Способ стабилизации донорской крови

Способ стабилизации донорской крови

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

Изобретение относится к медицине, касается гематологии. Целью изобретения является снижение активации тромбоцитов и лейкоцитов. Для этого определяют концентрацию фибронектина и функциональную активность тромбоцитов и гр^нулоцитов в цитратной крови, затем пропускают ее через сорбент сипикагель-желатин, который избирательно связывает фибронектин, и повторно определяют концентрацию фибро-, нектина и функциональную активность тромбоцитов и гранулоцитов в прошедшей через сорбент крови. Функциональная активноЬть тромбоцитов, прошедших через сорбент, снижается при этом в 3 раза по сравнению с исходными, а гранулоцитовв 15 раз. 1 табл.

СОЮЗ .СОВЕТСКИХ

; СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК

ГОСУДАРСТВЕН% И КОМИТЕТ

IlO ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР .

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Ф» и» т»

»иг

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛ ЪСТВУ (21) 4730046/14 (22) 18.08,89 (46) 30.01.92. Бюл. М 4 (71) Научно-исследовательский институт ги. гиемы труда и профессиональных заболеваний АМН СССР (72) Н.А.Федоров; И.Н.Овчарук и Г.И.Мамцева (53) 615.387(088.8) ° (56) Gastpar H. Metastasis prophylaxis by

platelet aggregation inhibitors. — Cancer

Campalgh, N 4. 1980, р.321-331. (54) СПОСОБ СТАБИЛИЗАЦИИ ДОНОРСКОЙ КРОВИ (57) Изобретение относится к медицине, касается гематологии. Целью изобретения явИзобретение относится к медицине, ка-. сается гематологии.

Цель изобретения — снижение активации тромбоцитов и лейкоцитов в цитратной донорской крови.

Способ осуществляют следующим обра зом.

В свежей цитратной крови в стерильных условиях подсчитывают исходное количество тромбоцитов и гранулоцитов с помощью счетной камеры Горяева и определяют содержание фибронектина турбидиметриче. ским или другими методами.

Затем кровь пропускают через колонку с силикагель-желатином, уравновешенным физиологическим раствором: на 1 объем сорбента 5 объемов крови. Первые. неокрашенные кровью порции; вытекающие из ко, Я2, 1708347 А1 (я)э А 61 К 35/14, G 01 N 33/48 ляется снижение активации тромбоцитов и лейкоцитов. Для этого определяют концентрацию фибронектина и функциональную активность тромбоцитов и гранулоцитов в цитратной крови, затем пропускают ее через сорбент силикагель-желатин, который избирательно связывает фибронектин, и повторно определяют концентрацию фибронектина и функциональную активность тромбоцитов и гранулоцитов в прошедшей через сорбент крови. Функциональная активность тромбоцитов, прошедших через сорбент, снижается при этом в 3 раза по сравнению с исходными, а гранулоцитов — в

15 раэ. 1 табл. лонки, отбрасывают. После того, как верх- О) няя поверхность крови сравняется с верх- Ор ней поверхностью сорбента. в колонку подают стерильный, физиологический рас- р твор в количестве. достаточном для вытеснения крови из колонки. В прошедшей через колонку крови снова определяют копи IBcT»o фибронактина. тромба цито» и гранулоцитов. Образцы такой крови, а прошедшей через колонку с силикагель-желатином, теряют около 70 биологически активного фибронектина. Полного удаления фибронектина из донорской крови не происходит в силу того, что всегда присутствующие предактивированные тромбоциты и гранулоциты адгезируются на сорбенте и подвергаются разрушению, а образующиеся комплексы фибронектина с ДНК, гепаран-.

1708347

Кол- во полученного

Уровень актива- Уровень активации тромбоц»- ции транулоцитов . тов

Концентрация фибрбнектина, мт/

Количество исследуеКонцентрация гранулоцитов

Концентрация тромбоцитов фиброна. МГ

После колонПосле До коон- лонки

До коПосле колонIN

До колонки и о и крови, После колонки

До колонки

После колонки

До колонки зв . 4,1

4.0

9

1.г -1 /л г.1 ф

10 /л

55 то гв .10 /л

3,4 1Ов/л.

3,1 -1O /ë гО 10 /л гб 1Ов/л гг 1о /»

ЗЕ 10 /л

41 10в/л

39 1О /л

15. го

Составитель H.Ìàðêîâà

Техред М;Моргентал Корректор Н, Ревская

Редакто Т.Лазаренко

Заказ 378 Тираж Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", r. Ужгород, ул.Гагарина, 101 сульфатом и другими компонентами клеток не удерживаются сорбентом.

Для определения функциональной активности тромбоцитов и гранулоцитов из крови до и после фильтрации через колонку с силикагель-желатином их выделяют центрифугированием в градиенте плотности фиколла. Функциональную активность тромбоцитов оценивают общепринятым методом измерения агрегации по светопропусканию после добавления АДФ или арахидоновой кислоты. Уровень активации гранулоцитов определяют по люминол-за висимой хемилюминесценции в ответ на действие зимозана. Тромбоциты, прошедшие через силикагель-желатин, имеют снижение активации в 3 раза по сравнению с исходными, а гранулоциты - в 15 раз.

Результаты исследования представлены в таблице.

Цельную цитратную коовь с концентрацией тромбоцитов 40 10 /л, гранулоцитов

3,2 10 /л: и фибронектина 360 мг/л в объ-. еме 15 мл наносят на колонку размером

1,2х9.0 см, содержащую 3 мл силикагель-желатина. После смешивания крови с сорбентом подают стерильный физиологический раствор и вытесняют оставшуюся в нем часть крови, В прошедшей через колонку крови (объем 25 мл) концентрация тромбоцитов была 29 10 /л. гранулоцитов 1,5х

4 х10 /л, фибронектина 70 мг/; Уровень акти9 вации тромбоцитов крови, прошедшей через силикагель-желатин, составил 40 по отношению к 100 исходной крови, Уро5 вень активации гранулоцитов после колонки 7, до-100ф,, Элюцию фибронектина с колонки осуществляют 0,05 М цитратным буфером, рН

5,5 при 37 С. Концентрация фибронектина

10 в крови до фильтрации через силикагель-желатин составляет 360 мг/л, после фильтрации — 70 мг/л. Количество фибронектина, снятого с сорбента, составляет 4 мг, что со- . ответствует 74 по отношению к содержа15 нию его в исходной порции крови.

Предлагаемый способ позволяет снизить спонтанную активацию тромбоцитов и гранулоцитов в стабилизированной цитратной донорской крови путем избирательного

20 удаления фибронектина из нее, что может быть использовано при переливании крови, экстракорпоральном кровообращении и гемаферезе.

Формула изобретения

25 Способ стабилизации донорской крови путем ее заготовки на цитратных гемоконсервантах,отличающийся тем,что,с целью снижения активации тромбоцитов и гранулоцитов, ее дополнительно фильтруют

30 через сорбент желатин-силикагель при соотношении сорбент:кровь 1:5.