Способ определения пирокатехина

Способ определения пирокатехина

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

Сущность изобретения: пробу обрабатывают резорцином и перекисью водорода в присутствии пероксидазы при рН 7,5 - 8,0 и измеряют измерение оптической плотности в кинетическом режиме. 2 табл.

„„5U„„1755137 А1 (я)5 0 01 N 21/78

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО.ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

iс „, с

\ (° с с.. "с с

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

2 с (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ПИРОКАТЕХИНА (57) Сущность изобретения: пробу обрабатывают резорцином и перекисью водорода в присутствии пероксйдазы при рН 7,5 — 8,0 и измеряют измерение оптической плотности в кинетическом режиме. 2 табл.

1. (21) 4837697/04 (22) 08.06;90 (46) 15.08.92. Бюл. М 30 (71) Научно-исследовательский институт би; .. ологйи при Иркутском государственном университете (72) М; Н. Саксонов,; И. Болмасова и Д. И.

Стом (56) Ууве Кирсо Определение различнйх фенолов реакцией с 4-амино-антипиридином. изв. AH 3CCP, хим, геол., 1977, 26. 22.

Коренман И. M. Фотометрический"айализ. M. Химия, 1970, с. 174 — 182.

Изобретение относится к аналитиче- предназначен для определения индивидуской химии или прикладной биологии, а альных фенолов и разные фенолы дают одиименно к способам определения йирокате- наково окрашенные продукты конденсации. хина в смеси, и может быть использовано Цель изобретения — повышение селекпри анализе сточных вод, при определенйй" тивности"определения, содержания пирокатехина в резорцине.: Поставленная цель достигается тем, что

Известен способ определения микроко- в способе, основанном на обработке анали личеств фенолов в воде, основанный на ре- зируемой пробы химическим реагентом и акции конденсации 4 -аминоантипирина с . фотометрирование, анализируемую пробу фенолами. обрабатывают резорцином; перекисью воНедостатком известного способа явля- дорода в присутствйи пероксидазы при рН ется невозможность определить отдельно . 7,5 — 8,0 и измеряют изменение оптической пирокатехин, если он находится в смеси с плотности в кинетическом режиме. другими фенолами, так как с разными фено- . Способосуществляютследующимобразом. лами образуются одинаково окрашенные Определяют концентрацию пирокате-. продукты конденсации., хина. К анализируемой пробе добавляют . Наиболее близким к изобретению по фосфатный буфер,:водные растворы резортехнической сущности и достигаемому ре- цина, пероксидазы и пероксида водорода, зультату является способ определенйя пи- Смесь быстро перемешивают и измеряют ее рокатехина, основанный на обработке оптическую плотность (А) через определенанализируемой пробы химическим реаген=" " ные промежутки времени Т в течение 1 — 2 том, содержащим фенолы с последующИМ "- мин. По рассчитываемому отношению измефотометрированием полученного раствора, нения оптической плотности (Ь А ) во вреНедостатком известного способа явля- . мени(ЛТ) судят о концентрации резорцина ется низкая селективность, так как способ в пробе.

1755137.I

Пример 1.

В кювету вносят 1,6 мл фосфатного буфера рН 7,75; 1,0 мл резорцина 20 мМоль;

1,0 мл пирокатехина, содержащего I мкг вещества; 0,2 мл пероксидазы с концентра- 5 цией 5 мкг/мл, 0,2 мл 140 м Моль/л раствора пероксида водорода, быстро перемешивают смесь и измеряют изменение оптической плотности во времени при А= 460 нм.

T> = 15 с, Т = 45 с, Л Т =- 45. с — 15 с = 30 с 10

A) = 0,014, А2 = 0,053 A А = 0,053 — 0,014 =

=0,039

Хт 100 = 7,8

AA

Пример 2. Определяют концентра- 15 цию пирокатехина. В кювету вносят 1,6 мл фосфатного буфера рН 7,75; 1,0 мл резорцина 20 мМоль/л; 1,0 мл пирокатехина, содержащего 1 мкг вещества; 0,2 мл пероксидазы с концентрацией 5 мкг/мл; 0,2 мл 140 20 мМоль/л раствор пероксида водорода; быстро перемешивают смесь и измеряют изменение оптической плотности во времени при iL= 460 нм.

