Способ получения производных птеридина

Способ получения производных птеридина

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

Изобретение касается гетероциклических веществ, в частности получения производных птеридина общей фор-лы (I) где R и Яз - замещенная в положении 2 или NRiRiR, -ГСНЛ,-® . -«э L4 ГМ в положениях 2 и 6 метилом морфолиногруппа; NRi Ra - N-этилэтаноламино-, Nэтил-изопропаноламино- , этанол-изопропаноламино-; 1 - 2-окси-2-метил-п-пропил - этаноламиногруппа; R4 - Н или СНз; п О или 1, обладающих способностью сенсибилизации опухолей и имеющих первичную или вторичную резистентность к химиотерапевтическим средствам. Цель - создание новых активных веществ указанного класса. Синтез ведут реакцией соединений ф-л (II) и (III) ) NR,R2R% NJy(CH2) zVvTz« III) НХ, где указано выше; один из Z или Zi - нуклеофильная заменяемая группа, а другой - значения для R или RS или также нуклеофильнозаменяемая группа; X R или , с последующим выделением целевого продукта . Новые вещества обладают сенсибилизирующим действием на устойчивые к адриамицину саркомные клетки и являются малотоксичными соединениями. 1 табл.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК

ГОСУДАРСТОЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К ПАТЕНТУ

Е li Р2

N " .(СН2)л-а А,А

R 1ч .з (21) 4742036/04 (22) 29.09,89 (31) P 3833393.7 (32) 01.10.88 (33) 0Е (46) 15.03.92. Бюл. Я 10 (71) Др.Карл Тома ГмбХ (DE) (72) Армин Хекель, Ерг Лебзанфт, Уве Бамбергер (DE) и Авнер Раму (IL) (53) 547,859.1 (088.8) (56) EP N. 0185259, кл. С 07 0 475/08,А 61 К 31/485, 1986. (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПРОИЗВОДНЫХ ПТЕРИДИКА (57) Изобретение касается гетероциклических веществ, в частности получения производных птеридина общей фор-лы (1) где R u йз — замещенная в положении 2 или

NRiRi Rq

pe (с н 21п.( и нн "з в положениях 2 и 6 метилом морфолиногруппа; NR1 Rz — N-этилэтаноламино-, NИзобретение относится к способу получения новых азотсодержащих гетероциклических соединений, имеющих ценные фармакологические свойства, в частности к способу получения производных птеридина общей формулы где R и Йз — замещенная в положении 2 или в положениях 2 и 6 метилом морфолиногруппа; (19> Я (II> 1 / и .049 1 А3 (я)5 С 07 0 475/08 // A 61 К 31/495 этил-изоп ропаноламино-, этанол-изопропаноламино-; И-f2-окси-2-метил-и-пропил)этаноламиногруппа; Rn — Н или СНЗ; и 0 или 1, обладающих способностью сенсибилизации опухолей и имеющих первичную или вторичную резистентность к химиотерапевтическим средствам. Цель — создание новых активных веществ указанного класса. Синтез ведут реакцией соединений ф-л (11) и (111) II) чй,й2 R :, 1СН2)„-© Ш) НХ, где Rl — Rq указано выше; один из Z или Zt— нуклеофильная заменяемая группа, а другой — значения для R или Кз или также нуклеофильнозаменяемая rpynna; Х = R или Вз, с последующим выделением целевого продукта. Новые вещества обладают сенсибилизирующим действием на устойчивые к адриамицину саркомные клетки и являются малотоксичными соединениями. 1 табл.

R> и Яг — вместе с находящимся между ними атомом азота образуют N-этил-этаноламино, N-атил-изопропаноламино, этанолизоп ропанол-амино,N-(2-окси-2-метил-н-п ропил)-этаноламино;

R — атом водорода или метил; и =Оили 1, которые могут находить применение в качестве средства для сенсибилизации опухолей, отличающихся первичной или вторичной резистентностью к химиотерапевтическим средствам.

Цель изобретения — поиск способа получения новых соединений в ряду производных птеридина, обладающих сенсибилизирую1720491 щим действием на устойчивые к адриамицину саркомные клетки.

Предлагаемый способ заключается в том, что соединение общей формулы

Rt Р2 (сн2)ь Щ

10 где R<, й2, R4 и л имеютуказанные значения, один из радикалов Z или Z> означает нуклеофильно заменяемую группу, такую как атом галогена, например атом хлора или брома, а другой радикал 2 или Z> имеет 15 указанные для R или Яз значения, или означает нуклеофильно заменяемую группу, такую как атом галогена, например атом хлора ипи брома, подвергают взаимодействию с соединением общей формулы 20

H — Х, (и!) где Х имеет указанные значения радикала

R Или R3.

Реакцию целесообразно осуществлять в среде растворителя, такого как тетрагид- 25 рофуран, диоксан, бензол, толуол, диметилсульфоксид или простой диметилгликолевый эфир, при 0-150 С, предпочтительно между комнатной температурой и температурой кипения используемого растворителя или в 30 расплаве. При этом можно использовать акцептор кислоты, например карбонат натрия, триэтиламин или пиридин.

