Способ определения токсичности химического вещества

Способ определения токсичности химического вещества

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

Изобретение-относится к медицине и может быть использовано при токсикологических и фармакологических исследованиях. Цель изобретения - ускорение при повышении точности за счет исключения рефлекторных останог вок животного. Измеряют время бега животного по третбану до отказа при постепенном увеличении скорости движения ленты третбана от 0 до максимальной после введения исследуемого вещества и сравнивают результаты с физиологической нормой. Осуществляют стимуляцию бега с помощью игл регулируемой в зависимости от толщины местного покрова животного длины, которые располагают на задней стенке третбана. Ускоренное движение ленты третбана и стимуляция бега животного иглами регулируемой длины позволяют исключить при тестировании рефлекторные остановки животного, что приводит к ускорению и повышению точности способа. 1 табл. (Л

СООЗ СОВЕТСНИХ социАлистичесних

РЕСПУБЛИК

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Н A ВТОРСИСМ,Ф СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ пО изОБРетениям и ОтнРытиям

ПРИ ГКНТ СССР

1 (21) 480! 920/14 (22) 23.11.89 (46) 07.04.92. Бюл. N 13 (71) Днепропетровский медицинский институт

{72) В.Ф.Ушаков, В.К.Бондарь, A.Ï.KoðoëåB и П.Е.Соколов (53) 615.476(088.8) (56) Методы исследования хронического действия вредных Факторов среды в эксперименте. Л., 1964, с. 94-102. (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ТОКСИЧНОСТИ

ХИМИЧЕСКОГО ВЕЩЕСТВА (57) Изобретение относится к медицине и может быть использовано при токсикологических и Фармакологических исследованиях. Цель изобретенияускорение при повышении точности за

Изобретение относится к медицине и.может быть использовано при токси-. кологических и фармакологических исследованиях, Известен способ определения токсичности, при котором после введения вещества в организм экспериментального животного определяют значения различных показателей. Один из них - показатель выносливости, который очень часто является лимитиру.ющим при установлении порогов токсического действия вредных веществ.

Для определения указанного показателя у мелких лабораторных животных применяют горизонтальный третбан, с помощью которого измеряют продолжи„,SU„, 1 24 71 щ) А 61 В 5/00

2 счет исключения рефлекторных остано.. вок животного. Измеряют время бега животного по третбану до отказа при постепенном увеличении скорости движения ленты третбана от 0 до максимальной после введения исследуемого вещества и сравнивают результаты с физиологической нормой ° Осуществляют стимуляцию бега с помощью игл регулируемой в зависимости от толщины местного покрова животного длины, которые располагают на задней стенке третбана. Ускоренное движение ленты третбана и стимуляция бега животного иглами регулируемой длины позволяют исключить при тестировании рефлекторные остановки животного, что приводит к ускорению и повышению точности способа. 1 табл. тельность бега животных по движущейся ленте.

Этот метод, несмотря на его чувствительность, не находит широкого применения из-за длительности процесса обучения (тренировки) животных бегу и высокого процента выбраковки животных вследствие отказа животных вбежать. Животные отказываются от бега в двух случаях - когда пугаются большой начальной скорости движения ленты или от нежелания бегать, т.е. симуляции. В обоих случаях животные прижимаются к задней стенке третбана, опираясь о нее, ограничиваются лишь перебиранием передних конечностей по движущейся ленте. Такие животПример 1. Проведено исследование токсичности диплации дихлорида на четырех животных (белые крысы) .

Двух животных обучали на третбане при движении ленты с постоянной скоростью (40 м/мин), а остальных двух - с применением ускоренного дви- 40 жения ленты (a=100 м/мин ) и дополнительной стимуляции иглами длиной

3 мм. На подготовку животных к эксперименту, т.е. выработку навыков бега по третбану, потребовалось в первом случае по 15 мин на 1 животное в те: чение 6 дн, во втором - no 15 мин в течение 3 дн. Затем двум контрольным животным вводили внутрибрюшинно по

1 мл физиологического раствора, а, двум - диплацин дихлорид в дозе

4 мг/кг веса животного. Длительность бега животных при постоянной скорости 40 м/мин составляла для контрольного животного 160 с, для опытного

152 с, при ускоренном движении лен55 ты третбана (a=100 мlмин ), длительность бега животных составляла у контрольного 128 с, у опытного 56 с.

