Штамм микромицета monilia candida, используемый для очистки сточных вод от синтетических жирных кислот
Иллюстрации
Показать всеРеферат
Изобретение относится к биотехнологии , в частности к биологической очистке промышленных сточных вод от синтетических жирных кислот, и касается нового штамма микроскопических грибов, который может быть использован для аэробной биологической очистки сточных вод преимущественно нефтеперерабатывающих заводов, имеющих цеха синтетических жирных кислот , а также может быть использован для очистки сточных вод молочных заводов, производства синтетических жирозаменителей , содержащих жирные кислоты и их соли, спирты, альдегиды и другие органические соединения, Цель изобретения - штамм микроскопических грибов, способный утилизировать синтетические жирные кислоты для повышения степени очистки сточных вод производства синтетических жирных кислот и сокращать время наращивания биомассы в период пуска очистного сооружения. Изобретение заключается в использовании штамма микроскопических грибов Monilia Candida ВКПМ F-407 на вспененном пенополиуретане в биологических сооружениях, что способствует в условиях производства ускорению наращивания биомассы в период пуска аэротентов и других сооружений биологической очистки и интенсификации процесса очистки сточных вод, содержащих жирные кислоты в концентрации до 8 г/л.3 табл. (Л
СОЮЗ СОВЕТСКИХ
СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ
РЕСПУБЛИК
ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ
ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ
ПРИ ГКНТ СССР
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4779053/13 (22) 11.12.89 (46) 30.03.92. Бюл. ¹ 12 (71) Всесоюзный научно-исследовательский институт по охране вод (72) Н.С.Горбань, А,М.Лопин, B.А,Поволоцкая, Г.Л.Тамарин, Л,И,Бапула и В.М.Дутчак (53) 628.543 (088.8) (56) Авторское свидетельство СССР
¹1154221,,кл. С 02 F 3/34, 1985.
Авторское свидетельство СССР
N 1000420, кл. С 02 F 3/34, 1983. (54) ШТАММ М И КР О М И ЦЕТА MON LIA
САМО!ОА, ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ ДЛЯ ОЧИСТКИ СТОЧНЫХ ВОД ОТ СИНТЕТИЧЕСКИХ
ЖИРНЫХ КИСЛОТ (57) Изобретение относится к биотехнологии, в частности к биологической очистке промышленных сточных вод от синтетических жирных кислот, и касается нового штамма микроскопических грибов, который может быть использован для аэробной биологической очистки сточных вод преимущественно нефтеперерабатывающих заводов, Изобретение относится к биотехнологии, в частности к биологической очистке промышленных сточных вод от синтетических жирных кислот, и касается нового штамма микроскопических грибов, который может быть использован для аэробной биологической очистки сточных вод, преимущественно нефтеперерабатывающих заводов, имеющих цеха синтетических жирных кислот (СЖК), а также может быть использован для очистки сточных вод молочных заводов, производства синтетиЯЛ 1723118 Al (s»s С 12 N 1/20, С 02 F 3/34 имеющих цеха синтетических жирных кислот, а также может быть использован для очистки сточных вод молочных заводов, производства синтетических жирозаменителей, содержащих жирные кислоты и их соли, спирты, альдегиды и другие органические соединения, Цель изобретения— штамм микроскопических грибов, способный утилизировать синтетические жирные кислоты для повышения степени очистки сточных вод производства синтетических жирных кислот и сокращать время наращивания биомассы в период пуска очистного сооружения. Изобретение заключается в использовании штамма микроскопических грибов Моп!!!а candid ВКПМ F-407 на вспененном пенополиуретане в биологических сооружениях, что способствует в условиях производства ускорению наращивания биомассы в период пуска аэротентов и других сооружений биологической очистки и интенсификации процесса очистки сточных вод, содержащих жирные кислоты в концентрации до 8 г/л, 3 табл. ческих жирозаменителей, содержащих жирные кислоты и их соли, спирты, альдегиды и другие органические соединения.
