргентал Корректор Т. Палий
Заказ 2030 Тираж 366 Подписное
8НИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР
113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5
Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, уп.Гагарина, 101
-70 С осуществляют со скоростью
0,8 С/мин.
Инфекционный титр размороженного вируса равен Ig 5,32 +é 0,22 ЦТД 50/мл и соответствует контролю.
Формула изобретения
Способ консервирования вируса инфекционного ринотрахеита, включающий замораживание его до -70 С с последующим хранением, отличающийся тем, что, с целью повышения сохранности вируса, замораживание до -70 С осуществляют со ско5 ростью 0,2 — 0,8 С/мин, далее замораживают до -196 С и хранят при этой же температуре.