Способ получения сложных эфиров 16,17-ацетальзамещенной андростан-17 @ -карбоновой кислоты
Патент 1795972
Авторы
Классы МПК
Способ получения сложных эфиров 16,17-ацетальзамещенной андростан-17 @ -карбоновой кислоты
Иллюстрации
Реферат
СОЮЗ СОВЕТСКИХ
СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ
РЕСПУБЛИК (5!>5 С 07 F 3/00
ГОСУДАРСТВЕННОЕ ПАТЕНТНОЕ
ВЕДОМСТВО СССР (ГОСПАТЕНТ СССР) 4iJitlldl@P
)О Ц у "" :,.- . P
ЛИОТЯКА (ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
К ПАТЕНТУ ойъ
СО
0 сй и т.
Х2 (21) 4027252/04 (22) 03.04.86 (46) 15.02.93. Бюл. N 6 (31) 8501693-9 . (32) 04.04,85 (33) SE (71) Актиеболагет Драка (SE) (72) Пол Хакан Андерссон, Пер Тур Андерссон, Бенгт Ингемар Аксельссон, Брор Арне
Тален и Ян Вилльям Трофаст (SE) (56) Патент Великобритании hL 1384372, кл, JC 2 U, 1975.
Патент Великобритании N 1438940, кл.
С 2 U, 1976.
Fhalen and Brattzand, Arznelm. — Forsch.
29, 1687 90, 1979, (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ СЛОЖНЫХ
ЭФИРОВ 16,17-АЦЕТАЛЬЗАМЕЩЕННОЙ
АНДРОСТАН-17 Р -КАРБОНОВОЙ КИСЛОТЫ (57) Изобретение касается производных стероидов, в частности получения сложных эфиров 16,17-ацетальзамещенной андростан-17 Р -карбоновой кислоты общей ф-лы
l OR3
C=O
0 й1й
Изобретение относится к способу получения новых производных стероидов, сложных эфиров 16,17-ацетальзамещенной андростан-17/3-карбоновой кислоты общей формулы I:
„„Я „„1795972 АЗ где Xi= H, F; Xz = H,F, RI=- Н, С>-С4-алкил;
R2= Н, С1 С5-алкил, R3 = а) СВ4В5-О-С(0)-йв, б) СВ485 — О-C(0) — Y — Вв при R4 = H, C> — Сь-алкил,фенил; Rg. СНз, Н-: йв = Н,н — или изостроения насыщенная или ненасыщенная фтором, фенил, бенэил, -СН2-СН = СН-СН=
= СН-О, причем положение 1,2 — насыщенное или означает двойную связь, У = кислород, при условии если R2 = Н, то
R>= C>-С4-алкил, обладающих физиологической активностью, что может быть использовано в медицине. Цель — создание новых более эффективных стероидов, Синтез ведут реакцией соответствующей кислоты (без группы Яз) или ее 20(R)- или 20(S)-эпимера с соединением ф-лы ll 2 — CR4Rs-О-C(0)-R6 или ф-лы П1 2-CR4Rg — Π— С{О) — Y йв, где 2 = галоген, с последующим, при необходимости, хроматографическим разделением полученной смеси на отдельные эпимеры.
Новые вещества имеют сродство к глюкостероидному рецептору. 4 табл.
1795972 где X) — водород или фтор, X2 — ВОДОРОД или фтор:
R> — водород или С1 С4-алкил, R2 во дород или С -С -алкил;
Кз — г руп и а С РЛ5ОСОRe, ил и
CR4RgQCORs. где R4 — атом водорода, С>-С5апкил или фенил;
Rs — водород или метил;
Вв — водород или линейная или разветвленная насыщенная или ненасыщенная цепь С1-Сз. С1 — С4-апкил, замещенный фтором, фенил или бензил, или.радикал
1,2-положение является насыщенным или означает двойную связь;
Y — атом кислорода, при условии, если
Rz — водород, то В1 — C> — C4-алкил, обладающих ценными фармакологическими свойствами, Цепь изобретения --получение новых стероидных производных, имеющих преимущества перед известными структурными аналогами;
Цель достигается описываемым способом, заключающимся в том. что соединение общей формулы 11;
ОН
C.О .с"
-----о
О
Х, или его 20R эпимер
-.--о р
cr 2
---о -Р
1 или его 20S эпимер
---о ц с
Г
---О т где В1 Rz.Х1 и Х2 имеют вышеуказанные значения, подвергают взаимодействию с соединением общей формулы 111: 4
<-C-0C0-q
,5 где Р4; Вв и Вв имеют вышеуказанные значения, или общей формулы 111а
R(, z-с-.О-СО- (- R
6
1 5 где В4,В5 Rr и Y имеют вышеуказанные значения, а 2 — атом галогена с последующим при необходимости хроматографическим разделением полученной эпимерной смеси на отдельные эпимеры.
