Способ моделирования эпилептического статуса

Способ моделирования эпилептического статуса

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

Изобретение относится к области экспериментальной медицины и может применяться при моделировании эпилептического статуса. Цель изобретения - повышение воспроизводимости и многократных генерализованных клонико-технических судорог. Эта цель достигается путем билатерального введения в хвостатые ядракрыс, подвергнутых пикротоксиновому киндлингу (17-25 внутрибрюшинных введений пикротоксинг в дозе 1.0-1.3 мг/кг)скополамина в количестве 5-10 мкг с последующим (через 3-5 мин) внутрибрюшинным введением пикротоксина в дозе 1.0-1.3 мг/кг. Повторные введения пикротоксина приводят к возникновению у животных судорожных проявлений возрастающей интенсивности до развития однократных генерализованных клонико-тонических припадков. Микроинъекция в хвостатые ядра крыс скополамина за 3-5 мин до очередной инъекции пиротоксина приводит к развитию у крыс клонико-тонических судорожных припадков с падением на бок. котооые повторяются по 10-15 раз (в среднем 13.8±1.2 раза). Один из припадков заканчивается развитием тонической экстензии задних конечностей и гибелью животных, летальность в условиях описываемого способа составляет 100%.ч>&^^

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (я)э G 09 В 23/28

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

K АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4682612/14 (22) 18.04.89 (46) 30.01.92. Бюл. ¹ 4 (71) Одесский медицинский институт им.

Н.И.Пирогова (72) А.А.Шандра, Л,С.Годлевский, А.М,Мазарати (ЯЦ), Амит.Бандиопадхай и Панкадж. Шарма (lN) (53) 615.475(088.8) (56) n/с Jutyre O.С. Kindling 3, Ю.Raven

Press, 1986. р.249-262. (54) СПОСОБ МОДЕЛИРОВАНИЯ ЭПИЛЕПТИЧЕСКОГОО СТАТУСА (57) Изобретение относится к области экспериментальной медицины и может применяться при моделировании эпилептического статуса. Цел ь изобретения — повышение воспроизводимости и многократных генерализованных клонико-технических судорог. Эта цель достигается путем билатерального введения в хвостатые ядра

Изобретение относится к экспериментальной медицине и может быть использовано для изучения патофизиологических механизмов эпилепсии, в частности эпилептического статуса, разработки методов его профилактики и купирования, а также испытания новых фармакологических препаратов.

Целью изобретения является повышение воспроизводимости способа и многократных генерализованных клонико-тонических судорог, Способ осуществляют следующим образом.

Крысам ежедневно однократно внутрибрюшинно вводят пикротоксин в дозе 1,0(и> ъЖцц 1 7093SOA 1 крыс, подвергнутых пикротоксиновому киндлингу (17-25 внутрибрюшинных введений пикротоксина в дозе 1,0 — 1,3 мг/кг) скополамина в количестве 5-10 мкг с последующим (через 3-5 мин) внутрибрюшинным введением пикротоксина в,дозе 1,0-1,3 мг/кг. Повторные введения пикротоксина приводят к возникновению у животных судорожных проявлений возрастающей интенсивности до развития однокоатных генерализованных клонико-тонических припадков. Микроиньекция в хвостатые ядра крыс скополамина за 3-5 мин до очередной инъекции пиротоксина приводит к развитию у крыс клонико-тонических судорожных припадков с падением на бок, которые повторяются по 10-15 раз(в среднем 13,8+1,2 раза). ф

Один иэ припадков заканчивается развитием тонической экстензии задних конечностей и гибелью животных, летальность в условиях описываемого способа составляет

100%.

1,3 мг/кг в течение 17 — 25 дней до получения С у 100% животных генерализованных клони- ЧО ко-тонических припадков. Затем под гексе- (Д наловым наркозом (100 мг/кг) животных Q() фиксируют в стереотаксическом аппарате и по координатам атласа (AP = 0,2, 1 =3,0, Н =

-4,5) билатерально имплантируют направляющие канюли в хвостовые ядра. Для регистрации электрической активности структур . головного мозга вживляют монополярные константановые электроды в гиппокамп (AP - -2,8, 1 - 1,5, Н = 3.5), хвостатое ядро, сенсомоторную кору. Индифферентный электрод крепят в носовых костях. Через

10-15 дней после операций в условиях свободного поведения животных через прово1709380

Через 24 ч после 19-го введения пикра- 40 дящие кэнюли при помощи микроиньектора вводят 5-10 мкг скополамина в 0,5 — 1,0 мкл

0,9;/ íoãî раствора NaC1 в каждое хвостатое ядоо, Через 3-5 мин после микроиньекции внутрибрюшинно вводят пикротоксин в дозе 1,0-1,3 мг/кг. Электроды присоединяют к разъемам электраэнцефэлографа. Через 15-25 мин после введения наблюдают развитие повторных клонико-тонических припадков, которые развиваются по 10-15 рэз и заканчиваются летально у 100 живатн ых.

