Адъювант для противопастереллезной вакцины

Адъювант для противопастереллезной вакцины

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

Изобретение относится к области биологии, ветеринарии, а именно к масляным адъювантам, и может быть использовано для активной иммунизации животных и в сыворочном деле. Цель изобретения - снижение вязкости и реактогенности вакцины против пастереллеза сельскохозяйственных животных. Адъювант готовят растворением в синтетическом полиальфаолефиновом масле (МЦ) 5 - 10% эмульгатора этерифицированного триглицерина (Т - 3) и автоклавированием при 120°С в течение 1 ч. Адъювант испытывают в составе противопастереллезной вакцины на стерильность, стабильность, безвредность, вязкость, иммуногенность и реактогенность. Получены эффективные стабильные вакцины низкой вязкости. 5 табл.

СОЮЭ СОВЕТСКИХ сОциАлистических

РЕСПУБЛИК (sI)s А 61 К 39/О(ГОСУДАРСТВЕННЫИ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4693543/13 (22) 15.05.89 (46) 07.08.91. Бюл. М 29 (71) Северо-Кавказский зональный на чноиследовательский ветеринарный инсти ут (72) P.B.Йуц ук, С.Л.Азарян, О.И.Цветков, P.È.T0ïîðèùåBà, Г.Е,Колесова, С.С,Автушенко, В.А.Балмасов и В.И.Ливицкий (53) 619.22/28 (088.8) (56) Никифорова Н.M., Лукьянченко А,R, Труды ВГНКИ ветеринарных препаратов, М, 1966, т.13, с.199-206, (54) АДЪЮВАНТ ДЛЯ ПРОТИЬОПАСТЕРЕЛЛЕЗНОЙ ВАКЦИНЫ (57) Изобретение относится к области биологии, ветеринарии, а именно к масляным

Изобретение относится к области биологии, ветеринарии, а именно к масляным адъювантам, и может быть использовано для активной иммунизации животных и в сывороточном деле.

Целью изобретения является снижение вязкости и реактогенности, Изобретение иллюстрируется следующими примерами, Пример 1. Адъювант готовят непосредственно перед изготовлением вакцины иэ 90-95% синтетического полиальфаолефинового масла (МЦ) и -10% этерифицированного триглицерина (T-З).

Синтетическое полиальфаолефиновое масло представляет собой химически инертную бесцветную прозрачную жидкость с вязкостью при 20 С 10-14 мм .с и плотностью 780-800 кг/м, имеет температуру заз . стывания ниже — 40 С, . Ж,„, 1667868 А1 адьювантам, и может быть использовано для активной иммунизации животных и в сывороточном деле. Цель изобретения— снижение вязкости и реактогенности вакцины против пастереллеза сельскохозяйственных животных. Адъювант готовят растворением в синтетическом полиальфаолефиновом масле (МЦ) 5-10% эмульгатора этерифицированного триглицерина (T-3) и автоклавированием при 120 С в те ение 1 ч.

Адъювант испытывают в составе противопастереллезной вакцины на стер1 чьность, стабильность, безвредность, вязкость иммуногенность и реактогенность. Получены эффективные стабильные вакцины низкой вязкости. 5 табл.

Масло получают в виде дистиллата, выкипающего в пределах 280-380"С при разгон ке гидрирован ных полиальфаолефинов.

По химическому составу полиальфаолефиновое масло представляет собой смесь изопарафиновых углеводородов(85-90%) и нафтеновых углеводородов (10-15%) с числом углеродных атомов 20-28.

Этерифицированный триглицерин ТУ18-17/35-75 является эфиром олеиновой кислоты, стойкий неогнеопасный продукт, полностью растворенный на 96 спирте, представляет собой коричневую, тягучую жидкость с гидрофильно-липофильным балансом, равным 4,5. В синтетическом полиальфаолефиновом масле растворяют 4-10% эмульгатора этерифицИрованного триглицерина и автоклавируют при 120 С в течение 1 ч. Готовый адъювант представляет собой прозрачную маслянистую жидкость светло-коричневого цвета.

1667868

Адъювант испытывают в составе эмульгированной вакцины против пастерелл за крупного рогатого скота. овец и буйволов, содержащей, мас. :

Синтетическое полиальфаолефиновое масло (МЦ) 45

Этерифицированный триглицерин (Т-3)

Антиген до 100

Антигеном служит формалинизирован ная суспензия производственных штаммов пастерелл, используемая для изготовления коммерческой эмульгированной вакцины против пастереллеза крупного рогатого скота, овец и буйволов.

