Способ получения лактоглобулина противоколипротейного коровьего для перорального применения
Реферат
Использование: в прикладной иммунологии, в частности в производстве лактоглобулина. Цель: повышение неспецифической активности препарата. Сущность изобретения: исходное сырье - молозиво сепарируют производят его пепсинизацию, полученную лактосыворотку фракционируют на холоде этанолом, осадок отделяют центрифугированием, затем осадок разводят, производят осветляющую фильтрацию, добавляют в раствор трилон Б и сорбит до конечной концентрации 0,05-0,15%, и 0,5-1,5% соответственно. Затем производят стерилизующую фильтрацию и дозированный розлив лактоглобулина во флаконы с последующей укупоркой препарата и контролем готового продукта. Положительный эффект: повышение неспецифической активности препарата (по индексу бактерицидности) до 2,9, в то время как по известному способу она составляет 1,5.
Изобретение относится к прикладной иммунологии, в частности к производству лактоглобулина. Цель изобретения повышение неспецифической активности препарата. Способ осуществляют следующим образом. Исходное сырье молозиво сепарируют, производят его пепсинизацию получают лактосыворотку. Фракционируют ее на холоде этанолом, центрифугируют с целью отделения осадка, затем осадок разводят, производят осветляющую фильтрацию, затем в раствор добавляют трилон Б до концентрации 0,05-0,15% и сорбит до концентрации 0,5-1,5% Затем производят стерилизующую фильтрацию и дозированный розлив лактоглобулина во флаконы с последующей укупоркой препарата и контролем готового продукта. Схема технологического процесса по предлагаемому способу в сравнении с прототипом дана в табл.1. П р и м е р 1. После операции растворения осадка и осветляющей фильтрации в 20 л раствора лактоглобулина добавляют 10 г порошкообразного трилона Б и 10 г порошкообразного сорбита. Смесь тщательно перемешивают и проводят операцию стерилизующей фильтрации. Затем осуществляют дозированный розлив лактоглобулина во флаконы, укупорку препарата и контроль готового препарата. При хранении стабилизированного препарата в течение 4 лет, препарат прозрачен, осадка нет. Активность антител сохраняется на уровне исходного: титр 1: 800. Содержание лизоцима и супероксидисмутазы так же на уровне исходного: лизоцим 25 мкг/мл, супероксидисмутаза 0,5 ед. П р и м е р 2. После операции растворения осадка и осветляющей фильтрации в 20 л 5%-ного раствора лактоглобулина добавляют 20 г порошкообразного трилона Б и 150 г порошкообразного трилона Б и 150 г порошкообразного сорбита. Смесь тщательно перемешивают и проводят операцию стерилизующей фильтрации. Затем осуществляют стадии "дозированный розлив лактоглобулина во флаконы", "Укупорка препарата" и "контроль готового препарата". При хранении стабилизированного препарата в течение 4 лет препарат прозрачен, осадка нет. Активность антител сохраняется на уровне исходного: титр 1:800. Содержание лизоцима и супероксиддисмутазы так же на уровне исходного: лизоцим 25 мкг/мл, супероксиддисмутаза 0,5 ед. П р и м е р 3. После операции растворения осадка и осветляющей фильтрации в 20 л 5%-ного раствора лактоглобулина добавляют 30 г порошкообразного трилона Б и 300 г порошкообразного сорбита. Смесь тщательно перемешивают и проводят операцию стерилизующей фильтрации. Затем осуществляют стадии "дозированный розлив лактоглобулина во флаконы", "укупорка препарата" и "контроль готового препарата". При хранении стабилизированного препарата в течение 4 лет, препарат прозрачен, осадка нет. Активность антител сохраняется на уровне исходного: титр 1:800. Содержание лизоцима и супероксиддисмутазы так же на уровне исходного: лизоцим 25 мкг/мл, супероксиддисмутазы 0,5 ед. Для подтверждения положительного эффекта предложенного способа было изучено бактерицидное действие препарата по отношению к грамположительной микрофлоре (патогенный штамм стафилококка); не входящей в состав колипротейной вакцины, используемой для получения противоколипротейного лактоглобулина. В бактерицидном действии на грамположительную микрофлору принимают активное участие неспецифический фактор защиты лизоцим. Бактерицидность препарата определяли по отношению к штамму St.aureus общепринятыми методами и выражали индексом бактерицидности (В). Параллельно в пробах препарата определяли количество лизоцима и фермента супероксиддисмутазы. Данные, подтверждающие положительный эффект предложения приведены в таблице. Срок хранения 4 г при +4oC. Как видно из таблицы 2 бактерицидность жидкого стабилизированного препарата по отношению к патогенному штамму стафилококка в 1,8-2 раза превышает бактерицидный эффект лиофилизированного препарата, что связано с сохранением в стабилизированном жидком препарате исходного количества неспецифического фактора защиты лизоцима. Таким образом, в жидком препарате, изготовленном по предложенному способу, по сравнению с прототипом возрастает неспецифическая активность по отношению к грамположительной микрофлоре, в частности к патогенному стафилококку.
Формула изобретения
Способ получения лактоглобулина противоколипротейного коровьего для перорального применения путем выделения молозивной лактосыворотки, фракционирования ее на холоде этанолом, отделения осадка центрифугированием, разведения осадка, осветляющей и стерилизующей фильтрации, отличающийся тем, что, с целью повышения неспецифической активности, после отбеливающей фильтрации в раствор лактоглобулина добавляют трилон Б и сорбит до концентрации 0,05 0,15% и 0,5 1,5% соответственно.РИСУНКИ
Рисунок 1MM4A Досрочное прекращение действия патента Российской Федерации на изобретение из-за неуплаты в установленный срок пошлины за поддержание патента в силе
Номер и год публикации бюллетеня: 31-2000
Извещение опубликовано: 10.11.2000