Способ диагностики аллергии

Способ диагностики аллергии

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

Изобретение относится к медицине, а именно аллергологии, и может быть использовано для выявления причинно-значимых аллергенов у больных с аллергическими заболеваниями. Целью изобретения является повышение точности и ускорение диагностики . По методу Airman P.P. (1972) определяют активность глюкозо-6-фосфат-дегидрогеназы до и после инкубации крови с аллергеном в концентрации 100- 10 pNU/мл в течение 20-40 мин. При увеличении активности фермента на 40% от исходного и более диагностируют аллергию к исследуемому аллергену

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (51)5 G 01 N 33/50

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

12,5

14.0

4.15

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4719269/14 (22) 14.07.89 (46) 15.10.91. Бюл. ¹ 38 (71) Ленинградский педиатрический медицинский институт (72) И.M.Âîðîíöîâ и Н.М.Севрук (53) 615.475(088,8) (56) Фрадкин В.А. Диагностика аллергии реакциями нейтрофилов крови. — М„ Медицина, 1985, с.6 — 18. (54) СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ АЛЛЕРГИИ (57) Изобретение относится к медицине, а именно аллергологии, и может быть испольИзобретение относится к медицине, а именно к аллергологии, и может быть использовано для выявления причинно-значимых аллергенов у больных с аллергическими заболеваниями.

Целью изобретения является повышение точности и ускорение диагностики, Способ осуществляют следующим образом, Выявление активности глюкозо-6-фосфат-дегидрогеназы в полиморфно-ядерных лейкоцитах проводят по методу Altman F.P. (1972).

В ячейки планшета для иммунологических реакций вносят по 0.02 мл растворов аллергенов, разведенных до 10 в 199 сре-з де на растворе Хенкса (используются коммерческие серии аллергенов, содержащие

10000 pNU/ìë). В другую ячейку планшета вносят 0,02 мл 199 среды на растворе Хенкса..Затем в эти ячейки вносят по 0,04 мл гепаринизированной крови (гепарин из расчета 10 ед/мл) и проводят инкубацию в те„„SU „„1684688 А1 эовано для выявления причинно-значимых аллергенов у больных с аллергическими заболеваниями. Целью изобретения является повышение точности и ускорение диагностики, По методу Altman F.P. (1972) определяют активность глюкозо-6-фосфат-дегидрогенаэы до и после инкубации крови с аллергеном в концентрации 10010 pNU/ìë в течение 20 — 40 мин. При увеличении активности фермента на 40 (, от исходного и более диагностируют аллергию к исследуемому аллергену. чение 20-30 мин при 37 С. После инкубации делают мазки крови на предметных стеклах и высушивают. Затем готовят инкубационную смесь для выявления активности глюкоэо-6-фосфат-дегидрогеназы, для чего в химический стаканчик последовательно вносят:

Вода дистиллированная, мл 3,0

0-глюкозо-6-фосфат-натриевая соль, М.м = 358,2 (Serva), мг 44,0

j3--Н икотинамид адениндинуклеотидфосфат натриевая соль

M.ì = 801,4 (Serva), мг 57,5

0,2 М раствор трис-HCI буфер, рН = 7,60,мл

Натрия цианид,мг

Декстран, M.ì. = 500000 (Pharmacla Sweden), г 3.0

0,15 -ный раствор ТНСТ (тетранитросиний тетразолий).

М,м. = 907,7 (Serva). мл

1;ь-ный раствор ФМС (фенаэинметасульфат), nx1+nx2 I-пх3

100 (К2 -К1)+100

t.1 И

М.л1 — 308 3). л1л 0,51

Вода дигтиллирпвдннэя до об((сего с бьемд, мл 25,0

14а предметное гтекло с гухим нефиксировэнным мазком крови наносят 1,0- 1,5 мл приготовленной ех temporae инкубационной среды и помещают в термостэт на 20 мин при t:= 37"С. Затем стекла проглыяают в дистиллированной воде, фикгируют мазок

2 3 мин в 10;(,-ном зэбуференном формалин» и повторно промь(вакыт дистиллированной водой, Стекла выгушивэют. Ядра клеток дпкрашивдюг 3 мин 0,1%-ным рэс(вором неитральнпго крэгного нэ 0,1 М ацетэтном буфере рН - 5.0. Г1ромывают высушивают, микрог.копируют.

B (le!I(1 (t lH3Io T среднии ци сохимический коэффициент (СЦК), условно принимая интенсивность образования гранул диформаэдна (1 неигрофилэх зэ слабо (!пложительную 1, положит ель!!у(о 2, резко положительную 3 (де CljK ср(.днии цитохимический козффиц(1Р. Нт: п количес1во неитрофилов с данной

c(c;rIet! t,to интенсивности обрдэовэния гра нул, 1,?, 3 etc пень интенсивности образо(дния грднул;

100 коли lerlno просмотренных в мазке клеток

О прирос (е эк(ивност(1 фермен (а судят пп разнице знач lltll1 СIIK после инкубэции с аллерсеном (I исходнпи активнпсти фс рмента, вырдж»HIIol1 в Ilpolt(.ítnë: оо птношеНИК1 К ИГХОДНОИ (Iрирпсг эк((1лнс!сти ф»рл1! нтэ.%

Дпмэшняя nl,l(it, с .pl!!i 25

Т и же. серии 261

To we, серии 236

f t iIIä ((р»скэ)

Яй!(о (курllllo» ц»!!(,н(1(,)

Vonît,о

11ыльцд б»резы

Т1 c (ò !,ot! (Ппльнэя жидлосгь

По даннь!м с.с1(; (едпс!э(«! Ilt I!if л! .нд сан

;.иб(1л(1зэ((!1я к сл»дуг(!!(I:Itl (1!!Р(»!.ндг! д(!