T> = 15 с, Т2 = 45 с, 25

AT = 45 с — 15 с = 30 с = 0,5 мин

А 1 = 0,014, А 2 = 0,053, Ь А = 0,053 — 0,014 = 0,039

XT

100 =- 7,8

Пример 3. Определение проводят аналогично примеру 1, за исключением того, что рН 8,0, концентрация пероксида водорода 180 мМоль/л, резорцина 50 35 м Моль/л и кинетику снимают при 1= 470 нм, Т1 = 15 с, Tz = 45 с, Л Т = 30 с = 0,5 мин

А) = 0,012, Az = 0,050, ЛА = 0,038

XT

100 = 7,6

Пример 4. Определение проводят аналогично примеру 1, за исключением того, что рН = 7,5, концентрация пероксида водорода 100 мМоль/л и резорцина 15 45 мМоль/л, измерения проводят при it=450 нм.

T)=15с, T2=45с AT=О5мин

А1 = 0,012, A2 = 0,047 ЛA = 0,035

50 -(° 100 = 7,0

ЛА

ЛT в минутах, AA — в ед, оптической плотности (ЛА/ЛТ) 100 — вусловныхединицах.

Последовательность операций при внесении компонентов реакционной смеси растворов пробы, резорцина, буфера не имеет значения. Пероксидазу и пероксид водорода вносят последними, Пероксид водорода запускает реакцию, и с момента его введения начинают отсчет времени, Пример 5. Все значения, как в примере 1, но содержание пирокатехина 6 мкг. Последовательность внесения компонентов реакционной смеси: растворы буфера, резорцина, пробы пирокатехина, пероксидазы, пероксида водорода.

T> = 15 с, Tz = 75 с, AТ = 60 с = 1 мин

А) = 0,026, А2 = 0,178 A A = A2 — А1 =

= 0,178 — 0,026 = 0,152 (Л А/ ЛТ) 100 = 15,2

Пример 6. Все значения, как в примере 4, но последовательность внесения компонентов смеси другая; растворы пробы, резорцина, буфера, пероксидазы, пероксида водорода, T = 15 с, Tz 75 с A Т = 60 с = 1 мин

A1 = 0,026, A2 = 0,179, A А = 0,179 — 0,026 =

=0,153 (ЛА/ AT) 100 = 15,3

В данном способе реакцию окисления. смеси фенолов катализирует пероксидазная система (пероксидаза плюс пероксид водорода). Результаты представленные в таблицах и примерах, получены в опытах, где одним из компонентов реакционной смеси — 0,2 мл раствора пероксидазы с концентрацией 5 мкг/мл, Для способа это оптимальная концентрация пероксидазы. При более низких концентрациях падает чувствительность метода, при более высоких концентрациях уменьшается линейнйй участок кинетической кривой нарастания окраски. При увеличении концентрации пероксидазы 5 мкг/мл, линейный участок кинетической кривой становился менее 25 сек (для пирокатехина с концентрацией 1 — 2 мкг/мл) и ухудшалась воспроизводимость опытов.

Предложенный способ позволяет провести прямое определение микроколичества пирокатехина в присутствии высоких концентраций резорцина (при соотношении пирокатехин: резорцин до 1: 1000). Данные по преимуществу предложенного способа— высокая селективность определения пирокатехина — представлены в табл. 2.

Формула изобретения

Способ определения пирокатехина, включающий обработку анализируемой пробы химическим реагентом и фотометрированием, отличающийся тем, что, с целью повышения селективности определения, анализируемую пробу обрабатывают резорцином и перекисью водорода в.присутствии пероксидазы при рН 7,5 — 8,0 и измеряют изменение оптической плотности в кинетическом режиме.

1755137

5.... 6

Таблица 1

Ф

Зависимость скорости индикаторной реакции от концентрации пирокатехина

Кон ент а ия пи окатехина мкг/мл

1 2 4 6 8 18 1 16

Кон ент а ия езо ина, мкг/мл

0 0 0 0 0 0 1000 1000

7,8 10,8 13,8 15;4 16,8 19,6 7,6 19,8... Таблица 2.Ъ

Составитель С.Хованская

Техред M,Ìoðãåíòàë Корректор Т.Вашкович

Редактор М.Товтин

Производственно-издательский комбинат "Патент", r. Ужгород, ул.Гагарина, 101

Заказ 2887 . Тираж : Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5