Способ диагностики сахарного диабета

Способ диагностики сахарного диабета

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

Изобретение относится к медицине, а частности к эндокринологии, и woxf т бить использовано для диагностики сахарного диабета. Целью является повы иенио точности способа. Это достигается за счет дополнительного определения иммунореакгмвного инсулина в плазме, содержания С-пзптада раздельно в плазме и эритроцитах. По полученным данным рассчитывают комплексный показатель А - Г а AI . где «i - весоi 1 вые коэффициенты, соответственно равные ,18; 02 аз 0,19; щ 0,24;О5 0,20; Ат.Аа.Аз - отношение содержания соответственно иммунореактивного инсулина в плазме до нагрузки, С-пептида в плазме через 2 ч после нагрузки, С-пептида в эритроцитах через 1 ч после нагрузки у обследуемого к соответствующим значениям , принятым за норму: Аз - отношение содержания глюкозы в крови до нагрузки, принятое за норму, к значению содержания глюкозы в крови до нагрузки у обследуемого; А - отношение абсолютных значений градиентов относительной скорости изменения С-пептида в эритроцитах у обследованных к принятому за норму. При значениях А, меньших или равных 0,63, диагностируют сахарный диабет. 1 табл.

СОК1З СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛ ИСТИЧЕ СКИХ

РЕСПУБЛИК

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

>(<(()63NR

МТ (Цу» ) y@N gjp(е; ИБЛИОТ, -д (21) 3907691/14 (22) 10.06.85 (46) 07.09.91. Бюл, М ЗЗ (71) Куйбышевский медицинский-ан„итут им.Д. И,Ул ья но ва (72) И.П,Королюк и E.ИЗ.Быховская (53) 616.07(088.8) (56) Авторское свидетельство СССР

М 957864, кл. А 61 B 10/00, 1982. (54) СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ САХАРНОГО

ДИАБЕТА (57) Изобретение относитсг; к медицине, в частности к эндокринологии, и может быть использовано для диагностики сахарного диабета. Целью является повышение точности способа. Это достигается за счет дополнительного определения иммунореактивного инсулина в плазме, содержания С-пептида раздельно в плазме и эритроцитах. По полученным данным рассчитывают комплексИзобретение относится к медицине, в частности к эндокринологии и радиологии, и может быть использовано для диагностики сахарного диабета, Целью изобретения является повышение точности способа за счет дополнительного определения иммунореактивного инсулина в плазме, содержания С-пептида раздельно в плазме и эритроцитах и расчета комплексного показателя по пяти параметрам, Способ осуществляется следующим образом.

Уобследуемого проводят пробунатолерантность к глюкозе, которую выполняют на фоне обычной диеты. У здоровых лиц натощак берут кровь на сахар, после чего дают...Я3,» 1675774 Al

5 ный показатель Л=-, QI AI, где — весоI =1 вые коэффициенты, соответственно равные а = 0,18; а = аз = 0,19; ал = 0,24,"а5 = 0,20;

A1,AúA3 — отношение содержания соответ} ственно иммунореактивного инсулина в плазме до нагрузки, С-пептида, в плазме че.рез 2 ч после нагрузки, С-пептида в эритроцитах через 1 ч после нагрузки у обследуемого к соответствующим значениям., принятым за норму, А4 — отношение содержания глюкозы в крови до нагрузки, принятое за норму, к значению содержания глюкозы в крови до нагрузки у обследуемого; АŠ— отношение абсолютных значений градиентов относительной скорости изменения С-пептида в эритроцитах у обследованны", к принятому за норму, При значениях Л, меньших или равных 0,63, диагностируют сахарный диабет. 1 табл, нагрузку глюкозой в количестве 75 r, растворенной в 200,0 — 250,0 мл воды. Раствор выпивают в течение 2 мин. У больных применяют пищевую нагрузку . После этого кровь на сахар забирают через 60 и 120 мин.

Одновременно в крови обследуемого проводят количественное определение иммунореактивного инсулина (ИРИ) в плазме и эритроцитах, С-пептида в плазме и эритроцитах в те же моменты времени.

Для определения иммунореактивного инсулина используют радиоиммуноаналитические наборы Института изотопов Венгерской Академии наук.

Для определения ИРИ плазмы в пробирки заливают 0,1 буфера, затем 0,1 мл раствора

Oiза В16

"m,. + п4

f)5

1:f /. I (/.

