Способ оценки перекисной резистентности эритроцитов

Способ оценки перекисной резистентности эритроцитов

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

Изобретение относится к биологии и медицине и может быть использовано для оценки состояния антиоксидантной системы организма. Цель изобретения - ускорение и упрощение способа. Способ осуществляют следующим образом. К 1 части капиллярной крови с антикоагулянтом добавляют 5 частей 1,5%-ного раствора перекиси водорода на физиологическом растворе. Смесь инкубируют 30 мин при комнатной температуре, затем добавляют 5 частей дистиллированной воды и центрифугируют 15 мин при 3000 об/мин. По найденной величине экстинкции вышедшего из разрушенных эритроцитов гемоглобина определяют процент гемолиза и при его значениях выше 12% диагностируют сниженную перекисную резистентность эритроцитов. Способ прост в осуществлении, не требует термостатирования и отмывания эритроцитов от плазмы, в результате чего сокращается время его выполнения.

СОЮЗ cCcЕтских

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (я)э G 01 N 33/50

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (2 1) 4726724/14 (22) 02.08.89 (46) 07.01.92. Бюл. М 1 (71) Научно-исследовательский институт онкологии и медицинской радиологии (72) Н,А.Григорович, А.С.Мавричев.

Г.Ю.Бычков и А.А.Лысенко (53) 615.475(088.8) (56) Покровский А.А. и др. К вопросу о перекисной реэистентности эритроцитов.—

"Вопросы питания". 1964, N. 6, с. 44-49. (54) СПОСОБ ОЦЕНКИ ПЕРЕКИСНОЙ РЕЗИСТЕНТНОСТИ ЭРИТРОЦИТОВ (57) Изобретение относится к биологии и медицине и может быть использовано для оценки состояния антиоксидантной системы организма. Цель изобретения — ускорение и упрощение способа. Способ

Изобретение относится к биологии и медицине и может быть использовано для оценки состояния антиоксидантной системы организма.

Целью изобретения является ускорение и упрощение способа.

Способ осуществляют следующим образом.

В центрифужную пробирку, содержащую 50 мкл антикоагулянта (оксалат 1,34 ного натрия), вносят 400 мкл взятой иэ пальца капиллярной крови. эритроциты осаждают путем центрифугирования образца при 1000 об/мин в течение 10 мин, после чего плазму осторожно отсасывает. Осадок эритроцитов взбалтывают легким потряхи,, Я 1704083 А1 осуществляют следующим образом. K 1 части капиллярной крови с антикоагулянтом добавляют 5 частей 1.5 7ь -ного раствора перекиси водорода на физиологическом растворе, Смесь инкубируют 30 мин при комнатной температуре. затем добавляют 5 частей дистиллированной воды и центрифугируют 15 мин при 3000 об/мин. По найденной величине экстинкции вышедшего из разрушенных эритроцитов гемоглобина определяют процент гемолиэа и при его значениях выше 127ь диагностируют сниженную перекисную реэистентность эритроцитов.

Способ прост в осуществлении, не требует термостатирования и отмывания эритроцитов от плазмы. в результате чего сокращается время его выполнения.

Ь ванием п робирки и автоматическим доэатором добавляют к взвеси эритроцитов в аутоплазме 2000 кмл 1,5 -ного раствора гипероксида водорода на физиологическом растворе, согретого предварительно до комнатной температуры. Содержимое каждой пробирки размешивают стеклянной палочкой и инкубируют при комнатной температуре в течение 30 мин. Затем в каждую пробирку автоматическим дозатором вносят по 2000 мкл дистиллированной воды, вновь перемешивают стеклянной палочкой содержимое каждой пробирки и тотчас ставят центрифугировать в течение 15 мин при скорости 3000 o6/мин. По окончании центрифугирования пробирки осторожно выни "04083

Формула изобретения

Способ оценки перекисной резистентности зритроцитов путем кзлориметрического определения вышедшего из клеток гемоглобина в условиях действия перекиси водорода, отличающийся тем, что, с целью ускорения и упрощения способа, к 1 части капиллярной крови с антикоагулянтом добавляют 5 частей 1,5 -ного раствора перекиси водорода на физиологическом растворе, инкубируют в течение 30 мин при комнатной температуре, создают гипоосмию давлением 5 частей дистиллированной воды. подвергают гипергравитации центрифугированием в течение 15 мин при 3000 об/мин и при доле экстинкции гемоглобина выше 12 g от общего его содержания диагностируют сниженную перекисную реэистентность эритроцитов.

Составитель А.Кашулина

Техред M.Mîðråíòàë Корректор С.шевкун

Редактор О.Хрипта

Заказ 60 Тираж Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва. iK-35. Раушская наб., 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент, г, Ужгород, ул.Гагарина, 101 мают, надосадочную жидкость фотометрируют против воды, используя фотоэлектроколориметр ФЭК-5, кюветы с длиной светового пути 3 мм. Используют зеленый светофильтр. 5

По найденной величине экстинкции вышедшего иэ разрушенных зритроцитов гемоглобина определяют процент гемолиэа, принимая за 100 гемолиэ эритроцитов, полученный из такого же объема крови от эдо- 10 ровых людей после добавления к нему 4 мл воды (инкубация осадка эритроцитов в дистиллированной воде 30 мин, центрифугирование при 3000 об/мин).

Специальными исследованиями уста- 15 новлено, что у здоровых людей при данных условиях определения величина гемолиэа колеблется от 4 до 12ф, от величины полного гемолиэа зритроцитов в таком же обьеме крови, вызванном добавлением к ним 4 мл 20 воды. При получении результатов выше127, диагносцируют сниженную переписную резйстентность мритроцитов.

Пример 1. Гр. А., 58 лет, практически здоров. Берут 400 мкл крови иэ пальца в 25 центрифужную пробирку, содержащую 50 мкл антикоагулянта. Эритроциты осаждают центрифугированием при 1000 об/мин в течение 10 мин. Осадок после удаления пазэмы взбалтывают и добавляют 2000 мкл 30

1,5ф)-ного раствора перекиси водорода в физиологическом растворе, согретого до комнатной температуры. Содержимое пробирки размешивают стеклянной палочкой и инкубируют при комнатной температуре в 35 течение 30 мин. Затем в пробирку вносят

2000 мкл дистиллированной воды, вновь перемешивают стеклянной палочкой и центрифугируют в течение 15 мин при

3000 об/мин, Надосадочную жидкость фо- 40 тсметрируют против воды, используя ФЭК5, кюветы с длиной светового пути 3 мм при зеленом светофильтре. Величину гемолиза рассчитывают по отношению к полному гемолиэу эритроцитов, содержащихся в таком же количестве взятой для исследования крови после добавления к ней 4000 мкл дистиллированной воды, Найденная величина составила 87,, что соответствует нормальному уровню.

Пример 2. Гр. Б.. 48 лет, жалуется на дискомфорт со стороны кишечника. Предлагаемым способом определена величина переписного гемолиэа, которая составила

52 . После коррегирующей терапии витаминными препаратами она снизилась до

22 („т,е. произошло частичное восстановление резистентности эритроцитарных мембран к действию перекиси водорода.

По сравнению с известным предлагаемый способ проще в осуществлении, не требует термостатирования и отмывания эритроцитов от плазмы, в результате чего сокращается время его выполнения.