Для изучения реактогенности масляных адъювантов, содержащих различное соотношение компонентов (полиальфаолефиновое масло и этерифицированный триглицерин), а также стабильности и иммуногенной активности эмульгированных противопастереллезных вакцин на их основе.

Изготовляют 5 серий опытных противопастереллезных вакцин .

Состав опытных эмульгированных противопастереллезных вакцин приведен s табл.1.

Вакцины готовят в виде 50 эмульсии на лабораторном размельчителе тканей PT2.К проавтоклавированному и охлажденному до комнатной температуры адъюванту при постоянно работающей мешалке постепенно приливают объем 20 млрд. формалиниэированной суспенэии пастер лл (антиген). Окончательное змульгирование проводят при 5000 об/мин в течение 3-4 мин. Полученные вакцины проверяют на стерильность путем высева на различные питательные среды. К дальнейшим исследованиям допускаются лишь стерильные препараты.

Стабильность вакцин проверяют центрифугированием при 3000 об/мин в течение

30 мин и двухнедельным выдерживанием вакцин в термостате при 37 С. Вакцины признаются стабильными если не происходит расслоение водно-масляной фазы (допускается отход 10 масляной фазы от общего объема вакцины). Динамическую вязкость проверяют на ротационном вискозиметре Реотест-2, Результаты проверки стерильности, стабильности, вязкости вакцин сведены в табл.2.

Данные приведенные в табл.2, показывают, что для создания стабильных вакцин низкой вязкости оптимальным является 510 содержание эмульгатора в адъювенте (соответственно 2,5-5 )ь в вакцине). Повышение содержания эмульгатора в вакцине

55 приводит к значительному увеличению вязкости продукта.

Для изучения иммуногеной активности каждой вакциной иммунизируют внутримышечно по 6 кроликов (вес 1.5-2 кг) в дозе 1,5 мл. Четыре животных служат контролем. Через 24 дня после вакцинации животных заражают предварительно смертельной дозой

18-ти часовой культуры Р,multoclda штамм

ЬЬ 796. Результаты контрольного заражения приведены в табл.3.

Из табл.3 следует, что все опытные вакцины обладают сходной иммуногенной активностью. Изменение процентного соотношения компонентов в адъюванте существенно не сказывается на иммуногенной активности вакцины.

Оценку реактогенности адъювантов, на основе которых изготавливают вакцины, проводят на белых мышах. Десяти белым мышам весом 17-18 r вводят в область подушечки задней конечности 0,025 мл испытуемого адьюванта. Вторая конечность служит контролем, Через 14 дней мышей убивают, задние лапки отсекают по скакательный сустав и взвешивают раздельно. Реактогенность определяют как процент прироста массы лап и в результате воспалительной реакции по формуле

М1

К =- — - 1 100, м где К вЂ” коэффициент реактогенности; M — сумма веса опытных лапок;

l м — сумма веса интактных (контрольных) лапок.

Результаты реактогенности адъювантов приведены в табл.4.

Результаты показали, что изменение содержания компонентов в адъюванте не влияег на его реактогенность.

Безвредность вакцины проверяют на белых мышах в сравнении с эмульгированной вакциной против пастереллеза крупного рогатого скота, овец и буйволов. С этой целью 40 белых мышей с массой тела 16-18 г разбивают на 4 равные группы. Каждому животному вводят вакцины согласно схемы (табл,5).

Результаты испытания на белых мышах показали, что животные всех групп на протяжении периода наблюдения были живы, следовательно, вакцина на основе синтетического масла (МЦ) и эмульгатора этерифицированного триглицерина (Т-З) безвредна.

Таким образом, увеличение содержания э1ерифицированного триглицерина сверх указанных пределов не вызывает существенного изменения иммуногенной ак1667868

Таблица 1

Таблица 2

Таблица 3 тивности, реактогенности и стабильности вакцины, однако значительно увеличивает вязкость препарата и ведет к необоснованному расходу компонентов.

Снижение содержания этерифицированного триглицерина ниже 5 (не позволяет получать стабильные эмульгированные препараты.

Формула изобретения

Адъювант для противопастереллезной вакцины, содержащий масло и эмульгатор, отличающийся тем, что, с целью снижения вязкости и реактогенности, в качестве масла используют синтетическое полиальфаолефиновое масло, в качестве

5 эмульгатора этериф цированный триглицерин при следующем соотношении компонентов,мас.7ь:

Пол иальфаолефиновое масло 90-95

Этерифицированный триглицерин 5-10

1667868

Таблица 4

Таблица 5

Составитель О. Комарова

Редактор Г. Наджарян Техред M.Моргентал Корректор М. Кучерявая

Заказ 2600 Тираж Ц 1,". Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г, Ужгород, ул.Гагарина, 101