Способ выделения нуклеиновых кислот и полисахаридов

Способ выделения нуклеиновых кислот и полисахаридов

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

ОПИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

I6574O

Союз Советских

Социалистических

Республик

Зависимое от авт. свидетельства №

Заявлено 18 1.1964 (№ 877180/23-4) с присоединением заявки ¹

Приоритет

Опубликовано 26.Х.1964. Бюллетень № 20

Дата опубликования описания 15.1.1965

Кл. 12р, 16

Росуда рственный комитет по делам изобретений и открытий СССР

МПК С 07с

УДК

ЫИ: . В311АЯ

Авторы изобретения А. А. Баев, А. Д. Мирзабеков, А. И. Крутилина и В. И. Горшков

10,„ .,11", йИБЛИОТЕКс, Заявитель

СПОСОБ ВЫДЕЛЕНИЯ НУКЛЕИНОВЫХ КИСЛОТ

И ПОЛИСАХАРИДОВ

Подписная группа JH 45

Известны способы выделения нуклеиновых кислот и полисахаридов из растворов осаждением их органическими растворителями, кислотами, переводом в не растворимые в воде соли. Эти способы недостаточно количественны в случае использования сильно разбавлен. ных растворов и трудоемки.

Предлагается способ выделения нуклеиновых кислот и полисахаридов из растворов с малой концентрацией, содержащих большое количество примесей, жидкостной флотацией не растворимых в воде производных.

Способ заключается в том, что к раствору рибонуклеиновой или гиалуроновой кислоты добавляют раствор цетавлона и диэтилового эфира. Цетавлоновая соль т-РНК или гиалуроновой кислоты количественно переводится в интерфазу, образованную двумя несмешивающим ися хкидкостями посредством флотации.

Получающийся при этом слой осадка отделяют удалением верхней и нижней фаз в делительной воронке. Предлагаемый способ позволяет легко извлекать указанные полианионы из черезвычайно разбавленных растворов (до 0,0001>/0) .

Выход продуктов по данному способу может достигать 98 — 100 О4.

Пример. К 50 мл раствора хлористого натрия или фосфатного буфера рН 6,0 исследуемой молярности, помещенного в делительную воронку на 100 мл, добавляют 0,5 мг или более т-РНК или высокополимерной РНК, растворенной в 0,5 мл воды, и 5 мл раствора цетавлопа в концентрации 10 мг,/1 мл и 20 мл диэтилового эфира. Смесь встряхивают и вы5 держивают при 34 С 15 мин, затем вновь гстряхивают и охлаждают до комнатной температуры до полного просветления нижней фазы. Последнюю удаляют, а цетавлоновую соль РНК в интерфазе сливают из делитель1о ной воронки в центрифужную пробирку. После центрифугирования в течение 3 мин при

3000 об)мин верхнюю и нижнюю фазу сливают, а осадок суспендируют в 0,5 л л 2М хлористого натрия и натриевую соль РНК осаж15 дают при 20 С добавлением 1,5 мл 96%-ного этанола. Переосаждение из 0,5 мл 2М хлористого натрия повторяют еще раз. После центрифугирования осадок растворяют в 3 л л дистиллированной воды и определяют содержа2О ние вещества в спектрофотометрических единицах при 260 л мн. При концентрации полианиона выше 0,10 О все операции проводят непосредственно в центрифужной пробирке.

Предмет изобретения

Способ выделения нуклеиновых кислот и полисахаридов из солевых и бессолевых водных разбавленных растворов при помощи цетавлона, отличающийся тем, что в образовавшуюся

Зо соль полианиона добавляют диэтиловый эфир и встряхиванием переводят в интерфазу. *