Способ получения оптически активных фторсодержащих аминокислот

Способ получения оптически активных фторсодержащих аминокислот

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

Изобретение относится к аминокислотам , в частности к получению.оптически активных фторсодержащих аминокислот общей формулы R-CH2-CH(NH2)-C(0)OH, где R-F; 2-.3- или 4-FCeH4, 4-ОН-З-РСбНз; 4- СРзСеН4 или 4-СНР2-5-СбН5, используемых в пептидном и тонком органическом синтезе . Цель - упрощение процесса и повышение его экономичности. Синтез ведут гидролизом соответствующих М-ацетильных производных с помощью фермента - аминоацилазы (из Asp. oryzae) в присутствии хлорида кобальта (2+) при 40-50°С. Эти условия упрощают проведение процесса за счет сокращения его длительности со 120 до 10-27 ч и исключения экстракции этилацетатом, а также позволяют использовать более доступный частично очищенный ферментный препарат и более доступные М-ацетильные производные. 2 табл. Ј

СОЮЗ .СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4654462/04 (22) 20.02.89 (46) 30,06.91. Бюл. ¹ 24 (71) Армянский филиал Всесоюзного научно-исследовательского института химических реактивов и особо чистых химических веществ и Институт биоорганической химии

АН УССР (72) М.M. Амирханян, О.M. Амирханян, И.И.

Герус, M.Т. Колычева, Ю.Л. Ягупольский и

В,П. Кухарь (53) 547.233.07(088.8) (56) Патент США ¹ 4265808, кл. С 07 С 103/52, опублик. 1981. (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ОПТИЧЕСКИ АКТИВНЫХ ФТОРСОДЕРЖАЩИХ АМИНОКИСЛОТ (57) Изобретение относится к аминокислотам, в частности к получению оптически акИзобретение относится к усовершенствованному способу получения оптически активных фторсодержащих аминокислот

В СН (,Н 00Ц

МН где R — атом фтора, 2-, 3- или 4-фторфенил, 4-гидрокси-З-фторфенил, 4-(трифторметокси)фенил или 4-(дифторметил)-тиофенил, используемых в фармацевтической промышленности и тонком органическом синтезе.

Целью изобретения является упрощениЕ процесса и повышение его экономичности, Пример 1. L-4-Фторфенилаланин.

В химический стакан емкостью 300 мл. снабженный магнитной мешалкой помеща„, Я „„1659402 А1

R — F; 2-,3- или 4-FCgH4, 4-ОН-3-РСвНз; 4СЕЗС6Н4 или 4-CHFz-S-СвНБ, используемых в пептидном и тонком органическом синтезе. Цель — упрощение процесса и повышение его экономичности, Синтез ведут гидролизом соответствующих N-ацетильных производных с помощью фермента— аминоацилазы (из Asp. oryzae) в присутствии хлорида кобальта (2+) при 40-50 С. Эти условия упрощают проведение процесса за счет сокращения его длительности со 120 до

10-27 ч и исключения экстракции этилацетатом, а также позволяют использовать более доступный частично очищенный ферментный препарат и более доступные N-ацетильные производные. 2 табл. ют 11,26 г (0,05 моль) D,L,N-ацетил-4-фторфенилаланина. 150 мл дистиллированной воды, 8,0 мг CoClz 6Н20, пускают в ход магнитную мешалку, поднимают температуру смеси до 40 С и добавляют 5 н. раствор гидроокиси натрия до полного растворения содержимого стакана. рН раствора доводят до 7,4 с помощью 2 н. водного раствора гидроокиси натрия. Затем добавляют 0,1 ферментного препарата аминоацилазы из

Asp. oryzae с активностью 400 Е/r растворенного в 80 мл дистиллированной воды и осуществляют при 42 С в течение 24 ч. В течение всего времени инкубации рН смеси

7,4 поддерживают с помощью 2 н. NaOH.

Далее гидролизат подкисляют уксусной кислотой до рН 5 0 и обрабатывают 0,15 г активиро ва н ного угля. Угол ь отделяют фильтрованием, фильтрат концентрируют в

1659402

Получают 5,25 г технического целевого продукта, содержащего 15% влаги, его расваккуме и 1=4-фторфенилаланин осаждают творяют в минимальном объеме 80 этаноэтанолом, ла и охлаждают до 0 С. Выпавшие кристалВыпавшие кристаллы целевого продук- лы целевого продукта отделяют та отделяют фильтрованием, промывают на фильтрованием. фильтре минимальнь1м количеством этано- 5 Получают 3,66 г целевого продукта (выход ла и сушат при 55 С в течение 5 — 6 ч. 80 ). Содержание основного вещества 99,3 .

