Штамм 47/s вируса гриппа а(нз n2) для получения живой гриппозной интраназальной вакцины для детей

Штамм 47/s вируса гриппа а(нз n2) для получения живой гриппозной интраназальной вакцины для детей

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

Изобретение относится к медицинской вирусологии и может быть использовано для профилактики эпидемического вируса. Цель изобретения - получение вакцинного штамма актуальной разнородности на основе эпидемического вируса А/Сичуань/2/87 (НЗ №2). Вакцинный штамм 47/S (НЗ №2) - рекомбинант, полученный скрещиванием эпидемического вируса А/Сичуань/2/87 (НЗ №2) с холодоадаптированным температурочувствительным вирусом А/Ленинград/134/47/57 (Н2 ) - донором аттенуации, безвредным для взрослых и детей , свойства которого дают возможность гарантированно получать рекомбинантные вакцинные штаммы из вновь появляющихся эпидемических вирусов. Штамм 47/S активно репродуцируется в развивающихся куриных эмбрионах при оптимальной температуре (32 - 34°С), разность в показателях инфекционной активности при 32 и 40оС 7,75 Ig ЭЙД 50/0,2 мл. Рекомбинант унаследовал от эпидемического вируса 2 гена , кодирующих поверхностные белки (гемагглютинин и нейраминидазу), и 6 генов, кодирующих негликозилированные белки от донора аттенуации. По данным рекомбинационного анализа в геноме штамма 47/S имеется 5 ts-мутаций, характерных для донора аттенуации вируса А/Ленинград/134/47/57, наличие которых коррелирует с аттенуацией вируса для человека . Штамм 47/S ареактогенен для детей 3 - 15 лет при интраназальном введении и вызывает сероконверсии у 70,5% привитых с исходным титром 1:8. О ел ел ю оо ел

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (sl)s С 12 N 7/00

ГОСУДАРСТВЕ ННЫ и КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4694983/13 (22) 19.04.89 (46) 15,06.91. Бюл.N.22:: (71) Научно-исследовательский институт экспериментальной медицины АМН СССР, Московский научно-исследовательский институт вирусных препаратов АН СССР, Всесоюзный научно-исследовательский институт гриппа и Государственный научноисследовательский институт стандартизации и контроля медицинских биологических препаратов им.Л.А.Тарасевича (72) M.È.Ãóùèíà, Г,И.Александрова, T.Å.Ìåäâåäåâà. А.И, Климов, К, В;Лисовская, Л.Г.Руденко, А.М.Грунис, E.Ï.Ãðèãîðüåâà, Л.А.Меркур ье ва, Е.M. До ро ш ен ко, И.В. Сладкова, Е. Е-.Бардина, Г.А.Ломанова и Л.В.Чудина (53) 576.8.094.29 (088.8) (56) Авторское свидетел ьство СССР пв 1223914, кл. С 12 N 7/00, 1985. (54) ШТАММ 47/S ВИРУСА ГРИППА А (НЗ

hh2) ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ ЖИВОЙ ГРИППОЗНОЙ ИНТРАНАЗАЛЬНОЙ ВАКЦИНЫ ДЛЯ

ДЕТЕЙ (57) Изобретение относится к медицинской вирусологии и может быть использовано для профилактики эпидемического вируса.

Цель изобретения — получение вакцинного штамма актуальной разнородности на основе эпидемического вируса А/Сичуань/2/87

Изобретение относится к медицинской вирусологии и может быть использовано для профилактики эпидемического вируса, Целью изобретения является получение вакцинного штамма актуальной разновид„„5U„„1655985 А1 (НЗ М2). Вакцинный штамм 47/S (НЗ М2)— рекомбинант, полученный скрещиванием эпидемического ви руса А/Сичуань/2/87 (НЗ М2) с холодоадаптированным температурочувствител ьн ым вирусом А/Ленин град/1 34/47/57 (Н 2 N. 2) — до но ром аттенуации, безвредным для взрослых и детей, свойства которого дают возможность гарантированно получать рекомбинантные вакцинные штаммы из вновь появляющихся эпидемических вирусов. Штамм 47/S активно репродуцируется в развивающихся куриных эмбрионах при оптимальной температуре (32 — 34 С), разность в показателях инфекционной активности при 32 и

40оС 7,75 Ig ЭИД 50/0,2 мл, Рекомбинант унаследовал от эпидемического вируса 2 гена, кодирующих поверхностные белки (гемагглютинин и нейраминидазу), и 6 генов, кодирующих негликоэилированные белки от донора аттенуации. По данным рекомбинационного анализа в геноме штамма 47/S имеется 5 ts-мутаций, характерных для донора аттенуации вируса А/Ленинград/134/47/57, наличие которых коррелирует с аттенуацией вируса для человека, Штамм 47/S ареактогенен для детей 3 — 15 лет при интраназальном введении и вызывает сероконверсии у 70,570 привитых с исходным титром 1:8. ности на основе эпидемического вируса

А/Сичуань/2/87 (НЗ N.2).

