Устройство для культивирования энтомопатогенных нематод родов nеоарlестаnа и нетеrоrнавdiтis

Устройство для культивирования энтомопатогенных нематод родов nеоарlестаnа и нетеrоrнавdiтis

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

Изобретение относится к защите растений от насекомых-вредителей биологическим методом. Сущность изобретения: устройство для культивирования энтомопатогенных нематод состоит из блока поддонов для заражения насекомых нематодами 1, блока поддонов для выращивания и сбора нематодной культуры. Дно поддона выстилают бумажным фильтром и двумя слоями металлической сетки для размещения и фиксирования насекомых. Сверху поддон закрывают крышкой с отверстиями, которая скрепляется с поддоном зажимами. Собранный поддон помещается в металлический поддон большего размера и закрывается крышкой. Поддон для выращивания и сбора нематод выполнен из металла.имеет патрубок с краном 15 в центре дна, которое выполнено с наклоном к центру. В поддон помещена металлическая подставка 12 с отверстиями , покрытая марлей 13. Сверху поддон закрыт крышкой 14. 3 ил. (Л С

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

„3 15 фиг 3

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4804553/15 (22) 20,03.90 (46) 15.10.92. Бюл. ¹ 38 (71) Всесоюзный научно-исследовательский институт защиты растений (72) Л.Г.Данилов и Е.В.Карпова (56) Оойуз r, I.U lhompson, YE Canturell А

technIque for the mass propogation of the

DD-136 nematode I Insect Райс!, 1964, рр.

417-422, (54) УСТРОЙСТВО ДЛЯ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ

Э НТОМОПАТОГЕ Н Н ЫХ Н ЕМАТОД РОДОВ

NEOAPLECTANA И HETегоRHABDITIS (57) Изобретение относится к защите растений от насекомых-вредителей биологическим методом. Сущность изобретения: устройство для культивирования энтомопа.ЫЛ и 1768096 А1 тогенных нематод состоит из блока поддонов для заражения насекомых нематодами

1, блока поддонов для выращивания и сбора нематодной культуры. Дно поддона выстилают бумажным фильтром и двумя слоями металлической сетки для размещения и фиксирования насекомых. Сверху поддон закрывают крышкой с отверстиями, которая скрепляется с поддоном зажимами. Собранный поддон помещается в металлический поддон большего размера и закрывается крышкой. Поддон для выращивания и сбора нематод выполнен из металла, имеет патрубок с краном 15 в центре дна, которое выполнено с наклоном к центру. В поддон помещена металлическая подставка 12 с отверстиями, покрытая марлей 13. Сверху поддон закрыт крышкой 14. 3 ил.

1768096

Изобретение относится к защите растений от насекомых-вредителей биологическим методом и может быть использовано для разведения энтомопатогенных нематод-паразитов насекомых. 5

Известные устройства для культивирования немато;цсостоят иэ чашек Петри, водных ловумшебк; ЙреДста ляющих собой перевЪрйуту3б "вверх. дн чашку Петри, обе3нутуюе фильтром и по ещенную в пасу- 10 ду беаьшееа размерафе емчук Г.B., 1986, Методические рекомендации по лабораторному культивированию на пчелиной огневке (Galleria mellonella 1..) и применению энтомопатогенных нематод Neoapiectana 15

carpocapsae st. agriotos, 19 с.; Следзевская

Е.Н., Сонин M.Ä., Блинова С.Л. Ларченко

Т,Т., 1987. Методические указания по"массовому разведению Hetегоrhabdit! s

bacteriophora на вощинной моли, 13 с.). 20

Однако, использование этих устройств требует больших затрат ручного труда.

