Способ определения свободнорадикального окисления липидов в лимфоцитах

Способ определения свободнорадикального окисления липидов в лимфоцитах

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (51)5 G 01 N 33/72

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4631622/14 (22) 04.01.89 (46) 30.12.91. Бюл. М 48 (71) Свердловский государственный медицинский институт (72) Л.И. Савельев, С,В. Цвиренко и Н.К.

Левчик (53) 612.015(088.8) (56) Стальная И.Д. Современные методы в биохимии. — М.: Медицина, 1977, с.63 — 64. (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ СВОБОДНОРАДИКАЛЬНОГО ОКИСЛЕНИЯ ЛИПИДОВ

B ЛИМФОЦИТАХ

Изобретение относится к биофизике и может быть использовано в биологии и медицине для исследования метаболизма липидов в лимфоцитах в эксперименте, в лабораторной диагностике и контроле течения заболеваний.

Цель изобретения — ускорение способа при одновременном повышении его чувствительности.

Способ осуществляют следующим образом.

В ячейку хемилюминометра вносят пробу исследуемого биоматериала, к которой добавляют раствор гемоглобина до конечной концентрации 10 — 10 М, Записывают исходный уровень свечения, затем вводят

6%-ный раствор Н202 и регистрируют вспышку свечения. Для оценки уровня сво- . боднорадикального окисления липидов (СРОЛ) измеряют время достижения максимума кривой хемилюминесценции. В от„„Ы3 „„1702319 А1 (57) Изобретение относится к биофизике и может быть использовано в биологии и медицине. Цель изобретения — ускорение способа при одновременном повышении его чувствительности. В суспензию лимфоцитов вводят гемоглобин в конечной концентрации 10 — 10 М, измеряют индицируемую перекисью водорода хемилюминесценцию и по времени достижения максимума свечения определяют уровень свободнорадикального окисления липидов. Изобретение позволяет повысить чувствительность способа в 5 раэ и сократить время исследования в 6 раз. 2 табл. дельных сериях экспериментов с использованием лимфоцитов красных полевок продемонстрирована прямая пропорциональная зависимость времени достижения максимума (Т1) от содержания диеновых коньюгатов (по прототипу).

Способ поясняется следующими примерами.

Пример 1. В суспенэию лимфоцитов периферической крови кролика, инкубирующихся в среде Хенкса (без фенолового красного) в течение 60 мин при 370, определяли активность СРОЛ при разных концентрациях гемоглобина.

Результаты представлены в табл.1.

Пример 2. В суспензии тимоцитов крыс, содержащихся в климатокамере при

0 С в течение 3 сут, измеряли индуцированную ХЛ, В качестве контроля использовали крыс, находившихся в обычных условиях вивария. Данные представлены в табл.2.

1702319

Таблица 1

Таблица 2

Составитель Н.Гуляева

Редактор А.Маковская Техред M,Ìîðãåíòàë Корректор О.Кундрик

Заказ 4541 . Тираж Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г, Ужгород, ул.Гагарина, 101

По сравнению с прототипом изобретение позволяет сократить время исследования не менее чем в 6 раз и уменьшить количество лимфоцитов в пробе в 5 раз.

Формула изобретения

Способ определения свободнорадикального окисления липидов в лимфоцитах, отличающийся тем, что, с целью ускорения способа при одновременном повышении чувствительности, в суспензию лимфоцитов вводят гемоглобин в конечной концентрации 10 9-10 М, измеряют инду5 цируемую перекисью водорода хемилюминесценцию и по времени достижения максимума свечения определяют уровень свободнорадикального окисления липидов.