Способ получения иммуностимулятора

Способ получения иммуностимулятора

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

Используют изобретение в области ветеринарной иммунологии, для получения иммуностимулирующего средства. Цель изобретения состоит в повышении эффективности иммуностимулятора. При этом используют а качестве ингредиентов антисептик АСД. аскорбиновую кислоту, минеральное масло и эмульгатор, причем предварительно готовят водную фазу антисептика АСД и аскорбиновой кислоты при рН 6,0-7,5, а затем масляную фазу путем разогревания минерального масла и эмульгатора с последующим эмульгированием обеих фаз. 1 табл.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (si)s А 61 К 35/00

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4785772/15 (22) 20.12.89 (46) 07.09.92, Бюл, N 33 (71) Научно-исследовательский ветеринарный институт Нечерноземной зоны РСФСР (72) П.Е.Игнатов, А.И.Федоров, А.В,Горбатов, Д,В.Березин, Г.И,Григорьева и B.Â,Ño÷íåâ (56) Воробьев А.А., Васильев Н.Н. Адьюванты. M.: Медицина, 1969, с, 17 — 19. (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ИММУНОСТИ. МУЛЯТОРА

Изобретение относится к области ветеринарной иммунологии. в частности к способам получения иммуномодулирующих препаратов.

Цель изобретения — повышение эффективности иммуностимулятора, Способ иллюстрируется следующим образом.

Пример 1. Приготовление препарата.

Готовят водную фазу, при этом 2,5 мл антисептика АСД (фракция 2) разводят в

10 мл физиологического раствора, добавляют аскорбиновую кислоту до рН 6,0-7,5, стерилизуют фильтрованием. Затем готовят масляную фазу — к 30 лл вазелинового масла добавляют 8 г ланолина, смесь автоклавируют при 0,5 атм в течение 30 мин. В масляную фазу вводят водную фазу. смесь эмульгируют энергичным встряхиванием, Готовый препарат представляет собой стойкую светло-желтую эмульсию... Ж 1759424 А1 (57) Используют изобретение в области ветеринарной иммунологии. для получения иммуностимулирующего средства. Цель изобретения состоит в повышении эффективности иммуностимулятора. При этом используют в качестве ингредиентов антисептик АСД, аскорбиновую кислоту, минеральное масло и эмульгатор, причем предварительно готовят водную фазу антисептика АСД и аскорбиновой кислоты при рН 6,0-7,5, а затем масляную фазу путем разогревания минерального масла и эмульгатора с последующим эмульгированием обеих фаз. 1 табл.

Пример 2. Определение иммуностимулирующей активности препарата с рН 6,.5 водной фазы.

Определяли уровень Т-лимфоцитов в крови 2-3-месячных телят до и после обработки их иммуностимулятором, полученным по примеру 1. Лимфоциты выделяли в градиенте плотности фиколлверографина, отмывали, доводили до концентрации (2-3) х 10 на 1 мл затем к 0,2 мл взвеси

6 лимфоцитов добавляли 0,2 мл 0,5 -ной взвеси эритроцитов барана, инкубировали, центрифугировали, для фиксации образовавшихся розеток добавляли 0,1 мл

3 7-ного раствора гл ютаро ваго ал ьде гида.

Через 20 мин фиксацию прекращали добавлением 5 мл холодной и дистиллированной воды. Надосадочную жидкость удаляли, осадок ресуспендировали в 0,2 мл воды, наносили на предметное стекло, высушивали, фиксировали и окрашивали азур-П-зозином. В полученном препарате подсчитыва1759424

Количество Т-лимфоцитов

Введение иммуностимулятора

Количество живо тных в группе

Количество лизоцимэ, мкг/мл

Коли зэнпоэ исх. конеч. исх. конеч. исх

Азрозольное

Подкожное

Контроль (без препарата) 41,3+6,8 40,0 «-8 4 84+6 6

21,2 4,6

14+5

12+6

20,6+6,2

40.4 «:8,9 39:8,3

89+7,2

20,8 5,9 39Ы0,8

39 = -1.1,4

2 1,3 «-5,7

12 «-6

Составитель M. Белоусова

Техред M,Mîðãåíòàë Корректор С. Пекарь

Зэкээ 3133 Тираж Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", r. Ужгород, ул.Гагэрина, 101 ли количество розеткообразующих лимфоцитов в процентах.

Результаты исследований приведены в тэ ице.

Для определения количества лизоцимэ 5 в крови телят применяли турбидиметрический метод. В качестве субстрата использовали эцетоновый порошок. К 1,5 мл взвеси субстрата (10 мг в 20 мл) добавляли 1,5 мл сыворотки крови, разведенной в 10 раз. 10

Смесь и««кубировэли 30 мин при 37 С. Затем проводили спектрофотометрию суспензии при длине волны 540 нм, В качестве контроля испольэовали такую же суспензи«о, но не инкубированную. Для определе- 15 ния содержания лизоцима находили разницу зкстинций опытной и контрольной проб, по которой на калибровочной кривой устанавливали количество лизоцима.

Оценку функциональной актив««ости 20 нейтрофилов давали по реакции восстановления нитросинего тетрэзолия (НСТ-тест), В две лунки планшета вносили по 0,05 мл стабилизированной крови Зэтем в первую контрольную лунку добавля-ли 0,0025 мл 25 иэотонического буфера, э во вторую. с исследуемой кровью, добавляли по 0,025 мл

0,1 g -ной взвеси зимозана. Затем в обе лупки добавляли по 0.025 мл раствора НСТ, перемешивали и инкубировали, готовили и окрашивали мазки, Учет реакции проводили на основании анализа нейтрофилов, содержэщих темно-синие отложения формазанэ.

Подсчитывали 100 нейтрофилов, результаты выражали в процентах, Формула изобретения

Способ получения иммуностимуляторэ. включающий смешивание ингредиентов с различной гидрофобностью, о т л и ч э юшийся тем. что. с цель«о повышения эффективности иммуностимуляторэ, в качестве ингредиентов использу«от энтисептик АСД, аскорбиновую кислоту, минеральное масло и змульгатор, причем предвэрительно готовят водную фазу антисептика АСД и аскорбиновой кислоты при рН 6,0-7,5, э затем масляную фазу путем разогревания минерального масла и змульгатора с последующим змульгированием обсих фаэ,