Способ диагностики активных форм туберкулеза легких

Способ диагностики активных форм туберкулеза легких

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

Изобретение относится к области медицины , преимущественно к пульмонологии, и может быть использовано для дифференциальной диагностики активных форм туберкулеза легких Целью изобретения является повышение точности способа за счет дифференциальной диагностики активных форм туберкулеза и неспецифических пневмоний . Цель достигается тем, что эритроциты крови исследуются в реакции эхиноцитарной трансформации эритроцитов, которую проводят до и через 24 ч после постановки пациенту реакции Манту с 2ТЕ турберкудина ППД-Л, при этом реакцию трансформации осуществляют посредством инкубации крови в присутствии вакцины БЦЖ в течение 1 ч при комнатной температуре с последующей фиксацией клеток и подсчетом показателя эхиноцитарной трансформации эритроцитов и отношения показателей до и после туберкулиновой нагрузки и при значении отношения 1,1 и выше диагностируют неспецифическую пневмонию, а при значении, меньшем 1,1, диагностируют активный туберкулез легких. Положительный эффект способа заключается в отличие от известного способа в достижении дифференциальной диагностики. W Ё

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (я) 6 01 N ЗЗ/53

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4484486/14 (22) 20.09.88 (46) 30.09.91. Бюл. М 36 (71) Ставропольский государственный медицинский институт (72) В,Н.Игнатьев и Т.И.Новикова (53) 615.375 (088.8) (56) Авторское свидетельство СССР

ЬЬ 635970, 1976, (54) СПОСО} ДИАГНОСТИКИ АКТИВН6!Х

ФОРМ ТУБЕРКУЛЕЗА ЛЕГКИХ (57) Изобретение относится к области медицины, преимущественно к пульмонологии, и может быть использовано для дифференциальной диагностики активных форм туберкулеза легких. Целью изобретения является повышение точности способа за счет дифференциальной диагностики активных форм туберкулеза и неспецифических пневИзобретение относится к медицине, а именно к пульмонологии, и может быть использовано для дифференциальной диагностики активных форм туберкулеза легких и неспецифической пневмонии и для оценки состояния иммунитета к микробактериям туберкулеза у этой группы больных.

Цель изобретения — повышение точности эа счет дифференциального выявления активного туберкулеза легких и неспецифической пневмонии.

Способ осуществляется следующим образом.

Кровь из капиллярных сосудов пальца, взятую общепринятым методом, в количестве 0,002-0,005 мл переносят в среду физраствора на 0,1 М фосфатном буфере. рН 7,4, .. Ж 1681258 А1 моний. Цель достигается тем, что эритроциты крови исследуются в реакции эхиноцитарной трансформации эритроцитов, которую проводят до и через 24 ч после постановки пациенту реакции Манту с 2ТЕ турберкудина ППД-Л, при этом реакцию трансформации осуществляют посредством инкубации крови в присутствии вакцины

БЦЖ в течение 1 ч при комнатной температуре с последующей фиксацией клеток и подсчетом показателя эхиноцитарной трансформации эритроцитов и отношения показателей до и после туберкулиновой нагрузки и при значении отношения 1,1 и вы- ше диагностируют неспецифическую пневмонию, а при значении, меньшем 1,1, диагностируют активный туберкулез легких.

Положительный эффект способа заключается в отличие от известного способа в достижении дифференциальной диагностики. в объеме 0,2 мл, содержащую вакцину БЦЖ 0" в концентрации t мг/мл производства Став- 00 ропольского НИИ вакцин и сывороток, хорошо перемешивают и оставляют на 1 ч при,,} комнатной температуре (21 + 3 С). По исте- (Л чении 1 ч реакцию останавливают добавле- р нием в пробу 0,02 мл 25%-ного глютаральдегида, перемешивают для равномерного распределения фиксатора и через 3 — 5 мин иэ полученной смеси готовят препарат "раздавленной капли", который микроскопируют при увеличении 40 х 10 х

1,5 (при наличии бинокулярной насадки) или

40 х 15 без нее. Учету подлежат нормальные формы эритроцитов — дискоциты (клетки двояковогнутой формы с гладкой поверхностью) и эхиноциты (шиповидно-деформиро1681258

