Способ изучения транспорта веществ через синусоидальные мембраны гепатоцитов

Способ изучения транспорта веществ через синусоидальные мембраны гепатоцитов

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

Изобретение относится к биологии и медицине и может быть использовано в гепатологии . Цель - упрощение способа. У животных вызывают холестаз введением а- -нафтилизотиоцианата, который приводит к селективному нарушению структуры и транспортной функции мембран гепатоцитов. Структурная и функциональная целостность синусоидальных мембран позволяет регистрировать транспорт веществ через эти мембраны известными методами. Преимущество способа по сравнению с известным состоит в том, что не требуется предварительного выделения соответствующих мембранных фракций гепатоцитов.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (5!)5 G 01 N 33/50

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4798529/14 (22) 05.03.90 (46) 23,05,92. Бюл, ¹ 19 (71) Киевский государственный университет им. Т.Г.Шевченко (72) О.Д.Синельник, Б.Е.Есипенко, И.В.Лысенко и Б.Ф.Синельник (53) 615 475 (088,8) (56) Biol. Chem., 1984, v. 259, р. 5406-5408. (54) СПОСОБ ИЗУЧЕНИЯ ТРАНСПОРТА ВЕЩЕСТВ ЧЕРЕЗ СИНУСОИДАЛЬНЫЕ МЕМБРАНЫ ГЕПАТОЦИТОВ (57) Изобретение относится к биологии и медицине и может быть использовано в reИзобретение относится к биологии и медицине и может быть использовано a -епатологии.

Цель изобретения — упрощение способа, Способ осуществляют следующим образом.

У крыс вызывают экспериментальный холестаз путем перорального введения анафтилизотиоцианата в дозе 100 мг/кг массы тела в виде 2%-ного раствора в растительном масле. Через 2 дня получают тонкие срезы печени — около 300,и, которые инкубируют при температуре

1 С в течение 90 мин: 10 — 15 срезов в КребсРингер-фосфатном буфере и по 1 срезу в таком же растворе, содержащем 0,5% инулина. После инкубации определяют в срезах объем внеклеточного пространства по инулиновому методу и содержание натрия и калия, используя фотометрию пламени. Расчетным способом определяют внутриклеточное содержание воды, натрия и калия.

„„ „„1735780 А1 патологии. Цель — упрощение способа. У животных вызывают холестаз введением а-нафтилизотиоцианата, который приводит к селективному нарушению структуры и транспортной функции мембран гепатоцитов. Структурная и функциональная целостность синусоидальных мембран позволяет регистрировать транспорт веществ через эти мембран ы известными методами. П реимущество способа по сравнению с известным состоит в том, что не требуется предварительного выделения соответствующих мембранных фракций гепатоцитов.

Другую часть срезов, инкубированных без инулина, делят на 2 группы и переносят: одну в оксигенированную среду (Крес-Рингер-фосфатный буфер, содержащий 0,5% инулина), другую в такую же среду, содержащую строфантин К в концентрации 10 M u инкубируют при 38 С в течение 45 мин. При таких условиях инкубации в первой группе 64 срезов происходит частичное восстановле- U ние ионной асимметрии, нарушенное предварительной инкубацией на холоде, во Q( второй такому восстановлению препятству- С ет строфантин, После инкубации при 38 С в срезах определяют объем внеклеточного пространства и содержание натрия и калия, затем расчетным путем — внутриклеточное содержание воды, натрия и калия.

П р и. м е р. Крысам вводят перорально а-нафтилизотиоцианат в дозе 100 мг/кг массы тела в виде 2%-ного раствора в растительном масле. Через 2 дня получают срезы печени и исследуют их описанным выше способом.

1735780

25

35

Составитель А.Кашулина

Техред М.Моргентал Корректор М.Максимишинец

Редактор Е.Папп

Заказ 1813 Тираж Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул.Гагарина, 101

В таблице представлены результаты расчета интенсивности активного транспорта ионов натрия и калия (количество миллимолей натрия, транспортированнное из клеток за 45 мин инкубации при 38 С после предварительной инкубации на холоде), и калия, транспортированного в клетки за то же время, в расчете на единицу массы печени (ммоль/кг/45 мин) через мембраны клеток интактной и холестазной печени.

Как видно из таблицы, неповрежденные синусоидальные мембраны гепатоцитов холестазной печени сохраняют функциональную способность транспортировать ионы натрия и калия. Преимущество предлагаемого способа по сравнению с известным состоит в том, что не требуется предварительное выделение соответствующих мемб5 ранных фракций гипатоцитов.

Формула изобретения

Способ изучения транспорта веществ через синусоидальные мембраны гепатоцитов, отличающийся тем, что, с целью

10 упрощения способа, каналикулярные мембраны блокируют путем введения животным а - нафтилизотиоцианата, а транспорт изучают на срезах печени.