Способ определения аутоиммунного процесса

Способ определения аутоиммунного процесса

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

Изобретение относится медицине и может найти применение в клинике нервныхболезней, паталогоанатомической и судебно-медицинской практике. Цель изобретения - прижизненное определение аутоиммунной демиелинизации. Поставлен-- ная цель достигается тем, что у больного берут бмоптат кожи, готовят из него два гистологических среза, один из которых докрашивают Суданом черным, второй импрегнируют серебром, докрашивают общегистологическими красителями, а по распаду : гиелиновых волокон, сопровождающемуся лимфо-моноплазмацитарными и/или лимфо-моноцитарнымй инфильтратами, .устанавливают демиелинизирующий процесс аутоиммунной природы.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК ((9) () 1) (s()s 6 01 N 33/53

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

tlPVI ГKHT CCCP

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4697357/14 (22) 14.04.89 (46) 30.01.92. Бюл. М 4 (71) Научно-исследовательский институт экспериментальной медицины AMH СССР (72) Е.И. Чумасов, M.Ã. Хижняк, К.M. Светикова и Ф.А. Гурчин (53) 615,475 (088.8) (56) Меркулов Г.А, Метод определения демиелинизации по Марки. Курс паточистологической техники, Медгиз, 1956, с. 160 — 163, (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АУТОМММУННОГО ПРОЦЕССА (57) Изобретение относится медицине и может найти применение в клинике нервных

Изобретение относится к медицине и может найти применение в клинике нервных болезней, паталогоанатомической и судебно-медицинской практике.

Цель изобретения — прижизненное определение аутоиммунной демиелиниэации.

Поставленная цель достигается тем, что у больного берут биоптат кожи, готовят из него два гистологических среза, один из которых окрашивают суданом черным, второй импрегнируют серебром, докрашивают общегистологическими красителями и по распаду миелиновых волокон, сопровождающемуся лимфо-моноплазмацитарными и/или лимфо-моноцитарными инфильтратами, устанавливают демиелиниэирующий процесс аутоиммунной природы.

Пример 1, Больная Р., 31 год, история болезни М 226. Клинический диа-íoç: :рассеянный склероз, цереброспинальная форболезней, паталогоанатомической и судебно-медицинской практике. Цель изобретения — прижизненное определение аутоиммунной демиелинизации, Поставлен-. ная цель достигается тем, что у больного берут биоптат кожи, готовят из него два гистологических среза, один из которых докрашивают суданом черным, второй импрегнируют серебром, докрашивают общегистологическими красителями, а по распаду; .иелиновых волокон, сопровождающемуся лимфо-моноплазмацитарными и/или лимфо-моноцитарными инфильтратами,,устанавливают демиелиниэирующий процесс аутоиммунной природы. ма. У больной берут биоптат кожи плеча размером 5 ь10 мм, расправляют и наклеивают на полоску чистой плотной бумаги, фиксируют в течение 1 — 3 сут в 10 -ном растворе нейтрального формалина при рН

7,3 и на замораживающем микротоме готовят 2 среза толщиной 20-60 мкм, которые переносят на предметные стекла, смазанные смесью яичного белка с глицерином, Один из срезов помещают в спиртовой раствор судана черного (300 мг красителя в 100 мл 70 спирта) на 15 мин, дифференцируют в 70 спирте и заключают в лицерин-желатину. Второй срез импрегнируют азотно-кислым серебром по методике Бильшовского-Грос и докрашивают гематоксилин-зоэином.

На первом срезе (судан черный) в толстых пучках и приводящих рецепторных волокнах кожи наблюдается распад миели1709220 новых оболочек в виде глыбок, шаров и зерен, На втором срезе (импрегнация серебром) обнаруживаются также деструктивные изменения аксонов — их фрагментация, зернистый распад, резкое истончение с образованием варикоэных расширений. После докраски этих срезов гематоксилин-эозином (Г-Э) среди распадающихся нервных волокон по ходу нервных пучков, а также вокруг кровеносных сосудов

Выявляются воспалительные инфильтраты, состоящие из лимфоцитов, моноцитов. и плаэматических клеток, Все обнаруженные изменения подтверждают наличие демиелинизирующего аутоиммунного процесса, а именно распад миелиновых оболочек„выявляемый путем окраски суданом черным, свидетельствует о демиелиниэации, а деструктивные изменения аксонов и характерные воспалительные инфильтраты на препаратах, импрегнированных серебром, говорят о тяжелой степени повреждения нервных аппаратов и подтверждают клинический диагноз аутоиммунного демиелинизирующего заболевания.

Пример 2. Больной У., 39 лет, история болезни М 221. Клинический диагноз: подозрение на рассеянный склероз.

Взят биоптат кожи голени, из которого готовили два среза и окрашивали как в примере 1, На препаратах, импрегнироьанных серебром, выявляются лишь редкие с неровными контурами пучки аксонов, лишенные миелина и сопровождающиеся лимфомоноцитарными инфильтратами. По ходу крупных и мелких сосудов в дерме встречаются также очаги лимфо-моноцитарных периваскулярных инфильтратов. При окраске суданом черным во всех частях дермы в нервных пучках миелиновые оболочки не выявляются, Найденные морфологические изменения позволяют диагносцировать аутоиммунный демиелинизирующий процесс и подтвердить предполагаемый диагноз.