Сточные воды производства синтетических жирных кислот относятся к категории высококонцентрированных вод. Общее количество примесей в сточных водах СЖК по бихроматной окисляемости (ХПК) составляет 8000 — 13000 мг О/л, по биохимическому потреблению кислорода (БПК) 5500-11500 мг Ог/л. Сточные воды характеризуются повышенной температурой (37 — 40 С). По кон17231 18 центрации водородных ионов сточные воды кислые (рН 3,0 — 3,5). Даже после нейтрализации этих вод биологическая очистка невозможна в связи с их токсичностью для микроорганизмов активного ила. После нейтрализации требуется еще разбавление сточных вод в 20 — 25 раз, что в условиях производства осуществлять практически невозможно, В отдельных случаях при залповых сбросах ХПК указанных вод могут достигать
25000 мг О/л. В таких случаях наблюдается массовая гибель организмов активного ила и вынос ила из очистных сооружений, после чего концентрация активного ила составляет 0,3 — 0,5 г/л, На восстановление концентрации активного ила и жизнедеятельности микроорганизмов требуется несколько месяцевв.
Известно использование грибов
Trichoderma lignorum с целью повышения степени очистки и сокращения удельного расхода воздуха при очистке сточных вод гидролизной промышленности. Сточные воды гидролизной промышленности также относятся к категории высококонцентрированных вод, в состав которых входят жирные кислоты. Процесс окисления компонентов сточных вод осуществляется мелкопузырчатой аэрацией, а часть биомассы возвращают на стадию окисления.
Наиболее близким к предлагаемому по технической сущности является способ биологической очистки сточных вод, содержащих синтетические жирные кислоты, обеспечивающий эффективную очистку при совместной обработке сточных вод, содержащих СЖК и нефтепродукты, за счет сокращения периода аэрации и расхода воздуха, повышения содержания растворенного кислорода и улучшения седиментационных свойств активного ила. Сточные воды, содержащие СЖК, нейтрализуют до рН 6 — 6,5, смешивают с культурой водооосли СЫогеИа
vulgaris в количестве (3 — 6) 10 кл/мл и после выдерживания смесь водорослей со сточными водами флотируют и обрабатывают активным илом в аэротенке совместно со сточными водами, содержащими нефтепродукты, Сточные воды с культурой водоросли выдерживают 4 — 6 сут при с 20 — 25 С при естественном освещении с аэрацией в ночное время, после чего сточные воды с водорослями направляют в азротен к. Обработку активным, илом ведут при его концентрации
2,5 — 3,0 г/л при времени аэрации, равном
20-22 ч, и содержании растворенного кислорода во вторичном отстойнике 1 — 3 мг/л, При обработке поддерживают соотношение сточных вод, содержащих СЖК и нефтепро5
55 дукты, в пределах 1:6 — 1:9. На стадии смешения сточных вод с культурой водоросли
Chlorella ни!айаг!з вводят в качестве биогенного вещества фосфор в количестве 7 — 8 мг/л, Однако водоросли Chlorella vulgaris являются менее активными деструкторами синтетических жирных кислот, чем грибы.
При содержании в сточных водах по ХПК органических веществ до 8000 мг О/л в культуре с водорослями требуется 4 — 6 сут для снижения ХПК на 407;. При использовании штамма ВКПМ F-407 Monilia candida за 7 ч содержание органических веществ по ХПК снижается на 50 — 70 .
Грибы более устойчивы к низким значениям рН. При рН 5,5 отмечалась гибель водорослей, в то время как при подкислении среды до рН 5,5 гибели штамма Monilia
candida не наблюдалось. В связи с этим для высококонцентрированных сточных вод производства синтетических жирных кислот более перспективно применение штамма гриба.
Указанные штаммы организмов, применяемые для очистки сточных вод, содержащих большое количество органических примесей, в том числе жирных кислот, являются мало активными деструкторами и могут применяться для очистки сточных вод с меньшим содержанием органических веществ, Использование их для очистки высококонцентрированных сточных вод требует довольно длительного времени пребывания указанных вод в очистном сооружении, что влечет за собой необходимость увеличения объема очистных сооружений.