50

172417 ные становятся непригодными для даль" нейших экспериментов и подлежат выбраковке. Значительную часть среди забракованных составляют животные со слабым типом нервной системы, что

5 является крайне нежелательным, поскольку такие животные наиболее чувствительны к воздействию ядов„ и их выбраковка вносит большую погрешность в определение пороговых концентраций исследуемых веществ. А длительный процесс обучения животных бегу увеличивает трудоемкость проведения исследований. 15

Цель изобретения - ускорение при повышении точности за счет исключения рефлекторных остановокживотного.

Способ осуществляют следующим образом. 20

Измеряют время бега животного по третбану до отказа после введения исследуемого вещества при постепенном увеличении скорости движения ленты третбана от 0 до максимальной, срав- 25 нивают полученные данные с физиологиче:кой нормой.

Осуществляют стимуляцию бега с помощью игл регулируемой s зависимости от толщины местного покрова животного длины, которые располагают на задней стенке третбана, 1 4

Результаты данного примера свидетельствуют о существенном различии показателя бега контрольных и опытных животных при применении способа с ускоренным движением ленты и дополнительной стимуляцией иглами. Отношение длительности бега контрольного и опытного животного составляет 2,3, а при использовании постоянной скорости и отсутствии игл 1,1. Это означает, что в данном конкретном случае точность нового способа повышается в 2 раза.

Положительный эффект подтверждается результатами экспериментального исследования по оценке влияния вещества, расслабляющего скелетную мускулатуру (диплацин дихлорид) на выносливость крыс. Использовали два способа оценки выносливости. По первому способу выносливость оценивали при постоянной скорости движения ленты (15 мlмин) и с отсутствием на задней стенке третбана ориентирующих иголок. Во втором способе выносли" вость крыс оценивали при ускоренном движении ленты (от 0 до 50 M/ìèí) и с иголками (0,5-7 мм) на задней стен,ке. Эксперименты проведены на 40 белых беспородных крысах обоего пола массой 176,8+5,6 г. Каждую группу составляли 10 крыс. Диплацин дихлорид вводили внутрибрюшинно в дозе

4 мг/кг веса животного. Животным контрольных групп в том же объеме внутрибрюшинно вводили физиологический раствор. Через 15 мин после введения определяли показатель выносливости животных поочередно контрольных и опытных rpynn. 8 первом способе при использовании постоянной скорости и отсутствии ориентирующих иголок на задней стенке достоверных различий показателя выносливости меж" ду опытными и контрольными животными не выявлено. Во втором способе при использовании ускоренного движения ленты и .наличии ориентирующих иголок на задней, стенке различия оказались достоверными (Р=0,001) . Применение предложенного способа позволило обнаружить, что диплацин дихлорид в дозе 4 мг/кг вызывает значительное в (4,5 раза) снижение выносливости животных. С помощью известного способа этот эффект не выявляется.

1 6

Формула изобретения

Способ оценки выносливости Контроль, с Опыт, с

Известный способ

При движении ленты третбана с постоянной скоростью и отсутствии ориентирующих иголок 71,2+16,4

64,3+17,1

Предложенный способ

При ускоренном движении ленты третбана и наличии ориентирующих иголок

121,6117,1 26,8 4,7 0,001

Составитель Н.Яковлева

Редактор В. Данко Техред А. Кравчук Корректор М.Самборская

Заказ 1125 Тираж Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета ао изобретениям и открытиям ври ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г.ужгород, ул. Гагарина,301

5 172417

При сравнении точности измерений оценивали коэффициент вариации, который в первом способе оказался: в опытной группе 26,74, в контрольной

23,1ь, во втором способе в опытной группе 18,14, в контрольной 14,1ь.

Таким образом, точность измерений показателя выносливости повысилась в 1,5-1,6 раза.

Продолжительность начальной стадии эксперимента - подготовки животных к бегу на выносливость - сокращается в 2 раза, так как при использовании

cllocG68 с постоянной cKopocTbo H QT сутствии ориентирующих иголок она составила 6-7 дн, а во втором способе при использовании ускоренного движения ленты и наличии ориентирующих иголок 2"3 дн. 20

Влияние диплацин дихлорида на продолжительность бега крыс, определяемую известным и предлагаемым способами приведено в таблице.

1. Способ определения токсичности химического вещества путем измерения времени бега животного до отказа по третбану после введения исследуемого вещества и сравнения с физиологической нормой, о т л и ч а ю щ и йс я тем, что, с целью ускорения при повышения точности за счет исключения рефлекторных остановок животного, нагрузку создают при постепенном увеличении скорости движения ленты от 0 до максимальной.

2. Способ по и. 1, о т л и ч аю шийся тем, что стимулируют бег с помощью игл регулируемой в зависимости от толщины местного покрова животного длины, которые располагают на задней стенке третбана.