611

320,5 ванные клетки) разной степени выраженности (I, II, Ill u IV степени по классификации

М.Bessfs), Подсчитывают не менее 200 клеток в каждом препарате, встречающихся в поле зрения, подсчитывают их среднеарифметическое значение на 100 клеток для выражения результата в процентах и вычисляют затем показатель эхиноцитарной трансформации эритроцитов (ПЭТЭ) по формуле:

ПЭТЭ = („, эхиноцитов 1 ст). + (Р эхиноцитов II ст. х 10) + (), . эхиноцитов I II ст. х 100) + (, >, эхиноцитов IV ст. х

1000). Далее больному не позже чем через 1 ч после первого забора крови ставят реакцию Манту с внутрикожным введением

2 ТЕ туберкулина, а через 24 ч повторяют взятие крови из пальца для повторного проведения всех вышеописанных манипуляций и вычисления ПЭТЭ после туберкулиновой нагрузки. Для решения вопроса о специфике воспалительного заболевания в легких рассчитывают индекс соотношения между

ПЭТЭ до и ПЭТЭ после туберкулиновой пробы путем деления первого показателя на второй:

Индекс ПЭТЭ ПЭТЗпослеППД

При значении индекса 1,1 и более ставится диагноз неспецифической пневмонии, а при значении менее 1,1 — активной формы туберкулеза легких.

Способ иллюстрируется следующими примерами конкретного выполнения.

Для удобства одновременного обследования группы пациентов были использован ы 96-луночные планшеты для иммунологических реакций с максимальным объемом лунки 0,25 мл и герметичной пластиковой крышкой. Время инкубации смеси в каждой лунке учитывали индивидуально.

П ри м е р1. Больной Антонов С.И. При первичном обследовании была взята капиллярная кровь из пальца в количестве 0,002—

0,005 мл (на кончике пластикового наконечника микропипетки), которая перенесена в лунку планшета для иммунологических реакций с 0,2 мл физраствора на 0,1 M фосфатном буфере, содержащем вакцину

БЦЖ в концентрации 1 мг/мл, хорошо перемешана со средой путем пипетирования, накрыта пластиковой крышкой и оставлена на инкубацию при комнатной температуре.

Спустя 1 ч в лунку добавлено 0,02 мл 25 ного глютаральдегида, вновь проведено пипетирование смеси и через 3 — 5 мин был приготовлен препарат "раздавленной капли". Для этого на предметное стекло наносили 1 каплю реакционной смеси и накрывали ее тонким покровным стеклом, 5 окантованным тонким слоем вазелина. Микроскопическое изучение красных клеток крови показало наличие в препарате 46 эхиноцитов степени, 16,57 o эхиноцитов Ii степени и 4 эхиноцитов ill степени. Пока10 затель эхиноцитарной трансформации эритроцитов (ПЭТЭ)

ПЭТЭ = 46 + (16,5 х 10) + (4 х 100) = 611.

Сразу же после взятия крови больному сделана реакция Манту с 2 ТЕ туберкулина, 15 а на следующий день в это же время (т.е. через 24 ч) проведено повторное исследование крови по уже описанной методике с вычислением ПЭТЭ после туберкулиновой пробы:

ПЭТЗ = 65,5+(5,5 х 10)+(2 х 100) =320;5.

Для решения вопроса о специфичности воспалительного процесса в легких был рас25 считан индекс соотношения ПЭТЭ до и после проведенной пробы Манту:

30 т.е. более 1,1, поэтому расценен как типичный для неспецифической пневмонии. В дальнейшем в ходе обследования и пробного лечения пациента диагноз пневмонии, 35 поставленный с помощью предлагаемого способа, был подтвержден клиническим диагнозом, Пример 2. Больной Бурцев l0.Н. При первичном обследовании с целью диффе40 ренциальной диагностики активного туберкулеза легких и пневмонии проведено исследование способности эритроцитов изменять свою форму при инкубации в физрастворе с вакциной БЦЖ до и через 24 ч после

45 постановки реакции Манту с 2 ТЕ туберкулина, В результате величина ПЭТЭ до туберкулиновой пробы составила

50,5+ (9 х 10) = 140,5, 50 а через 24 ч

58,5+ (2,2 х 10) + (1 х 100) = 378,5.