), тк

k=1

СП1- С

СПр — СП, СП„

С По

С П вЂ” 2 С П1 + С Г -, трейсера, пробирки встряхивают 0,5 мин, заливают в них по 0,1 aHтисыворотки и мин тщательно встряхивакгг рукой. Затем пробирки инкубируют и течение 20 ч при

4-8"C. После инкубации во все пробирки заливают по 0 2. мл суспенэии декстранирс" ванного угля. Пробирки встряхив".ioT в тече. ние 1 мин, центрифугирук." при ускОрзнии

2500-3000g, сливакзт;раствор и измеряют реактивность каждого осад.<з, Иммунореактивный ин-.,улин в эритроцитах определяют с г1омощью этих жв наборов, следующим образом, И» гепаринизированной венозной крови центрифугированием (10 мин — 1000 об/ мин) получают эритроцитарную массу, .к нсй добавляют физиологический раствор в соотношении 2;1 и тщательно перемешивают, Затем эту смесь вновь центрифугируют и удаляют супернатзнт. Эту операцию повторяют 3 раза. Для получения гемолизи рова н н ы х ар итра цитов препарат разбавляют бидистиллированной водой и центрифугируют при <3000 ????>

Для определения С-пеп""идз в плазме к

0,1 мл плазмы добавля от 0,1 мл рас "вора

С-пептида меченого и 0,1 мл С-пептида— антисерума, пробирки ин кубируют r) ри комнатной температуре 24 ч, к содержимому пробирок дс бавля от 1 мл:<озь.его-знтираббического гамма-глоГэулинз (полиэтиленгликоль), инкуэируlGT при комнатной температуре 40 мин, центрифугируют 30 мин при 2000q, удал ют супернатаи1, подсчитывают радиоак гивность осадка.

С-пептид в эритроцитзх определяют ь помощью этих же наборов. Зритроци гы готовят аналогичным образом как и при определении иммунорезкп .вно. о инсулина, Радиометрия и калькуляция реэульт: —.тов осуществлялась на установке "Минигамма", оснащенной компьютером "ДейтаБокс 1222" (фирма ZKB).

Градиент относительной скорости и.-менения С-пептида в эритроцитах определяют как разность Относительной скоросю изменения содержания С-rienтидз за второй час V2 минус Относительная скорость за первый час V1

Сп, Сп1, СГ1 ; — соответственно значения концентрации C-пептида в эритроцитах натощак, чсрез 1 и 2 ч после нагрузки, При расчете коэффициента А (отношение градиен-loa) не учитывают знак, а берут только абсолютное значение.

Содержание (среднее) и разброс УСК. иммунореактивногс инсулина (ИРИ) в плазме и эритроцитзх, С-пептида в плазме и эритроцитах натощак, через 1 и 2 ч после нагрузки в норме — приведены в таблице.

Для определения весовых коэффициенTG8 испольэовали Относительные различия средних значений, вычисленные ПО формчле где Вид и Ва -- среднее значение i-го ингредиента у здоровых и больных; пцдд и п1 ь — средняя Ошибка i-го ингредиента у здоровых и больнь.х.

Наиболее информативными параметрами явля:отся те, для которых t .> 10, а те параметры, для которых; <10, Отбрасываем кзк недостаточно лнформативные, Существенные p;". Ëè÷èÿ Относительной величины. ингредиента для здоровых лиц и больных сахарным диабетом имеют пять параметров. Это иммунорезктивный инсулин в плазме до í-г-рузки — A1, С-пептид в плазме через 2 ч после нагрузки — А2, С-пептид в эритроц тах через 1 ч после нагрузки — АЗ, глюкоза в крови до нагрузки — Ад и градиент скорости изменения С-пептида в эритроцитах — Ав.

Ъ

Остальнь,е параметрь, либо имеют малое различие межу больными и.здоровыми, либо имеют большой разброс (бсльшое Относител ьн Ое энзчен ие среднек вадратического О;.<ланени и большу;О ошибку определения средиего). Весовые ксэффициенты определены = помо цью выражения

Для голу;ения граничного зна, ения комплексного i1окзэателя использованы с бстьенные нзолюдения (73 условно здоровых лица и 52 больных сахарным диабетом 1 типе) и данные, опубликованные в литературе, В onуоликовзннь;х данных наблюдаются некоторые различия в определении абсолютных значений нормы и граничных значений, но относительные данные и динамика изменений концентрации хорошо сов1675774 падают. В тех случаях, когда комплексный показатель, определяемый по 5 параметрам, меньше 0.63, диагностируют сахарный диабет.