Исходные соединения общих формул (И) и (1И) известны или могут быть получены 35 известными методами.

Пример 1. 4-(й-(2-Окси-2-метил-н-и ропил)-эта нолами но)-2,7-бис-2,6-диметил-морфолино)-б-фенил-птеридин. а) 2,7-дихлор-4-(И-(2-окси-2-метил-п- 40 пролил)-этаноламино)-6-фенил-птеридин.

15,5 r (0,005 моль) 2,4,7-трихлор-6-фенил-птеридина растворяют в 100 мп ацетона и затем добавляют 13,3 г (0,1 моль)

N-{2-окси-2-метил-н-пропил)-этаноламина, 45

Перемешивают в течение 20 мин при комнатной температуре и к образовавшейся суспензии прибавляют 200 мл воды. Выделившийся продукт отсасывают, промывают водой и кристаллизуют из метанола — воды 50 в соответствии 95;5.

Выход 19,9 г (97$ от теоритеческого), точка плавления 145-1470С. б) 4-(й-{2-окси-2-метил-н-пропил)-этан оламино)-2,7-бис-(2,6-диметил-морфолин» 55 . о)-6-фенил-птеридин.

2,0 г (0,005 моль) 2,7-дихлор-4-(й-(2-окси-2-метил-и-пропил)-эта ноламино1-6-феиил-птеридина растворяют в 20 мл диоксана и вместе с 3,5 r (0,08 моль) 2,6-диметилморфолина нагревают с обратным холодильником н ечение 30 мин. Затем раствор вливают в воду, выделившийся осадок отсасывают, промывают водой и перекристаллизовывают иэ этилового эфира уксусной кислоты.

Выход 2,4 г (84 от теоретического), точка плавления 191 — 194 С.

Пример 2. 4-(й-Этил-этаноламино)2,7-бис-(2,6-диметил-морфолино)-6-фенилптеридин получают из 4-(й-этил-этанопамино)-2,7-дихлор-б-фенил-птеридина и 2,6-диметил-морфолина аналогично примеру 1.

Выход 81 от теоретического, точка плавления 128 — 138 С (этанол).

Пример 3, 4-(Этанол-изопропаноламино)-2,7-бис-2,6-димет ил-ма р ф о л и но)-6фенил-птеридин получают из 4-(этанол-изопропаноламино)-2,7-дихлор-б-фенил-птеридина и 2,6-диметил-морфолина аналогично примеру 1.

Выход 60 от теоретического, точка плавления 192-193 С (метанол — вода в соотношении 4:1), Пример 4. 4-(й-(2-Окси-2-метил-н-пропил)-этаноламино)-2,7-бис-(2-метил-морфолино)-6-фенил-птеридин получают из 4-(й(2-окси-2-метил-и-пропил-этан оламино)-2,7дихлор-6-фенил-птеридина и 2-метил-морфолина аналогично примеру 1, Выход 74 от теооетического, точка плавления 143 — 147 С (этиловый эфир уксусной кислоты — петролейный эфир).

Tl р и м е р 5. 4-(Этанол-изопропаноламино)-2,7-бис-(2-метил-морфолино)-б-бензил-птеридин получают из 4-(этанол-изопропанола ми но)-2,7-ди хлор-6-бе н зилптеридина и 2-метил-морфолина аналогично примеру 1.

Выход 55 от теоретического, точка плавления 100 — 105 С.

Пример 6. 4-(Этанол-изопропанолами н о)-2,7-бис-(2-метил-морф оп и но)-6-(отолил)-птеридин получают из 4-(этанол-изопропаноламино)-2,7-дихлор-6-(о-топил)птеридина и 2-метил-морфолина аналогично примеру 1.

Выход 85% от теоретического, точка плавления. 105-110 С (переосаждение из

0,1 н. соляной кислоты).

Пример 7. 4-(й-(2-Окси-2-метил-н-пропил)-этанол амико)-2,7-бис-(цис-2,6-диметилморфолино)-6-фенил-птеридин получают из

-f N-(2-окси-2-метил-н-пропил)-эта ноламино)-2,7-дихлор-6-фенил-птеридина и цис2,6-диметил-морфолина аналогично примеру 1

Выход 60% от теоретического, точка плавления 206-209 С (иэопропанол).

1720491

10

45 дина общей формулы

Ri Яг

R NXt4AR3

Применение соединений примеров 1 — 7 в качестве средства для сенсибилизации опухолей с первичной или вторичной устойчивостью к химиотерапевтическим средствам.

В качестве сравнения применялся 7бензиламино-4-(N-метил-2 -оксиэтиламино)2-пиперазино-птеридин.

Действия указанных соединений исследовались на примере резистентных клеток следующим образом.