В примерах„при проведении опытов препаративной хроматографии применяют объемную скорость движения потока
2 -1
2,5 мл/см ч . Во всех примерах молекулярные веса определены посредством электронной ударной масс-спектрометрии. Точки плавления измерены на микроскопе с обогреваемым столиком фирмы
"Leitz" Ветцлар, ФРГ. Все анализы HPLC (KPLC = высокоэффективная жидкостная .хроматография) проведены с колонкой
"Watersè Bondarak - С1а" (300 х 3,9 мм внутренний диаметр) при объемной скорости потока 1,0 мл/мин и смесью этанола с водой в соотношении от 50:50 до 60:40 в качестве подвижной фазы. при отсутствии особых указаний, 20 Пример 1. Получение (22RS)-, (22R)- и (22S)-11Р-16а-17а-, 21- тетрагидроксипрегна-1,4-диен-3,20-дион-16 а, 17 а -ацеталей.
Приготовление (22RS-). (22R)- и (22$)16а, 17а- бутилидендиокси-6 а, 9а -дифтор1 1ф 21-дигидроксипрегна-1,4- диен-3,20диона.
А . К суспензии 1,0 г ба,9 а-дифтор-11р, 16а, 17а, 21- тетрагидроксипрегна-.1,4-диен3,20-диона в 500 мл метиленхлорида добавляют0,32 мл свежеперегнанного н-бутаналя и 2 мп 727;-ной хлорной кислоты. Реакционную смесь оставляют стоять при комнатной температуре и при перемешивании на 24 ч.
Реакционную смесь промывают 107ь-ным водным раствором карбоната калия и водой, высушивают над сульфатом натрия и выпаривают, Остаток растворяют в этилацетате и осаждают петролейным эфиром. Остается
883 мг (22RS)-16а, 17а-бутилидендиокси40
6а, 9а -дифтор-11Р, 21- дигидроксипрегна1,4-диен-3,20-диона. НР1 С-анализ показывает 99%-ную чистоту и соотношение 16:84 у 22S и 22R эпимеров. Молекулярный вес: 466. (Вычислено 466,5), (22RS) эпимерную смесь хроматографируют на колонке "Стефадекс LH20" (76 х 6,3 cM) с применением гептан: хлороформ: этанол.
20:20:1 в качестве подвижной фазы, Фракции 12315-13425 мл (А) и 13740 — 15690 мл (В) собирают, выпаривают, остаток растворяют в метиленхлориде и осаждают петролейным эфиром. Фракция (А) дает 62 мг (22$)-, а фракция В-687 мг (22R) 16а, 17а-бутилиден55 диокси-6а, 9а-дифтор -11P, 21-дигидроксипрегна-1,4-диен-3,20-диона. (22R)-эпимер: моле куля рн ый вес 466 (вычислено 466,5). т.пл. 196-200"С. (22S)-эпимер: молекулярныи вес 466 (вычислено 466,5), т,пп.: 169
172 С.
