Способ определения активности фолликулостимулирующего гормона
Иллюстрации
Показать всеРеферат
Использование: ветеринария, в частности способы определения активности гормонов , стимулирующих половую охоту и полиовуляцию у самок сельскохозяйственных животных. Сущность изобретения; активность фолликулостимулирующего гормона определяют по его воздействию на биологические объекты. В качестве биологического объекта используют ооциты животных . Оценку биологической активности гормона осуществляют по интенсивности созревания ооцитов в питательной среде. 1 табл.
СОЮЗ СОВЕТСКИХ
СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ
РЕСПУБЛИК (я)5 А 61 К 37/38
ГОСУДАРСТВЕННОЕ ПАТЕНТНОЕ
ВЕДОМСТВО СССР (ГОСПАТЕНТ СССР) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
К ПАТЕНТУ
ВЫd93HM
1ИЙЧИЯМ
ОТЕКА
С) (Ю (! () (21) 4913460/15 (22) 20,02.91 (46) 07.01.93. Бюл. ¹ 1 (71) Белорусский научно-исследовательский институт животноводства (72) Ю.Д.Романов, Л.В.Трощенкова и А,И.(анджа (73) Белорусский научно-исследовательский институт животноводства (56) Кабак Я.M. Практикум по эндокринологии, M.: Изд-во Московского университета, 1968, с. 150 — 155.
Изобретение относится к ветеринарии, в частности к способам определения активности гормонов, стимулирующих половую охоту и полиовуляцию у самок сельскохозяйственных животных.
Цель изобретения — упрощение способа определения активности фолликулостимулирующего гормона.
Поставленная цель достигается тем, что в качестве биологического объекта используют культивируемые ооциты животных, а оценку биологической активности гормонов проводят по продолжительности времени и интенсивности созревания ооцитов в питательной среде.
Пример, На мясокомбинате от только что убитых коров берут яичники в стадии фолликулярного роста. B стерильных условиях в лаборатории извлекают ооциты, размещают их в чашки Петри с питательной средой TC-199 с 20 % фетальной сыворотки примерно по 30 штук в каждую, Формируют
„„SU „„1787034 АЗ (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АКТИВНОСТИ ФОЛЛИКУЛОСТИМУЛИРУЮЩЕГО
ГОРМОНА (57) Использование: ветеринария, в частности способы определения активности гормонов, стимулирующих половую охоту и полиовуляцию у самок сельскохозяйственных животных. Сущность изобретения; активность фолликулостимулирующего гормона определяют по его воздействию на биологические объекты. В качестве биологического объекта используют ооциты животных. Оценку биологической активности гормона осуществляют по интенсивности созревания ооцитов в питательной среде.
1 табл. пять групп. В одну чашку Петри гормональные препараты не добавляют. Эта группа ооцитов является контролем. Во вторую чашку Петри к стандартной питательной среде, нанесенной на дно в количестве 2-3 мл, добавляют 10 и кг/мл стандартного фолликулостимулирующего гормона (ФСГ), заведомо известной активности, э в три следующие чашки Петри с таким же количеством питательной среды вносят 5, 10 и
15,и кг/мл проверяемого гормонального препарата. Все чашки Петри помещают в одинаковые условия в эксикатор с максимальной влажностью при 5-процентном содержании углекислого газа, Эти условия позволяют поддерживать в эксикаторе рН равную 7,3 — 7,5. Культивирование ооцитов осуществляют в течение 30 ч в термостате с постоянной температурой 38,5 С. Затем с помощью цитогенетического анализа определяют стадии созревания ооцитов с подсчетом процента ооцитов на стадии
1787034
Формула изоб ретения
On еделено ооцитов на стадии
Доза ФСГ,,и кг/мл
Всего ооцитов в группе, штук
Добавка к и итател ьной среде мето азы tl егене ации штук /. штук
Пе вая се ия опытов
Контроль
Стандартный ФСГ
П раве ряемый ФСГ
16,1
75,0
24
29
17
22
5
56,7
75,9
80,0
13,3
Вто ая се ия опытов
16,6
Контроль
Стандартный ФСГ
Проверяемый ФСГ
34
76,4
5,8
33
5
12
17
36,3
56,7
76,6
3,3
Составитель М.Дошкина
Техред М,Моргентал Корректор Л.Ливринц
Редактор С.Кулакова
Заказ 261 Тираж Подписное
ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР
113035, Москва, Ж-35, Раушская наб„4/5
Производственно-издательский комбинат "Патент", r. Ужгород, ул,Гагарина, 101 метофазы П, При 70 — 80/ фактического наличия их в группе, дальнейшее культивирование прекращают. Ооциты могут быть оплодотворены семенем быка-производителя, Использование активного ФСГ обеспечивает созревание ооцитов самок крупного рогатого скота уже через 25 — 26 ч.
Результаты 30-часового культивирования ооцитов приведены в таблице, Как видно из данных таблицы, в первой серии опытов доза 10,и кг/мл испытываемого ФСГ была эквивалентна такой же дозе стандартного ФСГ, а во второй серии опытов — проверяемый гормональный препарат был не менее активен. Лишь доза 15,икг/мл соответствовала эквивалентному количеству в 10,и кг/мл стандартного ФСГ.
Таким образом, использование предложенного способа определения активности фолликулостимулирующего гормона позволяет в течение 25 — 30 ч с минимальными затратами труда и средств определить фактическую активность испытываемого гормонального препарата, При этом не нарушается биотехнологический процесс воспроизводства сельскохозяйственных
5 животных. Отпадает необходимость в выращивании инфантильных крыс или мышей, их инъецировании, взятия влагалищных мазковб забоя с последующей препаровкой и взвешивания их полового аппарата, 10
Способ определения активности фолликулостимулирующего гормона, включаю15 щий оценку его физико-биологического . воздействия на биологические объекты, о тл и ч а ю щи и с я тем, что, с цельюупрощения способа, в качестве биологического обьекта используют ооциты животных, а оценку
20 биологической активности гормона по интенсивности созревания ооцитов в питательной среде,