Наиболее близким из известных, принятым за прототип, является устройство, представляющее собой чашку диаметром 9 25 см, дно которой выстилают фильтровальной бумагой и сверху помещают насекомых (около 50 экземпляров), затем на фильтр пипеткой наносят водную суспензию нематод, Чашки закрывают крышкой и ставят в 30 термостат с температурой 25 С. После зара>кения гусениц выбирают и по одной пе реносят на водную ловушку. В конце развития нематоды мигрирук>т из насекомых и скапливаются в воде на дне сосуда, 35

Затем воду с нематодами сливают и переносят нематод на хранение (Dutky S.R, J.V, Tompson, J.Å. Cantweil. А technique for the

mass propogation of the DD-136 nematode, J, Insekt Pathol., 1964, р,р. 417-421). 40

Однако использование данной системы культивирования очень трудоемко и малопроизводительно, Особенно трудоемки процессы выборки зараженных насекомых из фильтрсвальной бумаги и раскладки трупов 45 на водную ловушку. Кроме того, во время сбора нематодной культуры значительное количество инвазионных личинок остается на фильтровальной бумаге. Ин вазионные личинки активны только при достаточном содержа- 50 нии кислорода в среде их обитания, а вода покрывающая инвазированные трупы препятствует поступлению кислорода внутрь тела насекомых, Все эти недостатки устраняются пред- 55 лагаемым изобретением.

Цель изобретения — повышение производительности труда при культивировании нематод на насекомых и качества получаемого биоматериала. Цель достигается тем, что устройство для культивирования энтомопатогенных нематод родов Neoaplectana и Hetегоrhabditis содержит камеры заражения насекомых в виде поддонов с крышкой и фильтровальной бумагой, выращивания и сбора в виде поддона и хранения, дополнительно камера заражения снабжена поддоном для размещения фильтровальной бумаги, установленными сверху металлическими сетками для размещения на ней насекомых и фиксирования насекомых соответственно, дополнительной крышкой с отверстиями и крепежными зажимами, а камера выращивания и сбора снабжена свободно установленной подставкой с отверстиями и герметичной крышкой, причем дно камеры выполнено с наклоном к центру, в котором установлен сливйой патрубок.

На фиг. 1 изображено устройство для массового разведения нематод на насекомых, обв,ий вид; на фиг. 2 — поддон для заражения; на фиг. 3 — поддон для культиви- рования и сбора нематодной культуры.

Устройство состоит из блока поддонов для заражения насекомых нематодами 1 (фиг. 1), блока поддонов для выращивания и сбора нематодной культуры 2 (фиг. 1), составляющие камеру.

Поддон для заражения насекомых выполнен из металла 3 (фиг. 2). Дно поддона выстилает бумажный фильтр 4 и два слоя металлической сетки 5 и 6. Сверху поддон закрывает металлическая крышка с отверстиями 7, которая скрепляется " поддоном зажимами 8. Собранный поддон помещается в металлический поддон бсльшего размера 9, и закрывается крышкой 10, Поддон для выращивания и сбора нематадной культуры выполнен из металла 11 (фиг. 3) и снабжен патрубком с краном i5 вцент,ре дна, В поддон помещена металлическая подставка 12 с отверстиями (50-100 мм) покрытая марлей

13. Сверху поддон закрыт крышкой 14.

Устройство работает следующим образом, Гусениц большой вощинной моли массой свыше 100 мг помещают в холодильник с температурой 2-5 С, Спустя 2-3 ч их переносят из холодильника на металлическую сетку в поддон для заражения фиг.2. В один поддон помещают около 2 тысяч гусениц.

Требуемое количество насекомых устанавливают путем выборочного инвазирования взвешивания 30-50 гусениц с последующим расчетом средней массы одного насекомого и, соответственно, общей массы 2 тысяч насекомых, Оптимальные условия для развития микропопуляции нематод внутри насекомого создаются при заражении гусениц доза1768096 ми нематод, при которых в насекомое проникает от 80 до 150 инвазионных личинок.

Таким образом, для заражения двух тысяч гусениц потребуется от 1 до 2 млн инваэионных личинок. Необходимое количество нематод получают путем отбора определенного объема от маточной суспензии.

Насекомых заражают нематодами непосредственно в поддоне заражения фиг. 2.

Дно поддона 3 выстилают бумажным фильтром 4 и металлической сеткой 5, на которую помещают насекомых. С помощью ручного опрыскивателя гусениц обрабатывают водной суспензией нематод, расходуя на один поддон 40-60 Mll суспензии. Обработанных насекомых сверху накрывают металлической сеткой 6 и крышкой 7, которую затем соединяют с дном при помощи зажимов 8.