1795972
В, К раствору 1,0 г ба, 9а-дифтор-11Р, 2 1-дигидрокси-16а,17а-//1-метилэтилиден/бис/окси//и регна-1,4-диен-3,20-диона в 500 мл метиленхлорида добавляют 0,30 мл свежеперегнанного н-бутаналя и 2 мл
72 -ной хлорной кислоты, Реакционную смесь оставляют стоять 24 ч при 33 С перемешивании, экстрагируют водным раствором карбоната калия и водой, высушивают над сульфатом натрия и выпаривают. Остаток растворяют в метиленхлориде и осаждают петролейным эфиром, получая 848 мг (22RS)-16а, 17а-бутилидендиокси-ба, 9а.дифтор-11 j3 дигидроксипрегна-1,4-диен3,20-диона, HPLC-анализа показал 93 ную степень чистоты и отношение 12/88 между 22S- и 22R-эпимерами, В!. К суспензии 4,0 г 6а, 9а-дифтор11Р 21-дигидрокси-16а, 17а -//1-метилэтилиден/бис/окси//прегна-1,4-диен-3,20-диона в 100 мл гептана добавляют 1,2 мл свежеперегнанного н-бутаналя и 3;8 мл 72 /ной хлорной кислоты. Реакционную смесь оставляют стоять при комнатной температуре на 5 ч при интенсивном перемешивании, экстрагируют водным карбонатом калия и водой, высушивают над сульфатом натрия и выпаривают, Получают 4,0 г (22RS)-16а, 17а -бутилидендиокси-ба, 9а -длфтор-11/3, 21-дигидрокси-прегна-1;4- диен-3,20-диона.
НР С-анализ показал 98,5 -ную чистоту и отношение между 22S и 22R-эпимерами
3/97. После 2-х перекристаллизаций из смеси хлороформа с петролинейным эфиром получено 3.1 г 22R-эпимера, содержащего всего лишь 1,1 22S-эпимера и 1,3 / других загрязняющих примесей, С, Подобным же образом, следуя процедуре. изложенной в примере, при замене 6а, 9а-дифтор-11/3. 16а, 17а, 2 1-тетраоксипрегна- 1,4-диен-3,20-диона
1 1Р, 16а, 17а, 21-тетра гидро к си и регн а-1,4
-диен-3,20- дионом получают 9 а -фтор- и 6 а -фтор-11Р, 16а, 17а, 21-тетрагидроксипрегна-1,4-диен-3,20-дион или соответствующие 16а, 17а -ацетониды нефторированные и фтори рован н ые н есим метр ич н ы е (22 R S)(22R) и (22S)-1 1Р, 16а, 17а, 21-тетраоксипрегна-1,4- диен-3,20-дион 16а. 17а -ацетали из ацетальдегида, пропаналя, бутаналя, изобутаналя, пентаналя, 3-метилбутаналя; 2,2-диметилпропаналя, гексаналя, гептаналя, октаналя, ионаналя и додеканаля.
П ример2.
А. Преднацинолон 16а, 17а-ацетонид (250 мг; 0,6 ммоля) растворяют в 75 мл метиленхлорида. Добавляют н-бутанал (130 мг;
1,8 ммоля) и 70 /-ную хлорную кислоту
55 (0,025 мл}. Раствор пвремешивают при ЗЗ С в течение 15 час. Желтый раствор промывают 2 х 10 мл 10/-ного раствора карбоната калия и 4 х 10 MJI воды, высушивают и выпаривают, Выход; 257 мг (97,7 /,), HPLC показал 91,1 /-ную чистоту, Содержание непрореагировавшего ацетонида составило
7,4 / загрязнений. Соотношение эпимеров
14,6/85,4.
В. Триамцинолон 16а, 17 а -ацетонид (0,5 r, 1,1 ммоль} растворяют в 150 мл метиленхлорида, Добавляют н-бутаналь (260 мг;
3,6 ммоля) и 70 -ную хлорную кислоту(0,22 мл). Смесь перемешивают при 33 С 16 ч, В делительную воронку помещают метиленхлорид и колбу, в которой проводили реакцию, промывают несколько раз 10 мл карбоната калия и метиленхлоридом соответственно. Затем раствор промывают
2 х 10 мл 10/О-ного К2СОз и 4 х 10 мл воды, высушивают и выпаривают. Выход: 438 мг (84,9 / ), Н PLC показала 80,2 / -ную степень чистоты, Соотношение эпимеров 19/81, С, Флюцинолон 16а, 17а -aöåòîíèä (0,5 г; 1 ммоль) растворяют в 150 мл метиленхлорида, Добавляют и-бутаналь (260 Mã; 3,6 ммоля) и 70 /-ную хлорную кислоту (0,22 мл), Смесь перемешивают при 33 С 24 ч.
Метиленхлоридную фазу переносят в делительную воронку. Колбу для проведения реакции промывают несколько раз 15 мл
10 / -ного К2СОз и метиленхлорида, соответственно, РасТВор промывают 2 х 15 мл 10/ного К2СОз и 4 х 15 мл воды, высушивают и выпаривают, Выход; 513 мг (100 0). HPLC показала 97,4 / -ную степень чистоты. Соотношение для эпимера: 8,6/91,4.