Вакцинный штамм 47/$ получен методом рекомбинации эпидемического вируса

А/Сичуань/2/87 (НЗ 1Ф2) с холодоадаптированным температурочувстительным штам1655985

Составитель И, Тареева

Редактор Т. Лазоренко Техред M,Моргентал Корректор г. Шевкун

Заказ 2030 Тираж 380 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г, Ужгород, ул.Гагарина„101 мом А/Ленинград/134/47/57 Н2 hb2) — донором аттенуации {разность титров при 32 и 40 С вЂ” 7,75 Ig ЭИД 50/0,2 мл с последующей селекцией в присутствии антисыворотки А/Ленинград/134/47/57 (Н2 N.2).

Штамм депонирован в Государстенной коллекции вирусов под М 2185.

Штамм 47/$ (НЗ М2) унаследовал от донора аттенуации гены 1, 2, 5, 7, 8, кодирующие белки РВ2, РВ1, NP, М, NS соответственно и2 гена, кодирующие поверхностные антигены (гемагглютинин и нейраминидазу) от эпидемического вируса.

Температурочувствительный холодоадаптированный рекомбинант 47/$ унаследовал 5 ts-мутаций в генах 1, 2, 5, 7, 8 от донора аттенуации, которые обеспечивают высокую степень ареактогенности и генетической стабильности (разность титров репродукции штамма 47/$ п ри 32 и 400С -7,75

Ig ЭИД 50/0,2 мл).

Таким образом, представленный вакцинный штамм 47/$ характеризуется сочетанием полезных признаков родительских вирусов, необходимых вакцинному штамму — антигенной специфичностью поверхностных белков актуального эпидемического вируса А / Сичуа н ь /2/87 (H3 N.2) и температурочувствительностью и холодоадаптированностью, коррелирующей с аттенуацией для человека.

Морфология штамма 47/S (НЗ N.2)— полиморфная, типичная для вируса гриппа, Характеристика штамма 47/$ (НЗ ЬЬ2).

Состав генома: гены 4 и 6 от эпидемического вируса, гены 1,2,3, 5, 7,8 от донора аттенуации. Инфекционная активность при репродукции в развивающихся куриных эмбрионах 8,0 — 8,5 Ig ЭИД 50/0,2 мл в течение 48 ч при 32 — 34 С. Гемагглютинирующая активность 1:256. КСТ4о — признак

7,75 Ig ЭИД 50/0,2 мл, Проявляет стабильность биологических признаков после 5кратного пассирования в развивающихся куриных эмбрионах. Обладает ареактогенностью и выраженной иммуногенной активностью при интраназальном введении детям 3 — 15 лет.

Пример 1. Группе иэ 20 серонегативных детей 3 — 15 лет водят интраназально е объеме 0,5 мл вакцинный штамм 47/Я (НЗ

М2) с инфекционным титром 7,5 Ig ЭИД

5 50/0,2 мл. Среди привитых не регистрируется ни одной температурной реакции выше

37,5 С (показатель реактогенности О), При обследовании 5 сывороток от детей с исходным титром 1:8, вакцинированных двукрат10 но, 4 имеют 4-кратный и более прирост антител (80 (,). В группе из 6 человек с исходным титром антител 1:16 также обнаруживают 4-кратное увеличение антител у 5 детей (83,3 )().

15 Пример 2. Группе из 100 серонегативных детей 3 — 15 лет (титр 1:8) интраназально вводят вакцинный штамм 47/$ (НЗ М2), После первой вакцинации у всех привитых детей, ответивших температурной реакцией. в

20 поствакцинальном периоде. лихорадка не превышает субфебрильных цифр (до 37,3 С), . появляется преимущественно на 2- или 3-й день после введения препарата и сохраняется, как правило, не более суток и лишь в

25 единичных случаях до 2 сут. Среди детей контрольной группы (получивших плацебо) также имеет место одна субфебрильная температурная реакция у одного ребенка. На повторное введение вакцины с интервалом

30 в 3 недели ни в одном случае не зарегистрировано развития сильных и средних температурных реакций как на группу в целом, так и на группу серонегативных детей, Таким образом, клиническое наблюдение за деть35 ми, получившими препарат, показывает ареактогенность вакцины, По данным РТГА достоверные сероконверсиии регистрируют в сыворотках серонегативных детей (Π— 1:8) в 100,0; 64,9 и 70.57;

40 к антигенам А/Ленинград/289; А/47/S и

А/СССР/2/85 соответственно. После двухкратной вакцинации защищенными оказываются 51,4 детей на группу с исходным титром 1:8.

45 Формула изобретения

Штамм 47/$ вируса гриппа А (НЗ М2)

ГКВ N. 2185 для получения живой интраназальной гриппозной вакцины для детей,