Способ определения изоферментов лактатдегидрогеназы в сыворотке крови

Способ определения изоферментов лактатдегидрогеназы в сыворотке крови

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

Изобретение относится к медицине и биохимии, в частности к биохимическим методам исследования крови. Цель изобретения - упрощение и ускорение способа - достигается за счет проведения фиксации и проявления изоферментов одновременно, что позволяет сократить отдельную стадию фиксации ферментов и проводить определение на 6-8 ч быстрее по сравнению с прототипом .

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

PЕСПУБЛИК (я)5 G 01 N 33/68

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР .

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4468438/14 (22) 01,08.88 (46) 23.12.91, Бюл. М 47 (71) Казахский научно-исследовательский .ветеринарный институт Восточного отделения ВДСХНИЛ (72) Л,Б. Кацова, В.С. Бочекалова (53) 615.475(088.8) (56) Коровкин Б.Ф. в кн, мВведение в клиническую биохимию", Л.: Медицина, 1969, с.

448-454.

Изобретение относится к медицине и биохимии, в частности к биохимическим методам исследования крови.

Цель изобретения — упрощение и ускорение способа, Способ осуществляется следующим образом, Для анализа берут 0,02-0,03 мл сыворотки животных, которые наносят на агаровые пластинки, После проведения электрофореза агаровые пластинки погружают в инкубационную смесь и помещают в термостат при 37 С на 6 — 8 ч, затем агаровые пластинки вынимают и споласкивают водой. На пластинках выявляются полосы, соответствующие количеству изоферментов лактатдегидрогеназы.

Способ иллюстрируется следующими примерами.

fl р и м е р 1. На агаровую пластинку наносят 0,02 мл сыворотки бычка. После электрофоретического разделения пластинку погружают в инкубационную смесь, приготовленную при смешивании 30 в.ч. 0,2 м фосфатного буфера, 2 в,ч. 1 м раствора лак-: тата натрия, 1 в.ч. 0,01 м хлористого магния, ЫЛ 1700477 А1 (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ИЗОФЕРМЕНТОВ ЛАКТАТДЕГИДРОГЕНАЗЫ В СЫВОРОТКЕ КРОВИ (57) Изобретение относится к медицине и биохимии, в частности к биохимическим методам исследования крови. Цель изобретения — упрощение и ускорение способа— достигается за счет проведения фиксации и проявления изоферментов одновременно, что позволяет сократить отдельную стадию фиксации ферментов и проводить определение на 6 — 8 ч быстрее по сравнению с прототипом.

0,25 в.ч. 0,1 -ного фенозинметосульфата, 6 в,ч, нитросинего тетразолия, 10 в.ч. 0,1%ного никотинамидаденин-динуклеотида, 3 в.ч. уксусной кислотьг, 0,5 в,ч, глицерина, 49,75 в.ч. воды.

После инкубации в течение 6 ч на пластике выявляется 5 изоферментов. !

Пример 2. На агаровую пластинку наносят 0,02 мл сыворотки лошади, После электрофореза пластинку погружают в ин- . V кубационную смесь, приготовленную при С) смешивании 40 в.ч. 0,2 м фосфатного буфе- Q ра. 4 в.ч. 1 м раствора лактата натрия, 2 в.ч.

0,01 м раствора хлористого магния, 0,5 в.ч.

0,1%-ного фенозинметасульфата, 6,5 в,ч.

0,1%-ного нитросинего тетразолия, 15 в.ч.

0,1%-ного никотинамидаденин-динуклеотида, 2 в.ч. 3%-ной уксусной кислоты, 1 в.ч. глицерина, 29 в.ч. воды.

После инкубации в течение 8 ч выявляется 5 изоферментов лактатдегидрогеназы.

Таким образом, способ позволяет про- водить определение изоферментов лактатдегидрогеназы на 6 — 8 ч быстрее.

1700477

Формула изобретения

Состави-ель С.Рыбалкин

Техред M.Ìîðãåíòàë Корректор А,Осауленко,Редактор Н., Рогулич

Заказ 2103 Тираж Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул.Гагарина, 101

Способ определения изоферментов лактатдегидрогеназы.в сыворотке крови путем проведения электрофорезз на агаровых пластинках с последующей фиксацией и проявлением изоферментов, о т л и ч а юшийся тем, что, с целью упрощения и ускорения способа, фиксацию и проявление проводят одновременно в среде, приготовленной путем смешивания 2-6 весовых части 1 м раствора лактата натрия, 1-3 в.ч.

0,01 м хлористого магния, 0,25 — 0,75 в.ч.

5 0,1 фенозинметосульфата, 10-20 в.ч. 0,1 никотинамид-аденин-динуклеотида, 6 — 9 в.ч.

0,1 нитросинего тетразолия, 1 — 3 в,ч. 37; уксусной кислоты, 30 — 50 в.ч. 0,2 м буфера, 50-30 в.ч. воды,