Пример 3. Больная С., 22 года, история болезни ¹ 1004, Клинический диагноз: подозрение на рассеянный склероз.

Берут биоптат кожи плеча, из которого готовили срезы и окрашивали как в примсре

1. На препаратах, импрегнированных серебром с докраской Г-З, выявляются тонкие пучки нервных волокон с признаками фрагментации аксонов. Некоторая часть аксонов сильно истончена с варикозными расширениями по своему ходу, При окраске срезов суданом черным миелиновые оболочки в этих пучках не выявляются, в части пучков видна многочисленная суданофильная зернистость (остатки продуктов распада миелина). На импрегнированных и

3Q чг

55 докрашенных Г-Э препаратах по ходу нервных пучков и сосудов дермы обнаруживаются лимфо-плазмоцитарные инфильтраты.

Полученные данные однозначно свидетельствуют об аутоиммунном демиелинизирующем процессе и подтверждают диагноз.

Пример 4. Больной Г., возраст 43 года, история болезни hh 626, Клинический диагноз полиневрит, Взят биоптат кожи голени, из которого готовили срезы и окрашивали как в примере 1. На импрегнированных серебром и докрашенных à — Э препаратах кожи встречаются лишь немногочисленные пучки с редкими тонкими аксонами. В остальных пучках акосоны не выявляются и среди шванновских клеток видны продукты зернистого распада. Рецепторные аппараты волосяных фолликулов находятся в состоянии деструктивных изменений. Только в некоторых нервных пучках на препаратах, окрашенных суданом черным. выявляются измененные с зазубренными краями короткие сегменты сохранившихся миелиновых оболочек, рядом с ними находится большое число суданофильных гранул, что свидетельствует о продолжающемся распаде миелина. На гистологических препаратах, импрегнированных серебром и докрашенных à — Э, по ходу нервных пучков среди продуктов распада рецепторных окончаний, а также вокруг сосудов обнаруживаются лимфо-моно- и плэзмоцитарные инфильтраты.

Полученные данные однозначно свидетельствуют о тяжелом, хроническом аутоиммунном демиелиниэирующем процессе.

Пример 5. Больная П., 52 лет, история болезни ¹ 229. Клинический диагноз: подозрение на рассеянный склероз. Брали биоптат кожи спины, из которого готовили срезы и окрашивали как в примере 1. На препарате, окрашенном суданом черным, непосредственно под зпидермисом и в глубоких слоях дермы встречаются многочисленные пучки интактных миелиновых волокон. На препаратах, импрегнированных серебром и докрашенHûх Г-Э, хорошо выявляются мякотные и безмякотные аксоны и рецепторные аппараты волосяных фоликулов. Важной особенностью является отсутствие каких-либо воспалительных инфильтратов. Полученные данные позволяют исключить у больного диагноз демиелинизирующего заболевания, что подтвердилось в дальнейшем уточненным диагнозом — дискогенный радикулит, Пример 6. Больная К., 34 лет, история болезни М 228. Клинический диагноз; боковой амиотрофический склероз.

Брали биоптат кожи спины, из которого готовили срезы и окрашивали как в примере

1709220

Формула изобретения

Составитель А. Древаль

Техред M.Моргентал Корректор Н. Ревская

Редактор Ю. Середа

Заказ 422 Тираж Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-З5, Раушская наб., 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул.Гагарина, 101

1. На препарате, окрашенном суданом черным, выявлялись лишь отдельные фрагменты миелиновых оболочек, в некоторых пучках они вообще отсутствовали. На препаратах, импрегнированных серебром и докрашенных Г-Э, встречались пучки истонченных, штопорообразно закрученных аксонов. Внутри пучков по ходу аксонов нередко были видны аргентофильные зерна и глыбки дегенерирующих волокон, Однако воспалительные инфильтраты во всех слоях биоптата кожи отсутствовали. Поскольку как известно в период ремиссии имеются в разной степени выраженности остатки воспалительных инфильтратов, то обнаруженные изменения в нервном аппарате кожи позволяют исключить аутоиммунную природу заболевания. Эти изменения свидетельствуют о хроническом дистрофическом процессе, который может быть связан с повреждением самих нейронов, локализующихся в спинномоэговых ганглиях, иннервирующих соответствующие участки кожи, либо сильным ущемлением спинномозговых корешков, Таким образом, предлагаемый морфологический способ позволяет проводить прижизненную диагностику аутоиммунного демиелинизирующего процесса, Кроме mro, в отличие от известных методов, он обеспечивает возможность определения не

5 только периаксональной демиелинизации, но и более тяжелую форму деструктивных изменений нервного аппарата кожи, а именно уоллеровскую дегенерацию нервных волокон. Все это в совокупности с оценкой

10 характера воспалительных инфильтратов позволяет идентифицировать не только стадию, степень, но и высоту заболевания, 15

Способ определения аутоиммунного процесса в организме человека путем выявления демиелинизации нервной ткани, о тл и ч а ю шийся тем, что, с целью прижиз20 ненного определения аутоиммунной демиелинизации, исследуют биоптат кожи пациента, и в случае обнаружения демиелинизации нервных волокон, сопровождающейся лимфомоноплазмацитарными и/или

25 лимфо-моноцитарными инфильтратами, устанавливают демиелиниэирующий процесс аутоиммунной природы.