Способ определения пиразинамида в сыворотке крови
Иллюстрации
Показать всеРеферат
Использование: аналитическая химия, медицина, анализ лекарственных веществ в биологических жидкостях. Целью изобретения является упрощение способа. Сущность изобретения; сыворотку, предварительно отцентрифугированную и профильтрованную через мембранный фильтр с диаметром пор 0,12 мкм, вводят непосредственно в колонку , заполненную сорбентом Диабонд С- 8, а в качестве элюента используют 0,4 - 0,7 м раствор сернокислого натрия Использование предложенного способа позволяет сделать более доступным проведение ВЭЖХ-анализа пиразинамида в сыворотке крови, дает возможность обеспечить индивидуальный подход к лечению пиразинамидом на основе лекарственного мониторинга.
СОЮЗ СОВЕТСКИХ
СОЦИАЛИСТИЧ СКИХ
РЕСПУБЛИК (я)5 G 01 N 33/49
ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ
ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ
ПРИ ГКНТ СССР, Д!= .3 (Л
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ ©
Ф
М
4 (21) 4789129/14 (22) 15.11.89 (46) 07.10.92. Бюл. М 37 (71) Московский научно-исследовательский институт туберкулеза (72) В.В,Онищенко и А,И.Сливкин (56) Chromatogr. biomed Арр1, 1987, ч,413, р.342 — 346. (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ПИРАЗИНАМИДА В СЫВОРОТКЕ КРОВИ (57) Использование: аналитическая химия, медицина,.анализ лекарственных веществ в биологических жидкостях. Целью изобретения является упрощение способа, Сущность
Изобретение относится к медицине и аналитической химии и может быть использовано в клинической фармакологии для изучения фармакокинетики пиразинамида при различных схемах лечения.
Цель изобретения — упрощение способа.
На чертеже представлена хроматограмма сыворотки крови, содержащей пиразинамид 50 мкг/мл.
Способ осуществляют следующим образом.
Для анализа отбирают пробы крови у больного из пальца в объеме 0,3 — 0,5 мл.
Центрифугирование в пластиковой микропробирке объемом 500 мкл проводят в течение 20 мин со скоростью 2000 об/мин, для разделения сыворотки и форменных элементов крови.
100 мкл сыворотки помещают в патрон с фильтром, вставленный в микропробирку типа "Эппендорф", Патрон с фильтром представляет собой пластиковый цилиндр высо„„ Д „„1767427A 1 изобретения, сыворотку, и редварител ь но отцентрифугированную и профильтрованную через мембранный фильтр с диаметром пор 0,12 мкм, вводят непосредственно в колонку, заполненную сорбентом Диабонд С8, а в качестве элюента используют 0,4—
0,7 м раствор сернокислого натрия. Использование предложенного способа позволяет сделать более доступным проведение
ВЭЖХ-анализа пиразинамида в сыворотке крови, дает возможность обеспечить индивидуальный подход к лечению пиразинамидом на основе лекарственного мо нито ри í ra. той 20 мм и диаметром 13 мм, который вставляют в микропробирку типа "Эппендорф". Патрон снабжен с одной стороны решеткой, на которую помещают мембрану (фильтр) с диаметром пор 0,2 мкм фирмы
"Синпор", Мембрану уплотняют с помощью силиконового кольца и втулки, куда помещается проба с сывороткой. Втулка закрывается крышечкой, и центрифугируют при скорости 4000 об/мин в течение 10 мин для очистки пробы от микрочастиц, которые могут привести к повреждению колонки.
Пробу в объеме 4 мкл с помощью иглыинжектора хроматографа "Милихром" наносят на колонку, заполненную сорбентом
Диабонд С-8, и злюируют 0,4 м раствором йа2504, Хроматографические условия анализа: скорость потока элюента — 50 мклl мин, длина волны детектирования 260 нм.
Обсчет хроматограмм проводят с использованием микро-ЭВМ ДВК-2М, сопряженной с хроматографом "Милихром" при помощи программы "CHROM" Орловского
1767427
Формула изобретения
Способ определения пиразинамида в сыворотке крови, включающий обработку
Составитель С,Рыбалкин
Техред М,Моргентал Корректор С.Пекарь
Редактор С.Кулакова
Заказ 3545 Тираж Подписное
ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР
113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5
Производственно-издательский комбинат "Патент", г, Ужгород, ул,Гагарина, 101
НПО "Научприбор". Программа позволяет в автоматическом режиме вычислять высоты и площади хроматографических пиков и производить вычитание фона.
Концентрацию препаратов сыворотки определяют путем сравнения с калибровочной кривой.
Высоту пиков на хроматограмме определяют с помощью компьютерных средств. сыворотки с последующим разделением образца на фракции с помощью высоКоэффективной жидкостной хроматографией и расчетом содержания пиразинамида по
5 хроматограмме, отличающийся тем, что, с целью упрощения способа, обработку сыворотки проводят центрифугированием в пробирке с мембранным фильтром "Синпор", полученный образец супернатанта
10 подвергают разделению на колонке с сорбентом Диабонд С-8, при этом элюирование проводят 0,4 — 0,7 M раствором сернокислого натрия.