Способ определения концентрации белка в молоке

Способ определения концентрации белка в молоке

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

Использование: в медицине, в частности в акушерстве и медицинской биохимии для определения концентрации белка в молоке . Сущность изобретения: молоко разбавляют раствором бромфенолоього синего, затем измеряют интенсивность флуоресценции в области 540 нм, индуцированной лазерным излучением длиной волны 337,1 нм, мощностью 2-3 мВт, строят калибровочную кривую, по кбторой определяют концентрацию белка в молоке. Способ позволяет проводить исследование в течение 2 мин. 1 табл., 1 ил.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (5!)5 G 01 и 33/48

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

1 . (21) 4798521/14 (22) 05.03.90 (46) 15.08.92. Бюл. М 30 (71) Ростовский научно-исследовательскйй институт акушерства и йедиатрии (72) А.А.Кожин и В.П,Шабаев (56) Здравоохранение Белоруссии, 1986.

М 4, с. 49-51. (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ КОНЦЕНТРАЦИИ БЕЛКА В МОЛОКЕ (57) Использование: в медицине, в частно- . сти в акушерстве и медицинской биохимии

Изобретение относится к медицине, в частности к акушерству и медицинской биохимии, и может быть использовано для определения концентрации белка в женском и коровьем молоке.

Известен способ определения концентрации белка в молоке путемизученияфлуоресценции при 540 нм пробы молока, разбавленной дистиллированной водой в соотношении 1:20, Однако данный способ недостаточно точен.

Наиболее близок к предлагаемому способ определения белка, жира и углеводов, заключающийся в том, что пробу молока обрабатывают смесью хлороформа и метанола (реактив Фолча), подвергают центрифугированию и к полученному осадку добавляют биуретовый реактив. После перемешивания смесь оставляют на 30 мин при комнатной температуре для образования комплекса сине-фиолетового цвета, после чего проводят фотометрию против биуретового реактива на фотоэлектроколориметре (ФЭК) при зеленом светофильтре.

Я2, 1755196 À1

2 для определения концентрации белка в молоке. Сущность изобретения: молоко разбавляют раствором бромфенолоового синего, затем измеряют интенсивность флуоресценции в области 540 нм, индуцированной лазерным излучением длиной волны

337,1 нм, мощностью 2-3 мВт, строят калибровочную кривую, rio кбторой определяют концентрацию белка в молоке. Способ позволяет проводить исследование а"течение

2 мин. 1 табл., 1 ил.

Недостатками известного способа являются сложность и продолжительность выполнения, Цель изобретения — упрофенйе и сокращение времени исследования.

Способ осуществляют следующим образом.

Для проведения исследовайия молока (женского или от сельскохозяйственных животных) пробу молока в количестве 0,1 мл помещают в кварцевую кЮвету и разбавляют 2 мл водного раствора бромфенолового синего (БФС) в концентрации 0,001, Затем кювету с полученным раствором устанавливают в держатель флуоресцентной установки, состоящей из источника лазерного излучения (ЛГИ-21) и детектора флуоресценции. Возбуждение .флуоресценции осуществляют лазерным светом с длийой волны 337,1 нм, мощностью 3 мВт в течение

60 с, Одновременно с помощью автоматического злектронного самописца типа КПС-4 или стрелочного индикатора регистрируют ийтенсивность флуоресценции в области длины волны 540 нм. Пик интенсивности на

1755196 длине волны 540 нм указывает на относительное содержание белка в пробе молока, Для выражения количественного содержания белка в молоке в весовых единицах или процентном отношении строят стандартную (калибровочную) кривую, показывающую зависимость интенсивности флуоресценции; например, альбумина от его концентрации в водном растворе в пределах 1-10 г .

Пример 1. В кварцевую кювету помещают каплю женского молока объемом 0,1 мл и добавляют 2 мл 0,0017-ного водного раствора БФС. Далее проводят облучение полученной смеси лазерным излучением (длина волны 337, 1 нм, мощность 3 мВт) в течение 60 с и одновременно регистрируют интенсивность флуоресценции при длине волны 540 нм. Полученные значения интенсивности флуоресценции переносят на калибровочную кривую, построенную для альбумина (см. чертеже). По калибровочной кривой установлено содержание белка в исследуемой пробе молока 3,1 .

Пример 2. В кварцевую кювету поме- щают каплю коровьего молока, поставляемого на молочную кухню, и добавляют к ней

2 мл 0,001 -ного водного раствора БФС, проводят облучение полученной смеси лазерным излучением (длина волны 337,1 нм, мощность 3 мВт) в течение 60 с и одновременно регистрируют интенсивность флуоресценции при длине волны 540 нм. По калибровочной кривой определяют концен- трацию белка в коровьем молоке. она равна

2,2 r

Данные, полученные предлагаемым способом, совпадают с результатами биохимического анализа исследуемых проб на белок и с данными по известному способу, Они представлены в таблице.

Однако время, затрачиваемое íà опре5 деление концентрации. белка в молоке известными методами, составляет около 60 мин, тогда как при использовании предлагаемого способа подобное исследование занимает до 2 мин.

10 Всего проведено 150 исследований проб женского и коровьего молока, показавших высокую достоверность полученных ре- . зультатов при минимальных затратах времени на исследование. Это позволяет с

15 высокой производительностью проводить определение концентрации белка в молоке. при массовом обследовании рожениц или в условиях домашней кухни для оценки рациона питания новорожденных; э также в мо20 лочной промышленности на поточной системе, Формула изобретения

25 Способ определения концентрации белка в молоке путем исследования пробы молока с последующим расчетом содержания белка по калибровочной кривой, о тл ич а ю шийся тем, что, с целью упрощения

30 способа и сокращения времени исследования, пробу молока разбавляют 0,01 -ным водным раствором бромфенолового синего, воздействуют на пробу лазерным лучом с длиной волны 337, 1 нм и мощностью 2-3 мВт, 35 регистрируют интенсивность флуоресценции при длине волны 540 нм и проводят расчет концентрации белка по калибровочной кривой.

1755196 (рт,к erR)

f00 1 ъ М

Ъ, я ,ю 1 гю и

d d Ф(г/) Составитель В.Шабаев

Техред М.Моргентал Корректор ВЯетраа

Редактор А.Огар

Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул.Гагарина, 101

Заказ 2890 . Тираж Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета. по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035. Москва, Ж-35. Раушская наб., 4/5