Способ определения аллергенных свойств химических веществ, нерастворимых в воде

Способ определения аллергенных свойств химических веществ, нерастворимых в воде

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

Изобретение относится к медицине и может быть использовано при изучении аллергенных свойств химических веществ, нерастворимых в воде. Цель изобретения - повышение чувствительности и точности способа. Животных сенсибилизируют исследуемым соединением, затем производят забор крови. Кровь разводят, инкубируют в присутствии исследуемого вещества в ячейках планшета и при выявлении агглютинации эритроцитов определяют аллергенные свойства этого соединения. В сравнении с прототипом при минимальной концентрации исследуемых веществ точность увеличь вается на 50%

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (я)5 G 01 N 33/53

ГОСУДАРСТВ Е ННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ :К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4491471/14 (22) 10.10.88 (46) 30.09.91, Бюл. N. 36 (71) Львовский государственный медицинский институт (72) И.И.Даценко, В.С.Петрус и Е.П,Корнейчук (53) 615.374 (088.8) (56) Алексеева О.Г., Дуева Л.А. Аллергия к промышленным химическим соединениям, M., 1978, с. 179 — 190. (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АЛЛЕРГЕННЫХ СВОЙСТВ ХИМИЧЕСКИХ ВЕЩЕСТВ, НЕРАСТВОРИМЫХ В ВОДЕ

Изобретение относится к медицине, а именно к гигиене труда и профессиональной патологии, может быть использовано при изучении аллергенных свойств химических веществ, подлежащих нормированию в объектах окружающей среды.

Цель изобретения — повышение чувствительности и точности способа.

Способ осуществляется следующим образом.

Подопытных животных (морских свинок) сенсибилизируют путем введения 100 мг исследуемого вещества, т.е. 400 мкг на 1 кг веса в объеме 0,2 мл внутрикожно в ухо либо нанесением на кожу химического соединения в концентрации, не вызывающей раздражающих эффектов (что определяется в опытах на интактных свинках). Через 10 дней после сенсибилиэации у животных берут кровь из сердца в смоченную гепарином (1:10) пробирку. Кровь разводят иэотониче,!Ж, 1681259 А1 (57) Изобретение относится к медицине и может быть использовано при изучении аллергенных свойств химических веществ, нерастворимых в воде. Цель изобретения— повышение чувствительности и точности способа. Животных сенсибилизируют исследуемым соединением, затем производят забор крови. Кровь разводят, инкубируют в присутствии исследуемого вещества в ячейках планшета и при выявлении агглютинации эритроцитов определяют аллергенные свойства этого соединения. В сравнении с прототипом при минимальной концентрации исследуемых веществ точность увеличивается на 50 . ским раствором хлорида натрия 1:1 и вносят Я пипеткой по 0,1 мл в 2 лунки планшета, одна из которых содержит взвесь изучаемого рас..Ь твора, а другая является контролем без аллергена. т.е. содержит 0,5 мл чистого физиологического раствора. Опытную про- О бу инкубируют с наибольшей концентрацией химического вещества, дающего с кровью интактных животных резко очерчен- (Я ный осадок. О

Те же операции производят с кровью контрольных, несенсибилизированных животных. Планшет помещают на 55 — 70 мин в термостат при 36-37 С.

По истечении инкубационного периода производят учет реакции по характеру осад-ка. Компактный осадок с ровными краями оценивают как отрицательную реакцию.

Осадок с неровными, фестончатыми краями оценивается как положительная реакция

1681259

Составитель В, Литовченко

Техред М,Моргентал Корректор С Шевкун

Редактор Л, Павлова

Заказ 3310 Тираж 387 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", r, Ужгород, ул,Гагарина, 101 при одновременном отсутствии реакции в двух контрольных пробах, Пример 1. Подопытных морских свинок в количестве 6 штук сенсибилизируют дозой 100 мкг/кг веса й-й -дитиодимофолина (ДТДМ). Спустя 10 дней у животных берут из сердца кровь для постановки иммунологических тестов. Для определения рабочей дозы антигена 0,1 мл разведенной в

10 раз цельной крови интактных животных вносят в лунки планшета, содержащие по

0,5 мл взвеси ДТДМ в концентрациях 1:100, 1:1000, 1:10000, 1:100000. Планшет помещают на 1 ч s термостат при температуре 37 С.

По истечении инкубационного времени производят учет реакции. В концентрации

1:1000 наблюдают осадок эритроцитов резко очерченной формы и, следовательно, данная концентрация используется как рабочая. С ней производят исследование осаждения эритроцитов крови сенсибилизированных животных. После инкубации крови сенсибилизированных и несенсибилизированных животных с антигеном в концентрации 1;1000 отмечают наличие положительного эффекта в опытной пробе (осадок эритроцитов с кружевными, фестончатыми краями) и отсутствие осадка такого характера в контроле. Таким образом, данное вещество обладает аллергенными свойствами.

Пример 2. Аналогично примеру 1 исследуют пробы крови сенсибилиэированных животных с 2-меркаптобензтиаэолом (каптаксом), который по литературным данным является причиной аллергических заболеваний у рабочих резиновых производств.

YcTBHoBII8Hbl аллергические свойства у данного соединения.

Пример 3, Двум группам морских свинок светлой масти на выстриженный участок кожи в течение трех дней наносят аппликации 2,4-динитрохлорбензола (ДНХБ) в

5 концентрациях 1;200 и 1:10 в 1 -ном спиртовом растворе, Исследование проводят аналогично примеру 1.

Использование предлагаемого способа позволяет также выявить аллергические

10 свойства у этого соединения.

Нерастворимость в воде порошкообразных антигенов является условием постановки РСКЭ в то время, как для РСАЛ и

РСЛЛ это обстоятельство усложняет поста15 новку опыта, требует подбора оптимального растворителя (спирт, ацетон, диметилсульфоксид и др.), что не всегда удается.

В сравнении с прототипом повышается чувствительность способа и точность спосо20 ба. Так при минимальных концентрациях исследуемых веществ (50-100 мкг/мл) точность определения с использованием предлагаемого способа равна 83,5-100ф>. а в прототипе — 33,3-50$, т.е. увеличивается на

25 50, Формула изобретения

Способ определения аллергенных свойств химических веществ, нераствори30 мых в воде, включающий сенсибилизацию животных, забор крови, инкубирование ее в присутствии химического вещества, о т л ич а ю шийся тем, что, с целью повышения чувствительности и точности способа, кровь

35 разводят и инкубируют с химическим веществом в ячейках планшета и при наличиии агглютинации эритроцитов определяют аллергические свойства химического вещества.