Получают 3,13 г целевого продукта (вы- Продуктхроматографическигомогенен.Удельход 68 4%), Содержание основного вещест- ное вращение (а ) 5, град = -16 (C = 2; HzO). ва составляет 99,1о удельное вращение Найдено, : С 58.90; Н 5,41; N 7.78; F 10,44. (аЯ, град. = -23 (С = 1, Н О), Продукт хро10

СэН 1оГЙОг матографически гомогенен, Рассчитано, : С59,01;Н5, 50 N7 65 F 10,37.

Найдено, %; С 58,94; Н 5.61, N 7 82; F Пример ы 4-14. Процесс проводят в

10,25, условиях и римера 1.

Зависимость скорости гидролиза НМРассчитано, %: С 59,10; Н 5,50; N 7,65; ацетил-4-фторфенилаланина от температуIF 10,37. ры (при рН 7,0) представлена в табл. 1.

Маточный раствор, содержащий N-аце- Несмотря на то, что наибольшая скоротил-4-фторфенилаланин, упаривают в ваку- сть гидролиза достигается при 60ОС, проуме и используют для зуютдляполученияD-изомера. цесс не следует вести при температуре

Пример 2. L-3-фторфенилаланин. 0 выше 50 С, так как фермент быстро инактиil ед т аналогично примеру 1, вируется, Наиболее оптимальной, темпера40 — ooc однако в качестве субстрата используют турой процесса является интервал 0 — 5

0,L,N-ацетил-3-фторфенилаланин, энантио- когда фермент работает значительно дольселективный гидролиз осуществляют при ше, Ниже 40 С гидролиз замедляется, что рН 7,2 и температуре 45 С в течение 27 ч, приводит к снижению интенсивности про11,26 г (0,05 моль) D,L,N-ацетил-З-фтор- цесса. фенилаланина, растворенного в 230 мл дис- Пример ы 15-18. L-2-Фтораланин, тиллированной воды, содержащей 8,0 мг L-3-фтортирозин, L-0-(трифторметил)тироCoClz 6HzO и 0,1 г ферментативного препа- зин и 1=5-(дифторметил)тиотирозин. рата аминоацилазы, подвергают гидролизу Процесс ведут в условиях, аналогичных при 45 С и рН 7,2 в течение 27 ч. примеру 1.

Получают 3,32 г целевого продукта (вы- Параметры процесса и его результаты ход 72,5 ). Содержание основного вещест- приведены в табл, 2, ва 99,0%. Продукт хроматографически Технико-экономическая эффективность

Ю r а 35 предлагаемого изобретения заключается в гомогенен..удельное вращение (а) рад, кращении длительности процесса (с 10 ч до

10 — 27 ч) и исключении стадии экстракции

10,64. этилацетатом, а также в повышении эконо40 M< >po 3> чет использования более доступного частично очищенного ассчитано о С 59,01; Н 5,50; N 7,65; и м е 3 ферментного препарата и более доступных

3. 1=2-Фторфенилаланин.

К-ацетильных производных.

Процесс ведут аналогично примеру 1, обретение

Формула изо ретение

Способ получения о тическ активных о фторсодержащих аминокислот общей форществляют при рН 7,0 и температуре 40 С в течение 25 ч. Полученный орто-фтор-1 -фе- К-СЧ - СК СООН мулы г м РН вЂ” Рй нилаланин перекристаллизуют из 80 эта- l нола.

50 И2 где  — атом фтора 2- 3- или 4-фторфенил фенилаланина растворяют в 180 мл дистил- 4 лированной воды, добавляют 8,0 мг СоС! фе ментативным гидролизом соответствуацилазы, растворенной в 50 мл воды, и осуществляют энантиоселективный гидролиз при рН 7,0 и температуре в т ч ат е 40 С в течение 25 тем, что, с целью упрощения процесса и ч. повышения его экономичности, в качестве и-ацильных производных используют N1659402

Таблица1 ст

Количест субстрат коль

Количес

Со, кол рН реа ной ср

Текларетура гидр оли за, С

Субстрат

Враки гнд- Йелезой релиза> ч аа, 2 кнноаци зы ° иг

D, L-N-Ацетнл-2-фтораланин

1>5 10 7,0

2,0

1>5 ° 1б 3,5

D, 1;М-Аце тип-3-фтортирозин

7>5

D,L-N-Ацетил-0-(трифторкетил)-тироэин

1-4-(Трифторке- 72 тин)- тярознн

1,5 ° 10

7,0

8,0

L-8-(Вифтoркe- 7 1 тял) -тнотирозня

D>L-N-Ацетнл-S-(лифторкетил)тиотирозин

1> 5 ° 10

0,0002

3,0

7,7

15 ацетилзамещенные соответствующие аминокислоты, и качестве ферментного препарата используют аминоацилазу, 0 0005

О, 001

О, 001 выделенную из Asp, oryzae, и процесс проводят при 40-50 С в присутствии хлорида кобальта (И).

Таблица 2 т лр одуят Вкн

1-2-Фтор зла нан 68

L-3-Фтортирозин 70