Способ определения повреждения отделов нефрона

Способ определения повреждения отделов нефрона

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

Использование: в области нефрологии Сущность изобретения: повреждение отделов нефрона определяют по снижению активности сукцинатдегидрогеназы в сочетании с определением активности щелочной фосфатазы на криостатных средах биопсийного материала почки. Способ позволяет проводить дифференциальное определение повреждения в дистальном и проксимальном отделах нефрона.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (я)5 G 01 N 33/573

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

IlO ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4436833/13 (22) 06.06,88 (46) 15.06,92. Бюл. М 22 (71) Черновицкий государственный университет и Черновицкий государственный медицинский институт (72) Ю.Е, Роговой, А.И, Гоженко и В,Н..Магаляс (53) 616.07 (088,8) (56) Лойда З„Госсрау Р., Шиблер Т. Гистохимия ферментов: лабораторные методы.

М,; Мир, 1982, \

Изобретение относится к медицине, а именно к нефрологии, и может быть использовано для.определения повреждения отделов нефрона.

Целью изобретения является повышение информативности способа за счет .возможности дифференциального опреде: ления повреждения в дистальном и проксимальном отделах нефрона, Способ осуществляют следующим образом.

Криостатный срез биопсийного материала почки инкубируют в среде для выявления активности сукцинатдегидрогеназы (инкубационную среду готовят непосредственно перед опытом, смешивая равные объемы 0,2 М фосфатного буфера с рН-7,6 и 0,2

M раствора сукцината натрия. к 10 мл данного раствора добавляют 10 мл раствора 10 мг нитросинего тетразолия (НСТ) е воде). В местах высокой активности сукцинатдегидрогеназы выпадают фиолетовые гранулы гидразинтетразолия. Затем эти срезы после.. Ж, 1741079 А1 (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ПОВРЕЖДЕНИЯ ОТДЕЛОВ НЕФРОНА (57) Использование: в области нефрологии.

Сущность изобретения: повреждение отделов нефрона определяют.по снижению ак-. тивности сукцинатдегидрогеназы в сочетании с. определением активности щелочной фосфатазы на криостатных средах .биопсийного материала почки. Способ позволяет проводить дифференциальное определение повреждения в дистальном и проксимальном отделах нефрона.

1„ промывки в дистиллированной воде инкубируют в среде для .выявления активности щелочной фосфатазы (инкубационную

1 среду готовят также непосредственно ne- Я ред опытом, для чего растворяют 5 мг нефтол — As — В! — фосфата в .0,25 мл диметилформамида, добавляют 25 мл дис- . тилированной воды и 25 мл 0,2 М трис-HCI буфера с рН 8,7. Сюда же прибавляют 30 мг прочного красного ТЯ). В местах высокой активности щелочной фосфатазы выпадают. C) красные гранулы красителя. Таким образом, вокруг гранул щелочной фосфатазы как о маркера проксимального отдела нефрона выявляется сукцинатдегидрогеназа, по сни- у, жению активности которой определяют повреждение проксимального канальца, а при изолированно выявляемом снижении активности сукцинатдегидрогеназы определяют повреждение дистального отдела нефрона.

Il р и м е р 1, Больной П., поступил с жалобами на боли в области поясницы, общую слабость. В анамнезе: перенес острый гломурулонефрит. Объективно: артериаль1741079

Составитель О.Филатов

Техред М,Моргентал Корректор А.Ротман

Редактор M.Öèòêèíà

Заказ.2083 Тираж Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб„4/5

Производственно-издательский комбинаг "Патент". г. Ужгород, ул.Гагарина, 101 ное давление 140/90 мм рт,ст., анемия (эритроциты 3,8 10 /n, гемоглобин 130 гlл), протеинурия 1,12 г/сут, зритроцитурия

6,5 10 /сут, циаиндрурия 7,3 10 /сут, Симптом Пастернацкого положительный.

При гистологическом исследовании биопсийного материала подтвержден диагноз хронического гломерулонефрита (мембранозный тип).

При исследовании биопсийного материала почки на СДГ идентифицированы проксимэльные и дистальные отделы нефрона 60 из 100 наблюдаемых фрагментов почечных канальцев, а при использовании предлагаемого способа 100 из 100, В результате достигается поставленная цель.

Пример 2. Больная С., поступила с жалобами на общую слабость, головную боль. В анамнезе: перенесла острый гломерулонефрит. Объективно: артериальное давление 140/80 мм рт.ст., анемия (эритроциты 3,9 . 10 /л, гемоглобин 126 г/л), протеинурия 1,33 г/сут, эритроцитурия 7,2х х10 /сут, цилиндрурия 8,2 10 /сут, Симптом Пастернацкого отрицательный. При гистологическом исследовании биопсийного материала почки подтвержден диагноз хронического гломерулонефрита (мембранозный тип).

При исследовании биопсийного материала почки на СДГ идентифицированы проксимальные и дистальные отделы нефрона 60 из 100 наблюдаемых фрагментов почечных канальцев, а при использовании заявленного способа 100 из 100. В результате достигается поставленная цель.

Пример 3. Больная Ю, поступила с жалобами на общую слабость, головную боль, боль в области поясницы. В анамнезе: острый гломерулонефрит. Объективно: артериальное давление 150/90 мм рт.ст„анемия (эритроциты 3,6 10 /л, гемоглобин

130 г/n), протеинурия 0,98 г/сут, эритроцитурия 7,1 10 /сут, цилиндрурия 4,8 10 lсут, Симптом Пастернацкого положительный.

При гистологическом .исследовании био5 псийного материала почки подтвержден диагноз хронического гломерулонефрита (мембранозный тип).

При исследовании биопсийного материала почти на СДГ идентифицированы про10 ксимальные и дистальные отделы нефрона

60 из 100 наблюдаемых фрагментов почечных канальцев, а при использовании заявленного способа 100 из 100. В результате достигается поставленная цель.

15 Всего было обследовано. предложенным способом 90 лабораторных животных (крыс) с сулемовой и цис-платиновой нефропатией и 6 больных с гломерулонефритом, у которых с точностью 100 (, были определе20 ны повреждения отделов нефрона.

Формула изобретения

Способ определения повреждения отделов нефрона путем гистоэнзимохи25 мического исследования биойсийного материала, включающий оценку активности щелочной фосфатазы Ro числу гранул маркера. с последующим определением повреждения в сравнении.с контролем, о т л и30 ч а ю шийся тем, что, с целью повышения информативности способа за счет возможности дифференциального определения повреждения в дистальном и проксимальном отделах нефрона, дополнительно проводят

35 оценку активности сукцинатдегидрогеназы по числу гранул формазана и при снижении количества гранул формазана относительно контроля определяют повреждения в дистальном участке нефрона. а при наличии

40 . гранул маркера щелочной фосфатазы и снижении числа гранул формазана — повреждение проксимального отдела нефрона.