Последующее вычисление индекса соотношения ПЭТЭ показало: что вели55 чина индекса значительно меньше 1,1:

140,5

37 - 0,4, в связи с чем и заболевание пациента было расценено как активная форма туберкулеза легких. В дальнейшем в ходе дополнительного обследования и пробного

1681258 дующей фиксацией клеток, подсчетом показателя эхиноцитарной трансформации эритроцитов и отношения показателей до и после туберкулиновой нагрузки и при значении отношения 1,1 и выше диагностируют неспецифическую пневмонию, а при значении, меньшем 1,1, диагностируют активный

45 туберкулез легких.

Составитель П. Бонарцев

Редактор Л. Веселовская Техред M.Ìîðãåíòàë Корректор С. Шевкун

Заказ 3310 Тираж 386 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул.Гагарина, 101 специфического лечения диагноз, поставленный на основе предлагаемого лабораторного исследования крови, был подтвержден клиническим диагнозом, Всего под наблюдением с целью дифференциальной диагностики воспалительного процесса в легких было 63 пациента в возрасте от 30 до 65 лет; иэ них 43 с активной формой туберкулеза легких и 20 с неспецифической пневмонией.

При обследовании пациентов по предлагаемому способу было обнаружено, что в то время как количество эхиноцитов (и величина ПЭТЭ) после туберкулиновой нагрузки у больных с активной формой туберкулеза легких имеет тенденцию к увеличению при среднем значении индекса ПЭТЭ, равном

0,37 й0,04, у больных пневмонией величина

ПЭТЭ вЂ” увеличивалась при среднем значении индекса ПЭТЭ, равном 3,75 и 0,79. При индивидуальной оценке величины индекса у каждого больного было установлено, что у больных с диагнозом активная форма туберкулеза легких этот индекс всегда ниже 1,1, а у больных неспецифической пневмонией равен или выше 1,1, т.е. была определена диагностическая граница. выше которой располагались значения индексов ПЭТЭ у больных с пневмонией, а ниже — у больных с активной формой туберкулеза.

Необходимо отметить, что черезвычайно высокая чувствительность предлагаемого способа диагностики обусловлена прежде всего инкубацией крови с вакцинным штаммом микробактерий туберкулеза и тем, что способ предусматривает изучение взаимодействия клеток крови с полными оболочными антигенами возбудителей туберкулеза, а не с продуктами их жизнедеятельности (туберкулином) и учет результатов реакции по малейшему изменению формы эритроцитов, а не по их конечному разрушению (гемолизу), как в прототипе.

Таким образом, предлагаемый способ . дифференциальной диагностики активных форм туберкулеза легких и пневмонии по10

35 зволяет в течение 24 ч точно и однозначно определить у больного характер воспалительного (патологического) процесса в легких и своевременно начать его специфическое лечение. Последнее обстоятельство имеет особое значение. так как в настоящее время отмечается заметное изменение клинического течения и патаморфоза не только всех форм туберкулеза легких, но и неспецифических пневмоний, что обусловливает повышенную частоту диагностических ошибок среди этих заболеваний от 30 до 50о .

Кроме того, предлагаемый способ отличается простотой исполнения, доступностью для любой диагностической лаборатории и неограниченной широтой количественной характеристики результатов реакции в виде показателя эхиноцитарной трансформации эритроцитов, что позволяет изучать у каждого пациента состояние устойчивости к возбудителю в процессе спе- . цифической терапии.

Формула изобретения

Способ диагностики активных форм туберкулеза легких путем клинического обследования и исследования эритроцитов крови, отличающийся тем,что,сцелью повышения точнг сти путем дифференциального выявления активных форм туберкулеза и неспецифических пневмоний, эритроциты крови исследуют в реакции эхиноцитарной трансформации зритроцитов, при этом проводят реакцию до и через 24ч. после постановки пациенту реакции Манту с 2ТЕ туберкулина ППД-Л путем инкубации крови в присутствии вакцины БЦЖ в течение 1 ч при комнатной температуре с после.