Целью изобретения является штамм микроскопических грибов Monilia candida
В КП М F-407, способный утилизировать синтетические жирные кислоты для повышения степени очистки сточных вод производства синтетических жирных кислот и сокращать время наращивания биомассы в период пуска очистного сооружения.
Штамм выделен из лабораторной установки, в которой осуществлялась очистка натуральных сточных вод производства синтетических жирных кислот путем селекции, Основными показателями для отбора активного штамма-деструктора служили скорость разложения синтетических жирных кислот, заметное количественное преобладание колоний на питательной среде по сравнению с другими микроорганизмами, а также частота встречаемости при повторных посевах.
Выделенный штамм усваивает в качестве источника углерода и энергии синтетические жирные кислоты. На среде Чапека при
1723118
55 уменьшении концентрации сахарозы с 20 г/л до 1 и 2,5 г/л и введении сточной воды производства синтетических жирных кислот, содержащей органических примесей по
ХПК 600 мг О/л, штамм хорошо растет, о чем свидетельствует увеличение биомассы и снижение концентрации органических веществ по ХПК. При исключении из среды
Чапека сахарозы и введении в качестве единственного источника углерода сточной воды производства СЖК она хорошо используется штаммом в качестве источника углеродного питания, хотя наращивание биомассы происходило более медленно. Результаты развития штамма Monilia candida на среде Чапека при различных концентрациях сахарозы с добавлением сточной воды производства СЖК представлены в табл. 1. . Полученные результаты свидетельствуют о том, что введение в лабораторную установку штамма М. candida ВКПМ F-407 в количестве 170 мг клеток/л позволяет без предварительной адаптации проводить очистку сточной воды, содержащей синтетические жирные кислоты С вЂ” С 4 в количестве до 600 мг О/л по бихроматной окисляемости.
Оптимальной концентрацией синтетических жирных кислот для развития штамма при непрерывном культивированииего влабораторной установке является 600 мг/л, при повышении концентрации жирных кислот до 1 г/л эффективность очистки сохраняется высокая — до 80, но отмечается вынос ила. При иммобилизации штамма на синтетическом вспененном материале окислительная мощность сооружения значительно повышается в результате того, что вынос ила прекращается и концентрация жирных кислот может быть увеличена до 8 г/л.
Полученный штамм микроскопического гриба Мопйа сапбЫа депонирован во Всесоюзной коллекции промышленных микроорганизмов (ВКПМ) под номером F-407.
Шгамм Monilia candida ВКПМ N. F-407 характеризуется следующими культурально-морфологическими и физиолого-биохимическими признаками, Культурально-морфологические признаки. Колонии шерстистые, белого цвета, хорошо растут на суслоагаре: за 24 ч диаметр колонии 10 мм, 48 ч — 25 мм, 72 ч — 30 мм, на 5 сут — 50 мм, на 8 сут — 75 мм (при
25 С), Хорошо растет на овсяном агаре, на твердой среде Чапека — рост замедленный.
На жидкой среде Чапека с добавлением сточной воды, содержащей жирные кислоты, растет хорошо, 5
Мицелий стелющийся, септированный, распространяющийся внутри питательной среды и образующий на ее поверхности плотные, частично сливающиеся дерновинки, Гифы воздушного мицелия прямостоящие, маловетвящиеся, септированные.
Спороношение бесполое. Начало образования конидий на третьи сутки при выращивании на сусло-агаре при 23 — 25 С. Конидии яйцевидные, одноклеточные, бесцветные, 6 — 7х5мк.
Физиолого-биохимические признаки.
