Способ активации лейкоцитов крови человека

Способ активации лейкоцитов крови человека

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (я)5 G 01 N 33/48

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ. (21} 4709579/14 (22) 26.06,89 (46) 07.11,91. Бюл. М 41 (71) Читинский государственный медицинский институт (72) А.В,Краденов и А,В,Степанов (53) 616.07(088.8) (56) Макарова В.И. и др. Влияние стрептолиэина О на фукциональную активность лейкоцитов крови человека. — Лабораторное дело, 1986, hh 3, с,165-168, Изобретение относится к медицине, а именно к области гематологии и коагулологии.

Цель изобретения — повышение фибринолитической активности лейкоцитов человека.

Способ осуществляют следующим образом.

Иэ свежезаготовленной цейратной крови человека выделяют после центрифугирования лейковзвесь, которую помещают в питательную среду и добавляют активаторы плазминогена (стрептаза, урокинаэа, террлитин) в концентрации 50 — 500 ед/мл, инкубируют 20 — 30 мин при 37 С с добавлением конканавалина А. Лейкоциты отмывают от стимулятора центрифугированием при 1500 об/мин в течение 5 мин.

Активность лейкоцитов оценивают по их способности лизировать фибрин следующим методом: в лунки иммунологических планшетов помещают смесь 50 мкл 1 -ного раствора фибриногена с 50 мкл тромбина

„„5U „„1689855 А1 (54) СПОСОБ АКТИВАЦИИ ЛЕЙКОЦИТОВ

КРОВИ ЧЕЛОВЕКА (57) Изобретение относится к медицине, а именно к области гематологии и коагулологии. Цель изобретения — повышение фибринолитической активности лейкоцитов человека. Способ осуществляют путем инкубации лейкоцитов человека после выделения их из свежецитратной крови в присутствии активаторов плаэминогена в дозе 50 — 500 ед/мл в присутствии конканавалина А в концентрации 50 — 500 мкг/мл.

1 табл. активностью 50 ед/мл, после 30 мин в полученный гель добавляют взвесь исследуемых лейкоцитов. Инкубируют в течение 3 ч и в надосадочной жидкости определяют содержание продуктов деградации фибрина (ПДФ) иммунаферментным мгтодом. Повышение фибринолитической активности лейкоцитов оценивают по отношению ПДФ, полученных при действии активированных лейкоцитов к количеству ПДФ из интактных лейкоцитов.

В качестве стимуляторов используют активаторы плазминогена: урокиназа, стрептаза, террлитин в дозе 50 — 500 ед/мл.

Наиболее выраженный эффект оказывает. стрептаза. Начиная с дозировки 50 ед/мл все активаторы достоверно увеличивают фибринолитическую активность клеток, а дозировка более 500 ед/мл приводит к разрушению лейкоцитов и к снижению их общей фибринолитической активности.

Лейкоциты инкубируют в присутствии конканавалина А в микродоэах 50-200 мкг/мл.

1689855

Показано, что,фибринолитическая активность лейкоцитов при инкубации с активаторами плазминогена сохраняется в течение 30 мин, добавление конканавалина

А поддерживает ее до 75 мин, 5

Пример, Из свежей цитратной крови выделяют лейкоциты, помещают их в питательную среду 199, содержащую 50 ед/мл стрептаэы и 200 мкс/мл конканавалина А и инкубируют их, в течение 20 мин при 37 С. 10

Концентрация лейкоцитов 2х10 /мол. Затем клетки дважды отмывают от непоглощенного стимулятора и оценивают и фибринолитическу,о активность, которая равна 4,25 мг/мл, а у интактных — 1,92, Ин- 15 декс стимуляции равен 2,2.

Фибринолитическая активность интактных лейкоцитов равна 1,84+. 0,19 мгlмл.

Сравнительный анализ предлагаемого и известного способов активации лейкоци- 20 тов представлен в таблице, где P > — достоверность различий между стимулированными и интактными лейкоцитами, Pz — достоверность различий между стимулированными лейкоцитами по известному и предлагаемому способам, Иэ таблицы видно, что предлагаемый способ позволяет повысить фибринолитическую активность лейкоцитов, Формула изобретения

Способ активации лейкоцитов крови человека путем инкубации цитратной крови в присутствии стимулятора, о т л и ч а ю щ и йс я тем, что, с целью повышения фибринолитической активности лейкоцитов, в качестве стимулятора используют активаторы плазминогена в дозе 5(— 500 ед/мл в присутствии конканавалина А в концентрации 50200 мкг/мл.

Способ ор итиивность, мг/мл

ПДФ Р

Р2 Индекс стиму(ляции оп=192,М m, Составитель Н,Маркова

Техред M.Ìoðãåíòàë Корректор М.Шароши

Редактор. Е,Папп

Лака 3810 Тираж Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул,Гагаоина. 101