Способ получения средства, обладающего иммуностимулирующей активностью

Способ получения средства, обладающего иммуностимулирующей активностью

Реферат

 

Изобретение относится к медицинской биотехнологии и может быть использовано для получения иммуностимулирующих препаратов. Целью изобретения является повышение экономичности способа путем многократного замораживания - оттаивания лейкоцитов, отработанных после синтеза -интерферона, ультрафильтрации, стерилизирующей фильтрации и лиофильного высушивания. Предложенный способ позволяет использовать дополнительный источник сырья для получения средства, обладающего иммуностимулирующей активностью. 2 табл.

Изобретение относится к медицине, касается медицинской биотехнологии и может быть использовано для получения иммуностимулирующих препаратов. Цель изобретения - повышение экономичности способа. П р и м е р. Берут 500 мл клеточного осадка после синтеза виpусиндуцированного -интерферона. Проводят отделение лейкоцитов гемолизом эритроцитов путем прибавления 10 объемов 0,83%-ного раствора хлорида аммония при 4^оС в течение 10 мин и центрифугирования при 1500 об./мин 20 мин. Проводят трехкратную отмывку лейкоцитов 0,15 М раствором хлорида натрия. Получают 200 мл лейкоцитарной взвеси, содержащей 1010⁷лейкоцитов/мл. Количество жизнеспособных клеток при окраске 0,25% -ным раствором трипанового синего составляет не менее 80%. Далее проводят 10-кратное замораживание- оттаивание, удаление клеточного детрита центрифугированием при 2000 об./мин 20 мин, отделение низкомолекулярной фракции ультрафильтрацией на мембранах РТ6С с НПМВ 10 КД в тангенциальном режиме, стерилизующую фильтрацию и лиофилизацию. Выделяют мононуклеары из свежей (не более 4 ч после забора) гепаринизированной (10 ЕД/мл) крови, взятой не менее чем от 5 доноров. Концентрацию клеток доводят до 5-6 10⁶ мл. В пробирки закапывают по 1 мл взвеси мононуклеаров и 0,1 мл 1%-ной взвеси отмытых эритроцитов. В опытные пробирки вносят по 0,1 мл раствора. В течение 1 ч пробирки встряхивают на шейкере со скоростью 100 колебаний/мин, а затем сразу же производят подсчет розеткообразующих клеток. В табл.1 и 2 представлены данные по иммуностимулирующей активности предлагаемого способа. Как видно из приведенных результатов, средство, полученное по предлагаемому способу, оказывает стимулирующее влияние на клеточный иммунитет in vitro и при экспериментальной инфекции. Использование предлагаемого способа получения иммуностимулирующего средства с активностью фактора переноса позволяет привлечь дополнительный источник сырья, являющегося отходом производства -интерферона.

Формула изобретения

СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ СРЕДСТВА, ОБЛАДАЮЩЕГО ИММУНОСТИМУЛИРУЮЩЕЙ АКТИВНОСТЬЮ, путем многократного замораживания-оттаивания лейкоцитов, центрифугирования, ультрафильтрации надосадочной жидкости с порогом пропускания 10 КД, стерилизующей фильтрации и лиофильного высушивания, отличающийся тем, что, с целью повышения экономичности способа, используют отработанные лейкоциты после синтеза -интерферона.

РИСУНКИ

Рисунок 1, Рисунок 2

MM4A Досрочное прекращение действия патента Российской Федерации на изобретение из-за неуплаты в установленный срок пошлины за поддержание патента в силе

Дата прекращения действия патента: 07.03.2001

Номер и год публикации бюллетеня: 10-2003

Извещение опубликовано: 10.04.2003