Пример, Крысе-самке линии Вистэр массой 250 г производят внутрибрюшинное введение пикратаксина в дозе 1,3 мг/кг.

Наблюдение в течение 60 мин не выявляет у животного поведенческих и ЭЭГ-изменений. В дальнейшем подобные введения пикротоксина производят ежедневно однократно внутрибрюшинно.. После 4-й иньекции препарата у крысы отмечается появление миаклонических вздрагиваний IoлоВы и отдельных мышц туловища. После

7-й иньекци л миокланические вздрагивания переходят в повторные клонические судорсги всего туловища и/или передних кане .настей. Через 19 мин после 17-й иньекции пикротаксинэ у живатнага развиваетG>1 генерализаванный кланико-тонический припадок с падением на GGK постприступ ай депрессией и вегетативными расстройствам „8 последующем генерализованные судорожные припадки наблюдаются у живатнага после каждого введения пикратаксина. В процессе осуществления киндлинга после каждого введения пикротоксина у животного развивались однократные генерализаванные клоника-танические судороги, токсина крысу пад гексеналовым наркозом (100 мг/кг) фиксируют в стереотаксическом аппарате и по координатам атласа (5) имплантиру от проводящие канюли в хвостовые ядра по координатам AP = 0,2, 1 =- 3,0, Р =

4,5. Для регистрации электрической активности структур головного мозга в хвостатые ядра, а также в гиппокамп (АР =-2,8, 1 =-1,5, H — — 3.5) и сенсомотарную кору вживляют манопалярные константановые электроды.

Индифферентный электрод фиксируют в носовых костях. Через 10 дней пЬсле операции крысе в условиях свободного поведения вводят при помощи микроинъектара в хвосговые ядра скополамин s дозе 5,0 мкг и ч:es 5 мин инутрибрюшенно вводят пикрото ..ин в дозе 1,3 мг/кг. Электроды животнога присоединяют к разъему электроэнцефалографэ. Через 7 мин после инъекции у крысы возникают судорожные

25 30

35 вздрагивания отдельных мышц туловища, которые переходят через 2 мин в повторные клонические судорога всего туловища и/или передних конечностей. Кланические судороги через 2 мин после возникновения переходят в генерализованные клонико-тонические припадки с падением на бок, постприступнай депрессией и вегетативными расстройствами. Во время припадков в ЗЭГ регистрируются частые (7 — 10 в 1 c) пиковые разряды, синхронизированные во всех структурах, амплитуда которых максимально выражена в гиппокампе, где она составляет 600-700 мкВ. Судорожные припадки развиваются у животного повторна 15 раз с интервалами 3 — 5 мин. Длительность первого судорожного припадка составляла 50 с. 15-го — 120 с. В конце 15-го кланико-танического судорожного приступа у крысы развицается тоническая экстензия задних конечностей, остановка дыхания и гибель.

Таким образам, у животного воспроизведена модель эпилептического статчса.в виде многократных генерализованных судорожных припадков, заканчивающихся летальным исходом.

Данный способ показывает важное значение, которое имеет в патогенезе эпилептического статуса состояние повышенной судорожной готовности с одной -стороны, как это имеет место при киндлинге, и нарушение тормозного контроля со стороны хвостатого ядра, в частности снижение в нем активности халинергическай нейромедиаторной системы, воспроизводимое локальной микроиньекцией скопаламина.

Разработанная модель позволяет изучать новые эффективные методы профилактики и купиравания эпилептического статуса, что является актуальной проблемой клинической эпилепталогии.

Высокая васпроизводимасть способа, простота и доступность его осуществления способствуют eI o широкому распространению в лабораториях, изучающих механизмы деятельности мозга в условиях патологии и занимающихся разработкой тепарии нервных болезней, Формула изобретения

Способ моделирования эпилептического статуса путем введения фармакологических препаратов экспериментальному животному, отличающийся тем, что, с целью повышения воспроизводимости способа и многократных генерализованных клонико-тонических судорог, производят

17-25 ежедневных однократных внутрибрюшинных введений пикротоксина в дозе

1709380

Составитель А. Лычковэ

Редактор H. Швыдкая Техред М.Моргентал Корректор Э. Лончакова

Заказ 429 Тираж Подписное

8НИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб;, 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул.Гагарина, 101

1,0-1,3 мг/кг и затем однократно в хвостатые ядра билатерально вводят 5-10 мкг скополамина и через 3-5 мин внутрибрюшинно вводят пикротоксин в дозе 1,0-.1,3 мг/кг.