Способ получения вестибулопротектора из животного сырья

Способ получения вестибулопротектора из животного сырья

Реферат

 

Изобретение относится к области медицины и биотехнологии. Целью является повышение специфической активности и выхода целевого продукта, а также упрощение способа. Для этого селезенку осетровых рыб гомогенизируют в 0,9 - 1,1 М водном растворе уксусной кислоты при соотношении сырья и раствора 5:3 - 5: 5, затем проводят экстракцию в том же растворе. Полученную смесь центрифугируют 15 мин при 3500 об/мин при 0^oС, осадок удаляют. К надосадочной жидкости добавляют 0,10 - 0,15М водный аммиак до рН 7,0, выдерживают 10 ч при 8^oС, после чего раствор фильтруют и лиофильно высушивают. Из 1 кг селезенки осетра получают 32,5 - 34,5 г препарата.

Изобретение относится к биотехнологии и медицине, а именно к способам выделения биологически активных веществ из природных источников, в частности к способам выделения веществ, обладающих вестибулопротекторной (противоукачивающей) активностью. Цель изобретения повышение выхода и специфической активности целевого продукта и упрощение процесса. П р и м е р 1. В качестве сырья используют селезенку осетровых рыб. Селезенку извлекают из пойманной рыбы, немедленно замораживают и хранят при температуре от -40 до -30^oС. Все операции по измельчению сырья и экстракции проводят при температуре сырья, растворов и оборудования, контактирующего с сырьем, 3-8^oС; растворы, добавляемые к реакционной массе, должны быть предварительно охлаждены до этой же температуры, чтобы не вызвать местных перегревов, ведущих к денатурации активных компонентов целевого продукта. Замороженное сырье (500 г) дважды пропускают через мясорубку. Измельченную массу смешивают с 0,9 М водной уксусной кислотой (300 мл) соотношение сырье раствор 5:3, гомогенизируют в течение 5 мин при 8000 об/мин. Смесь выдерживают 1 ч при 8^oC при интенсивном перемешивании. Полученную смесь центрифугируют 15 мин при 3500 об/мин при 0^oС, осадок удаляют, а к надосадочной жидкости добавляют 0,10 М водный раствор аммиака до рН 7,0. Полученную смесь выдерживают 10 ч при перемешивании при 8^o С, а затем фильтруют через бумажный фильтр при той же температуре. Полученный раствор лиофильно высушивают и получают 16,25 г активного вещества (32,5 г в пересчете на 1 кг сырья). П р и м е р 2. Замороженное сырье (330 г) дважды пропускают через мясорубку. Измельченную массу смешивают с равным количеством 1,1 М водного раствора уксусной кислоты (330 мл) (соотношение сырье раствор 5:5), гомогенизируют в течение 5 мин при 8000 об/мин в течение 15 мин при 0^o С. Осадок удаляют, а к надосадочной жидкости добавляют 0,15 М водный раствор аммиака до рН 7,0. Полученный раствор выдерживают 10 ч при перемешивании при 8^oС, а затем фильтруют через бумажный фильтр при той же температуре. После этого раствор лиофилизуют. Получают 11,2 г активного препарата (33,6 г в пересчете на 1 кг сырья). П р и м е р 3. Замороженное сырье (330 г) дважды пропускают через мясорубку. Измельченную массу смешивают с 1,0 М водной уксусной кислотой (соотношение сырье раствор кислоты 5:4) (220 мл), гомогенизируют в течение 5 мин при 8000 об/мин при 0^oС в течение 15 мин. Осадок удаляют, надосадочную жидкость смешивают с 0,13 М водным раствором аммиака до достижения рН 7,0. Полученный раствор выдерживают 10 ч при перемешивании при 8^oС, а затем фильтруют через бумажный фильтр. После этого раствор лиофилизируют. Получают 11,5 г активного препарата (34,5 г в пересчете на 1 кг сырья). При внутрибрюшинном введении подопытным животным (кошки-самцы, n 5) в дозе 0,7 мг/кг вестибулопротекторная активность вещества-прототипа оказалась равна 4,0 + 2,1 балла, тогда как активность предлагаемого вещества равна 1,0 + 0,5 балла. Таким образом, при одинаковом способе введения и в соизмеримых дозах препарат, полученный по заявляемому способу, обладает большей вестибулопротекторной активностью, чем вещество-прототип. Способ прост в осуществлении, состоит из четырех стадий и позволяет сократить время проведения процесса с 60-72 ч (в прототипе) до 14 ч.

Формула изобретения

Способ получения вестибулопротектора из животного сырья путем гомогенизации сырья, экстракции и отделения осадка, отличающийся тем, что, с целью повышения вестибулопротекторной активности, повышения выхода продукта и упрощения способа, в качестве сырья используют селезенку осетровых рыб, гомогенизацию проводят в 0,9 1,1 М водном растворе уксусной кислоты при соотношении сырья и раствора 5 3 5 5 и после отделения осадка раствор нейтрализуют 0,10 0,15 М водным аммиаком и лиофильно высушивают.

MM4A Досрочное прекращение действия патента Российской Федерации на изобретение из-за неуплаты в установленный срок пошлины за поддержание патента в силе

Номер и год публикации бюллетеня: 8-2000

Извещение опубликовано: 20.03.2000