Пример 3. Данный пример иллюстрирует способ получения 11Р -гидрокси-16а, 17а -((1-метилэтилиден)бис(окси))- и (20RS)-, (208}- и (20S)-1 1Р -окси-16а, 17а -алкилметилендиоксинандроста -1,4-диен-З-он-17/1карбоновой и -4-ен-3-он-17ф-карбоновой кислот.
Получение ба, 9а -дифтор-1 1/3 -гидрокси-160;, 17а -((1-метилэтилиден)-бис(окси))андроста-1,4-диен-З-он-17/ — к а р бо н овой кислоты, А. K раствору 1,99 г флюоцинолон 16а, 17а-ацетонида в 120 мл метанола добавляют 40 мл 20 /-ного водного раствора карбоната калия. Через этот раствор барбортируют струю воздуха в течение примерно 20 часов при перемешивании при комнатной температуре. Метанол выпаривают и к остатку добавляют 200 мл воды, Раствор экстрагируют метиленхлоридом.
Водную фазу подкисляют разбавленной хлористоводородной кислотой. Образовав1795972
55 шийся осадок собирают фильтрованием и высушивают, что дает 1,34 г ба, 9а-дифтор11/3 -окси-16а, 17а -((1-метилэтилиден)бис(окси)-андроста-1,4-диен- 3-îí-17Р -карбоновой кислоты, точка плавления 264—
268 С, молекулярный вес 438. Степень чистоты, определенная посредством HPLC, составляет 94,0, Водную фазу экстрагируют этилацетатом. После высушивания растворитель выпаривают, что оставляет дополнительно 0,26 г порцию кислоты. Чистота: 93,7 .
В, Йодную кислоту(15,1 г) в 16,5 мл воды добавляют к раствору флюоцинолон 16а, 17а -ацетонида (5.0 r) в 55 мл диоксана, Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре 20 ч, нейтрализуют насыщенным водным раствором бикарбоната натрия и выпаривают. Остаток растворяют в 200 мл метиленхлорида и промывают
8 х 100 мл 10 -ного карбоната калия. Водную фазу подкисляют конц.хлористоводородной кислотой и экстрагируют 6 х 100 мл этилацетата. После высушивания растворитель выпаривают. Остаток растворяют в 400 мл этилацетата и осаждают петролейным эфиром, что дает 3,96 г ба, 9а-дифтор-1 1Р
-гидрокси-16а, 17а -((1-метилэтилиден)бис (окси} )андроста-1,4-диен-З-îí-17Р -Kàðáoновой кислоты, Степень чистоты, определенная НР1 С, составила 99,5 .
С. Аналогичным образом, следуя процедуре, изложенной в примере при замене флюоцинолон 16а, 17а-ацетонида 11Р, 16а, 17а, 21-тетрагидроксипрегна-1,4-диен-3,20диона; 6а-фтор-11ф 16а, 17а, 21-тетрагид- . роксипрегна-1,4-диен-3,20-диона и получают триамцинолон 16а, 17а-ацетонид
11/З-гидрокси-16а, 17а -((1- метилиден)бис (окси) ) андроста-1,4-диен-3-он-17Р карбоновые кислоты.
Пример 4. 1 -Этоксикарбонилоксиэтил ба, 9а-дифтор-11/3 - гидрокси-16а, 17а ((1-метилэтилиден)бис(окси))андроста-1,4диен -3-îí-17Р -карбоксилат.