M3ItlHpè п(,lilt! г! .I!(1l1 " . 7 . реслp., куриныл1 яйцам, чтп поctT(!с111....(!.нп кпжt l,lt1(1 (;t nрификдI(!1(1IIГ! I It °,I (1 1."<, . С C! !! I!

I g! . К1 значение СЦК исходное;

К2 значение СЦК после инкубации крови с аллергеном

Диэгностически значимым считается прирост активности фермента нэ 40% от исходного и больше.

Способ подтверждается следующими примерами, Пример 1. Больная Л., 11 лет. Диагноз: астматический бронхит, атопический (сенсибилиэация к пыли), легкое течение, внеприступный период. Сопутствующий диагноз: аллергический ринит. Пищевая аллергия (сенсибилизация к группе облигатIIbIX аЛЛЕРГЕНОВ).

1 !

Из энамнезэ известно, что у ребенка с зтя гощенной а гопической наследственно2(1 стью первые проявления пищевой аллергии

1эблюдались с 2-месячного возраста в виде

=еборрейной экземы. которая в дальнеиIIJeM трансформировалась B нейродермит. (Эбострение кожных проявлений отмечалогь при употреблении в пищу цитрусовых. шоколада. фруктовых соков, яиц, рыбы.

С 7 лет отмечалась заложен ность носа с периодическими приступами многократного чихания. С 9 лет появились явления бронхидльной обструкции впервые после работы в школьной библиотеке, которые купировались зуфиллином. солутэном. С 11 лет типичные приступы затрудненного дыхания. !

Проведено обследование согласно предлагаемому способу.

Получены следующие результаты: исходная активность глюкозо-б-фосфат-деI идрогеназы — СЦК вЂ” ?,14.

1I) Активность фермента после стимуляции дллер(енэми;

СЦК % прироста активности

3,58 67,2

2,84 23,4

2,81 31,3

3.32 55.1

3,2 1 55,0

2,31 7,9

2,37 10,7

2.29 7.0

Пример 2. Ьольная Л., 7 лет. Диагноз. бронхиэльнэя эс1ма типичная, атопическая

1сенсибилизэция к домашней пыли). средне(яжелое течение. Внеприступный перис>д, Из анамнеза известно, что у ребенка с лясощенно(1 а опической наследственно108 1г1 .1 элции с эллергенами домашнс11 пыли О1ме чЛЛСЯ ПОЛОЖИТЕЛЬНЫЙ ЗффЕК1.

Было проведено обследование ПОЛ, 1 ны следующие результаты: исходная lv11111 ность глюкозо-6-фосфат-дегидроген,i.çû

СЦК = 1,21. активность фермента после сти муляции аллергенами:

t0 прироста активности

87,6

72,7

24,8

22.3

СЦК

2.27

2,09

1,51

1.48

ДОма1пняя пыль сЕрии 257

То же, серии 261

То же, серии 236

Тест контрольная жидкОсть

Мятлик

Тимофеевка

Овсяница

Береза!

Составитель Л. Александрова

Редактор А. Маковская Техред М.Моргентал Корректор С. Черни

Заказ 3503 Тираж Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент". г, Ужгород, ул.Гагарина. 101 стью впервые явления брон иэльнои Об струкции появились в возраст» 1 года на фоне ОРВИ. Типичные приступы удушья стали возникать с 1,5 лет на фоне полного благополучия дома во время игры г. игрушками, часто в ночное время, Приступы возникают с предвестников в виде yp,à слизистой носа. чихания После проведения двух курсов специфическои гипосенсибили

По данным обследования выявлена сснсибилизация к следующим аллсргенэм: домашней пыли серии 257 и домашнеи пь1ли серии 261, что подтверждено кожными сн,1 рификационными пробами с данными эллергенами.

Пример 3. Больной Я., 13 лет. Диагноз: поллиноз, риноконьюнктивальный синдром. Из анамнеза известно, что у мальчика

По данным обследования выявлена сенсибилизация к аллергенам пыльцы мятлика, тимофеевки, овсяницы; не выявлена сенсибилизация к аллергену пыльцы березы. что подтверждено кожными скарификационными пробами с данными аллергенами.

Формула изобретения

Способ диагностики аллергии по изменению цитохимических характеристик с 9 лет в летние месяцы. начиная с июня, ; отмечаются риниты, коньюнктивиты. В лесу. за городом -- ухудшение; HB Одуванчик отмечался отек Квинке.

Проведено обследование согласно способу, Получены следующие результаты. исходная активность глюкозо-6-фосфл г-дс25 гидрогеназы — СЦК = 1,16, после стимуляции аллергенами пыльцы; !

СЦК % прироста активности

2,46 112

2,60 124

2,91 150,8

1,49 28,4 нейтрофилов крови в присутствии аллерге35 íà, отличающийся тем, что, с целью повышения точности и ускорения диагностики, определяют активность глюкозо-6фосфат-дегидрогенаэы до и после инкубации крови с аллергеном, и при увели10 чении активности фермента на 407; от исходного и более диагностируют аллергию к исследуемому аллергену.