Аэроб. Температурный диапазон роста 20—
30 С. Оптимальная температура роста 2327 С, Максимальная. скорость роста при
23 — 27 С. Оптимум р Н 5,5 — 7,0, Отношение к источникам углерода. Хорошо усваивает и растет на глюкозе, сахарозе, лактозе, фруктозе, хуже растет на манните. Хорошо усваивает и.растет на углероде синтетических жирных кислот
С -С 4 (сточные воды производства синтетических жирных кислот), Использует минеральный и органический азот, пептон использует в качестве источника азота и углерода. На сусло-агаре хорошо растет без стимуляторов, на среде Чапека рост замедленный, значительно ускоряется при добавлении биотина, Хорошо хранится в лиофильно высушенном состоянии. Генетические особенности (ауксотрофность) — прототроф.
Активность штамма. Штамм-деструктор синтетических жирных кислот С вЂ” С 4 используется для очистки высококонцентрированных сточных вод, содержащих жирные кислоты, Полезное действие деструктор сохраняет в течение 4,5 лет.
Сущность изобретения поясняется следующими примерами обработки сточных вод, содержащих синтетические жирные кислоты, без использования и с использованием штамма Monilia candida ВКПМ N. F407.
Пример 1. В лабораторный аэротенкотстойник загружают активный ил, предварительно отобранный из городских очистных сооружений, из расчета 1 г/л. 2 сут аэрируют и подают на аэротенк жидкую минеральную питательную среду, содержащую, мг/л: (NH4)zS04 — 400, КгНРО4 — 100, MgSO< — 50, NaCI — 50, следы РеС!з и 500 мг/л сахарозы в качестве источника углерода. Через 2 сут в качестве источника углерода в указанную среду вводят сточную воду с содержанием органических веществ по ХПК
360 — 370 мг О/л. Время пребывания сточной воды в аэротенке 6 ч. Наблюдения за работой лабораторной установки проводят в течение 30 дней. Нагрузку на аэротенк
1723118 повышают через 20, а затем через каждые 5 дней, так как раньше повышать нагрузку нецелесообразно из-за невысокой эффективности очистки, что видно из табл. 2.
Из приведенных результатов видно, что 5 первые сутки эффективность очистки низкая, что свидетельствует о необходимости осуществлять биохимическую очистку при проведении предварительной адаптации активного ила к жирным кислотам. Только 10 на 25-е сут при повышении нагрузки по ХПК до 550 мг О/л процесс биохимической очистки начинает стабилизироваться и эффективность снижения органических веществ по ХП К составляет 77%. Повышение нагруз- 15 ки по ХПК на 30-е сут приводит к снижению эффективности очистки. Как видно из таблицы, концентрация биомассы в течение опыта уменьшается, так как наблюдается вынос ила, что также свидетельствует о неудовлет- 20 ворительной работе аэротенка.
Пример 2. Штамм Monilia candida
ВКПМ F-407 выращивают на среде Чапека, содержащей на 1 л водопроводной воды 5 r сахарозы, 100 мл воды производства синте- 25 тических жирных кислот, 2 г МаМОз, 1 г—
KHzP04, 0,5 г М9ЯОа следы FeS04 при 25 С в 5 сут. Затем пятисуточную суспензию вносят в аэротенк-отстойник из расчета, чтобы биомасса штамма была в пределах 0;6 — 0,8 30 г/л. В аэротенк непрерывно подают сточную воду, которую подвергают биохимической очистке в аэротенке в течение 6 ч. Как видно из табл. 3, биомасса штамма гриба в начале опыта составляет 0,63 г/л, Через 6 ч 35 концентрация органических веществ снижается на 56% по ХПК, а по БПКьна 63%.
На вторые сутки концентрация органических веществ в сточной воде увеличивается до 650 мг О/л. Эффективность очистки 93% 40 по ХПК и 95% по БПК. Концентрация органических веществ через 20 сут составляет до 1150 мг О/л и s дальнейшем увеличивается до 1440 мг О/л. Очистку сточных вод от кислот проводят в нестерильных условиях и 45 помимо штамма М. candida ВКПМ F-407 в биоценозе сооружения развиваются бактерии и простейшие, но при посевах проб из установки Monilia candida постоянно обна50 руживается в значительных количествах, что свидетельствует о том, что этот организм хорошо развивается на жирных кислотах.