П ри мер 1. ПациентО., 27л. Результаты исследований; ИРИ в плазме натощак 144 пмоль/л, С-пептид в плазме через 2 ч 942 пмоль/л, С-пептид В эритроцитах через 1 ч

2231 пмоль/л; УСК натощак 8,4 ммоль/л, градиент скорости С-пептида в эритроцитах 2,3, комплексный показатель 0,63.

Несмотря на то, чтс I ðè обследовании отмечался нормальный уровень С-пептида в эритроцитах через 1 ч после пищевой нагрузки, однако комплексный показатель, вычисленный по предлагаемой формуле, меньше 0,67, что позволяет диагностировать сахарный диабет, Пример 2. Пациент Ш., 25 л. Результаты исследований: ИРИ в плазме натощак

68 пмоль/л, С-пептид в плазме через 2 ч 942 пмоль/л, С-пептид в эритроцитах через 1 ч

1992 пмоль/л, УСК натощак 4,1 ммоль/л, градиент скорости С-пептида в эритроцитах

1,1, комплексный показатель 0,5. При обследовании уровень сахара натощак соответствует норме, но, несмотря на это, определив уровни концентрации гормонов и вычислив комплексный показатель, делаем вывод о наличии сахарного диабета, что подтверждают данные клинического обследования, Пример 3. Обследуамый Р., 21 r.

Результаты исследований: ИРИ з плазме натощах 279 пмоль/л; С-пептид в плазме через 2 ч 1072 пмоль, л, С-пептид в зритроцитах через 1 ч 2607 пмоль/л, УСК натощак

4,7 ммоль/л, градиент скорости С-пептида в эритроцитах 2, комплексный показатель

0,85.

Несмотря на то, что обследуемый принадлежит к группе здоровых лиц, некоторые показатели выходят за пределы нормы: высокое содержание С-пептида B эритроцитах через 1 ч и градиент скорости С-пептида в эритроцитах соответствуют норме больных.

Однако остальные данные и комплексный показатель, вычисленный по пяти параметрам, позволяют отнести обследуемого к здоровым лицам.

У 52 больных 1 типом сахарного диабета, из которых 25 человек были в возрасте до 25 лет, и у 75 практически здоровых людей В возрасте до ЗО лет проведено 1875 исследований vMMyHopaaKTv>BHor0 инсулина и "-пептида В ходе глюкозотолерантного теста, Несмотря H"; то, что некоторые пара5 метры крови у больных имели величину такую же, как и у здоровых, но по величине комплексного показателя у них диагностирован сахарный диабет. Аналогичная картиH наблюдалась в группе здоровых лиц, 10 Отдельные параметры крови соответствовали заболеванию сахарным диабетом, одна-, ко применение комплексного показателя позволило сделать вывод об отсутствии забол: вэния. Способ относительно недоро15 гой, прост технически, Точность способа 95 Д. Предлагаемый способ позволяет уменьшить область сомнительных результатов в 10 раз по сравнеHvIlo с известными способами диагностики

20 саха;.,ного диабета.

Формула изобретения

Способ диагностики сахарного диабета пугем биохимического исследования крови

25 больного в процессе глюкозотолерантного теста, отл ича ю щийс ятем, что,с целью повышения точности способа, дополнительно определяют иммунореактивный инсулин в плаз. е, содержан. е С-пептида раздельно

30 В плз.". ::4е и эритроцитах. Вычисляют комплекг::..:- и показагель по пяти параметрам с

5 помогцью выражения Л = g e! AI, где QI—

I =-1 весовые коэффициенты, соответственно равные гг1 = 0,18; аг = аз = 0,19;ад = 0,24; й5 =- 0,20; А1, Аг, Аз — отношение содержания соответственно иммунореактивного инсулина В плазме до нагрузки, С-пептида в плазме через 2 ч после нагрузки, С-пептида в зритроцитах через 1 ч после нагрузки у обследуемого к соответствующим значениям, г1ринятым за норму; А4 — отношение содержания глюкозы в крови до нагрузки, 45 принятое за норму, к значению содержание глюкозы В крови до нагрузки у обследуемого; А5 — отношение абсолютных значений градиентов относительной скорости изменения С-пептида В эритроцитах у обследуемого к принятому за норму, и при значениях

А меньших или равных 0,63, диагностируют сахарный диабет.

1675774

УСК

Редактор Л. Волкова

Заказ 2998 Тираж 386 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", r. Ужгород, ул.Гагарина, 101,4,7,8-5,3

5,5,9 — 6,4

4,9

9- 6,0

1 !Составитель Л. Артюшина

Техред М.Моргентал Корректор О, Кундрик