Собранный поддон с насекомыми в горизонтальном положении помещают в другой поддон 9, накрывают крышкой 10 и переносят в блок поддонов заражения 1, который содержат при температуре 5-28 С. Через двое суток трупы зараженных насекомых из поддона заражения путем встряхивания переносят в поддон разведения фиг. 3 на марлю 13, покрывающую по всей площади металлическую подставку 12, помещенную в металлический поддон 11, который затем накрывают крышкой 14. После этого поддон переносят в блок поддонов разведения 2, который содержат при температуре 2528 С, Через двое суток в поддоны разведения заливают водопроводную воду с таким расчетом, чтобы ее уровень не доходил до сетки с гусеницами по высоте на 0,3-0,5 см.

На 7-9 сутки начинается миграция инвазионных личинок из зараженных насекомых.

Нематоды скапливаются на поверхности трупов и марле в виде светлого налета. С помощью опрь скивателя нематод смывают водой, при этом опрыскиватель держат на таком расстоянии от сетки, чтобы не допускать повреждения трупов насекомых и смещения их в общую массу, Водную суспензию из поддона сливают через сливное отверстие 15 и переносят в сосуды на хранение. После слива нематод поддон закрывают крышкой. Последующие смывы нематод проводят по мере накопления инвазионных личинок на поверхности трупов насекомых. Смывы прекращают, когда нематоды обнаруживаются в смывной воде лишь в небольших количествах. Остатки трупов насекомых вместе с марлей удаляют из поддона разведения, а сетки и поддоны дезинфицируют автоклавированием.

Нематод хранят в виде водной суспензии и в поролоновой губке с постоянной подачей воздуха от компрессора при температуре от 2 до 5 С, Для длительного хранения в виде водной суспензии допускается концентрация до 50 тысяч инвазионных личинок в 1 мл. При большей концентрации, до

5 100 тысяч нематод в 1 мл, следует менять воду в емкости, через каждые 10-15 дней.

При подаче воздуха в емкости, трубопровод от компрессора пропускаютчерез пробкудо дна емкости, чем достигается равномерное

10 перемешивание и аэрация водной суспензии нематод. От одного компрессора воздух можно подавать в несколько емкостей, соединенных между собой гибкими трубопроводами. Хранение нематод в поролоне

15 имеет некоторое отличие от хранения личинок в водной суспензии. Для этих целей поролон нарезают кусками объемом от 2 до

6 куб. см. В 100 г губки можно хранить до

500 млн нематод (Bedding, 1984).

20 Описанные выше способы позволяют хранить нематод в течение года без потери жизнеспособности паразита.

Использование предлагаемой линии позволяет значительно снизить стоимость

25 массовой культуры нематод.

При новом способе размножения себестоимость нематод уменьшается в 10 раз.

Один техник при первом способе размножения нематод затрачивает 4 рабочих дня для

30 получения 100 млн инвазионных личинок, при использовании предлагаемой линии на производство такого же количества нематод затрачивается 3 ч.

Ке изменяя существа изобретения, ко35 личество камер заражения и выращивания нематод может быть разным и определяется масштабами производства.

Формула изобретения

40 Устройство для культивирования энтомопатогенных нематод родов Neoaplectana и Hetегоrhabditis, содержащее камеры заражения насекомых в виде поддона с крышкой и фильтровальной бумагой, выращивания и

45 сбора в виде поддона и хранения, о т л ич а ю щ е е с я тем, что, с целью повышения производительности и качества получаемого биоматериала, камера заражения снабжена дополнительным поддоном для

50 размещения фильтровальной бумаги, установленными сверху металлическим сетками для размещения на ней насекомых и фиксирования насекомых соответственно, дополнительной крышкой с отверстиями и

55 крепежными зажимами, а камера выращивания и сбора снабжена свободно установленной подставкой с отверстиями и герметичной крышкой, причем дно камеры выполнено с наклоном к центру, в котором установлен сливной патрубок.

1768096

Составитель Л.Данилов

Техред M.Ìoðãåíòàë Корректор З,Салко

Редактор

Заказ 3595 Тираж Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул.Гагарина, 101