Биомасса микроорганизмов на протяжении опыта увеличивается, что свидетельствует об использовании ими жирных кислот, содержащихся в сточной воде, в качестве источника углеродного питания.
Введение в аэротенк активного штамма-деструктора жирных кислот даже при невысокой исходной биомассе его 0,63 г/л позволяет в более короткие сроки увеличить нагрузку органических веществ, содержащихся в сточных водах производства синтетических жирных кислот, на аэротенк. Из табл. 3 видно, что с повышением концентрации органических веществ в сточной воде, подаваемой в аэротенк, увеличивается иловый индекс и уменьшается концентрация биомассы, что связано с выносом ила из аэротенка. Эффективность очистки при высоких содержаниях органических веществ несколько уменьшается, но в общем остается довольно высокой. Недостатком работы установки является ухудшение седиментационных свойств активного ила и вынос его из аэротенка.
При иммобилизации штамма Monilia
candida на вспененном пенополиуретане клетки мицелия прикрепляются к пенополиуретану, проникая в поры его, и вынос ила прекращается, Использование активного штамма деструктора, иммобилизованного на носителе (пенополиуретане), позволит в условиях производства ускорить процесс наращивания биомассы в период пуска аэротенков и других сооружений биологической очистки, на которые будут подаваться концентрированные сточные воды, содержащие жирные кислоты, и интенсифицировать процесс очистки указанных сточных вод.
Формула изобретения
Штамм микромицета Monilia candida
В КП М F-407, испол ьзуемы и для очистки сточных вод от синтетических жирных кислот.
1723118
I
I
1
1
1
1 X х
1-! Оъ о
1 Э
1 1
1
Cg х
I- cc
Ф
Q.
1Z
Э т
Z о
1 с
ы л со
1 .Х
Z
I
1
1 X
1 Y
I I1 ъ о
1 I а
I
1 —— х х о
Э
IЭ
1?
S о х
З
X с
С
Cg а аа ъО ъО м мсо ъО аъО
S а с
Щ
3v
cZ о
S о а 1с
43 v сС X
О Y х
Е Б
Э Z
s a
Э 3Е с
IO о сс
Ig
Э с
1 I 1 с
I 1 «Л I
ы о с 3 х
1 1 Z 1
1 1 .,I! I 1
1 1 I
1 ъ 1
S1 О -С!
Ы ХОЛ1
1 1- I 0ъ Э L. 1
Î1 VmS и! 1 I
1 Э 1 I! 1 I .ь 1 м a 1
1 1 1
1 I 1
Э с
Э о л
0 с
Cg о
1
1 1 с
X 1
1 1m I с=
Y 1 Y O
Х 1 Е
О!ХL
1- I
v»s о о
Сс ХОЛ!!
>ъ Э 1 .а 1 v m S с
1 х
1 а
1 I
° л
О
О й
Е
32
Iо о
Щ х
Ф
v а со о с лл о о лл
I
1 I П)
1 gl a
1 C 0ъ
1 Z I- LI э mo
О.
1 1
1 Cg
I Х
I Cg Ф с4 Ф
1
I C
1 C
55!
1
3
1
I
I
I
1
1
1 !
I
1
1
1
Э
1 Ф
1 С3
I Cg
1 Y о
I !
1 S
1 Cg
1I Z
1 Э
1 Z
О. ! Э с
I М
1 Съ3
1
Э а
1 СО
3
1
1
1
I
1
I
1
1
I
1 !