Пролиферирующие, резистентные к адриамицину саркомные клетки $180, выделившиеся из мышей, культивировались в течение 6 дней в присутствии разных концентраций испытуемых веществ. Индикатором цитотоксичного или цитостатического действия концентраций испытуемых веществ является уменьшение роста клеток или отмирание клеток. По окончании опыта косвенно определялось количество жизнеспособных клеток на культуру за счет установления способности жизнеспособных клеток к восстановлению красителя MTT (бромид 3-(4,5-диметил-тиазол-2-ил)-2,5-дифенилтетразолия) до соответствующего формазана. Определялась концентрация испытуемого вещества, способная к уменьшению количества контроля (далее KYso).

Испытуемые вещества исследовались как в отсутствие адриамицина, так и в присутствии количества адриамицина (АДР), не задерживающего полиферацию в условиях культивации. Поэтому для каждого испытуемого вещества получались значения KYgo (первое — в присутствии АДР, т.е. КУ вАДР, второе — в отсутствие АДР, т.е. KYso, Разница десятичных логарифмов обоих значений

КУщ Л= log КУ оАДР является мерой повышенной цитотоксичности испытуемого вещества, вызываемой присутствием адриамицина. Кроме того, резистентность клеток к воздействию АДР устраняется.

Экспоненциально растущие, устойчивые к адриамицину или чувствительные к адриамицину клетки S180 помещались в плоскодонные микротитровые пластинки с

96 углублениями (2000 клеток/углубление), каждое из которых содержало 100 мкл питательной среды (RPMI-1640 с содержанием

10 эмбриональной сыворотки крови крупного рогатого скота), Пластинки инкубировались в термостате при 37 С и относительной влажности воздуха 100 в присутствии 5 двуокиси углерода, По истечении 24 ч добавлялось на углубление 50 мкл питательной среды, содержащей разные концентрации испытуемого вещества, и 50 мкл питательной среды без адриамицина или с адриамицином. В течеwe 6 дней культивации пипеткой подавали в каждое углубление 50 мкл раствора етразолиевой соли (5 мг бромида 3-(4,5-диметилтиазол-2-ил)-2,5-дифенилтетразолия на солевой раствор с фосфатным буфером, разбавленный до использования средой RPM11640 в объемном соотношени 1:5). После

4-часовой инкубации культурная среда осторожно отсасывалась и образовавшийся внутри клеток формазан солюбилизировался добавлением 150 мкл диметилсульфоксида/углубление. Пластинки кратковременно встряхивались и измерялась оптическая плотность при 570 нм с помощью фотометра (Динатех MR-600). Образование формазэна путем восстановления тетразолиевой соли пропорционально количеству жизнеспособных клеток. Полученные в результате трехкратного анализа средние значения использовались для подсчета значений КУ в (степень разбавления 1:2).

Результаты опыта приведены в таблице.

Данные таблицы подтверждают, что птеридины общей формулы (I) отличаются ярковыраженным сенсибилизирующим действием на устойчивые к адриамицину саркомные клетки и поэтому в комбинации с алкалоидами из VINCA, эпиподофиллотоксинами или антибиотиками, такими как даунорубицин, доксорубицин. блеомицин, митрамицин или митомицин годятся для лечения неопластичных заболеваний для того, чтобы устранить их устойчивость к соответствующей химиотерапии и таким образом обеспечить ослабление опухолей, устойчивых к этим веществам, Птеридины формулы (I) совместно с химиотерапевтическим средством предотвращают то, что устойчивые к терапии субпопуляции опухолей могут переживать терапию и таким образом вызывать рецидив.

Производные птеридина формулы (I) относятся к категории малотоксичных веществ, Формула изобретения

Способ получения производных птеригде R и йз — замещенная в положении 2 или в положениях 2 и 6 метилом морфолиногруппа;

R> и Rz вместе с находящимся между ними атомом азота образуют N-атил-этаноламино, N-атил-изопропаноламино, этанолизопропаноламино, N-(2-окси-2-метилн-пропил)-этаноламино;

1720491

R4 — водород или метил;

n — 0 или 1. отличающийся тем, что соединение общей формулы

R г1 2 (СН2)я-Я а а1 где R1, Ra, R4 и и имеют указанные значения;

КУ о,мкг/мл

Соединение примера

КУ

КУ5 100 нг адриамицина

Адриамицин, нг/мл

0 100

100

4Нет активноси даже в концен t>;-q>

100 мкг/мл.

Составитель Д. Плутицкий

Редактор Т. Лазоренко Техред М,Моргентал Корректор A. Кравцова

Заказ 779 Тираж Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5

Производственно-издательский комбинат "Пате" .. . Ужгород. ул,Гагарина, 101

2

4

6

Сравнеwe

20,69

>31,60

12,85

46,79.

70,63

69,05

7,!) 0 (0 50

0,77

0,82

10,05

37 32

З„94

О, !0 один иэ радикалов Z или Z1 — нуклеофильно заменяемая группа, а другой радикал Z или Z1 имеет укаэанные для R или Яэ значения или означает также нуклеофиль5 ную заменяемую группу, подвергают взаимодействию с соединением общей формулы

Н вЂ” Х, где Х имеет указанные значения R или Рэ, с последующим выделением целевого про10 дукта.

>1,6

01,61

1,20

0,60

0,28

0,84

1,88