1
1
I
1
1
1
1
1
I 1 с
1 . 1 о
1 1 х
1 1
1 1
1 1
1 ъБ I ! О С I
Хоч
W CD L
1 v Ф S
1 1
1 I
1 Х I
1 а I
1 1
I I
1 1
1 ъ I о
Х ОЛ I
I WIDL1
ОФ
1 1
1 1
1 1
1 1
I a I
I 1
Cl ооо ъвo оъо о
Оъ сч -- СО м сч м
О ОООО
Со ъо а СО с»
N М-С ъО С 4 сч 4 а асс съсч а .Оа Оъ00 о оооо сч о о сч о о-с сч асч с 4 с 1oooъОо
О-!. О mgCL
N М.С.- о ъО o os аю с 4 Ф о
;ОсО а О сч м Оъ осоooа
010 ъС:ъ МЛ
:ч -з ъО СО СО г лc л
« ъО .О "О .О ъО оооо осчьао
00 01ММСЧ сч -а с4 03
N СО сосо лл ъО О "О.ОъО
I I 1
o—
СЧ
1 I I
Iv
Iо 0ъ ао «о о l аN о
1
- сч мс а
1 ооо
OъON 1 с 4 ло I
I
I о с! осо а о 1 ла
1 лд со мам
1 ъ0 а "0 1
I!
I ооа с 4 - 1
- 3
I
-соo! о-т о О ъ "О I
СЧ 1 а - 3 1
I ааа
1 о о о осча 1
-4 -З I
NNN I
1 счао 1 м с 3мм
3 лспо 1
О r
I О .О ъо I
1
I ооа I
СЧNN I а.iСО а с 1
СЧ СЧ СЧ 1
1
LA асо 1 л л сI
1 оэсол !! ОъО "О 1
1
1 оoа м=!. Сч
1!
3- 1 эааа л
Ф СЧ СЧ СЧ 1
1
I ъО ЛаЗ
1723118
Т а бл и ц а 2
Очистка сточных вод производства синтетических жирных кислот активным илом без предварительной адаптации
Время проведения исследований, в сутках
1" Показатели и/и
25 (30
6,3 6,4
) (11 (л 111 1
> рН
ХПК, мг О/л, поступ.
360 368 370 370 370 370
346 330 258 260 125 105
550 675
ХПК, мг О/л, выходящая
123 192
Концентрация ила, г/л 1,0 0,92 0,80 0,63 0,5 0,58
0,62 0,7
Иловый индекс, мл/г сухого веще80 85 87 88 80 85 85 80
Эффективность снижения органических веществ по
ХПК, Ж
77 71
10 29 30 60 71 та бл и ц а 3
Использование втамма Monilia candida для очистки сточных вод производства синтетических жирных кислот.
1День постановки
Показатели
Время проведенив опыта, сут
14 20- 38
6,95
368
160
6,3 ь,1
635 630
6,95
6,2
835
6,3
830
6,2
6,2
1440
180
30,5 120
1,2 1,4
1>2
1,95
95 г, 1
0,63
0,76
2,9
Иловый индекс, мл/г во
i5o
4о
П -46,3 в -31,4
26 .
Азот аммонийный мг/л
Азот нитритов, 20
17,5
15,2
О п-ю в -zo и-о п-о в-i5 и-о в-á,z нг/л
8,3 о
10 15,2
0 о
15>2
1ю,г
9,5
Азот нитратов, мг/л в-5
3,2
25,5 г,г
582
2,2 2,2
585 622,5
10,5 80,3
2,0
625,5
65,5
3,1
620
3,г
862,5 .102,5
2,2
1060
БПКЗ, мг ОЗ/л
26,5 п -гво
В -105
60,3
10,5
220,5
Эффективность снимания огр. веществ, Ф 56 93 94,95 95 85 88 88 84 76 снижение по
БПК
63 95 95 98 98 87
89 90
88 79
Составитель И.Болотина
Техред М.Моргентал Корректор Э.Лончакова
Редактор Н.Горват
Заказ 1042 Тираж Подписное
ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР
113035, Москва, /К-35, Раушская наб„4/5
Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул.Гагарина, 101 рн
ХПК, нг О/л,поступ
Хпк,мг О/л,выход
Биомасса, г/л
6,5
1,16
43
20,5
1,2
1О б,г
1, 17
85 38
18,5
3,0
8,5 о
87 140
38 43
18 20>5
О О. 380
39,5
16,0