А. 6а, 9а -Дифтор-1 1 -гидрокси-16
25 (72 х 6,3 см), используя хлороформ в качестве подвижной фазы. Собирают фракцию
1515-2250 мл и выпаривают, что дает 480 мг
1 -этоксикарбонилоксиэтил ба, 9а -дифтор1 1/3 -гидрокси-16а, 17а -((1-метилэтилиден) бис(о кси))-а ндроста-1,4- дие н-3-он-17Р карбоксилат. Степень чистоты, определенная посредством HPLC, составляет 98.10, а соотношение эпимеров А/В, 48/52. Точка плавления: 218 — 227 С. (a)p = + 63,2 (с= 0,214; СН2С12). Молекулярный вес 554, 1 -Этоксикарбонилоксиэтил 6а, 9адифтор-1 1р -гидрокси-16а, 17а -((1-метилэтил иден) бис(окс и))а ндроста-1,4-дие н-3-он17/3 -карбоксилат (480 мг) хроматографируют на колонке "Сефадекс" LH20" (76 х 6,3 см) с применением смеси гептан;хлороформ:этанол, 20:20:1 в качестве подвижной фазы. Собирают фракцию 2325 — 2715 мл, выпаривают и остаток растворяют в метиленхлориде, осаждают петролейным эфиром, что дает 200 мг соединения (А), имеющего степень чистоты 97,3% (определено HPLC анализом). Точка плавления: 246 — 250 С (а)о = 100,5 (с = 0,214; CHzCI2), Молекулярный вес: 554, Фракция 4140 — 5100 мл дала 250 мл соединения (В), степень чистоты 99,0, Точка плавления, 250 — 255 С (a)p = + 28,5 (С= 0,246 СНгС1 ), Молекулярный вес: 554, Сигнал метина и сложноэфирной группы
0,13 млн.дол. смещен вниз поля в Н-ЯМР спектре В по сравнению с А, между тем как остаточные части спектров почти идентичны.
В. 6а, 9а -Дифтор-1 1р-гидрокси-16а, 17а -((1-метилэтилиден} бис(окси))андроста1.4-диен-3-îí-17Р -êàðáoíoâóþ кислоту (200 мг) растворяют в 25 мл диметилформамида.
Добавляют 1-хлорэтил-этил карбонат (100 мг), бикарбонат калия (70 мг) и 18-кроун-6простой эфир. Реакционную смесь перемешивают при 80 С 3 ч., охлаждают, после добавления 150 мл воды экстрагируют метиленхлоридом„высушивают и выпаривают.
Неочищенный продукт очищают, как указано в процедуре А, причем остается 207 мг
1 -этоксикарбонилоксиэтил 6а, 9а -дифтор-
11/3 -гидрокси-16а, 17а((1-метилэтилиден)бис(окси)) андроста-1,4-диен-3он-17/3 -карбоксилат. Чистота (HPLC) составляет 98,4% и соотношение эпимеров
А/В = 54/46.
С. 6а, 9а -Дифтор-1 1Р гидрокси-16а, 17а ((1-метилэтилиден) бис(окси))андроста1.4-диен-3-он-17у3-карбоновую кислоту (200 мг) и 1,5-диазабицикло (5,4.0)ундецен-5 (140 мг) суспендируют в 25 мл бензола и нагревают до дефлегмации.
1795972
Добавляют раствор 1-бромэтил-этиЛ- бромметилэтилкарбоната в 10 мл метиленкарбоната (175 мг) в 5 мл бензола и смесь хлорида. Смесь перемешивают при 45 С нагревают2,5ч, Послеохлаждениядобавля- 20 ч, разбавляют IO мл метиленхлорида, ют 50 мл метиленхлорида и раствор промы- выделяют и очищают как указано в процевают водой, высушивают и упаривают. 5 дуре "Е". Получают 254 мг1 -этоксикарбониНеочищенный продукт очищают таким же локсиэтил 6а, образом, как в процедуре А. Получают 207 9а-дифтор-11Р-гидрокси-16а, 17а((1-метиMl 1 -этоксикарбонилоксиэтил 6а, 9Q диф- лэтилиден)бис,(с си))андроста-1,4-диен-3тор-11Р -гидрокси-16а, 17а((метилэтили- îí-17Р -карбоксилата. Чистота (HPLC):97,4. ден)бис(окси))андроста-1,4-диен-3 -îí-17Р 10 Отношение эпимера А/В = 60/40.
-карбоксилата. Чистота (НР1 С) 96,4, Отно- G, 6а, 9а -Дифтор-1 1Р -гидрокси-16а, шение эпимеров А/B = 44/56. 17а ((1-метилэтилиден)бис (окси))андростаО. К раствору 6й, 9а -дифтор-11Р-гидро- 1,4-диен-3-îí-17j3-карбоновую кислоту (200 кси-16а, 17а((1- метилиден)бис(окси))андро- мг), 1-бромэтилэтилкарбонат (135 мг) и триста-1,4-диен-3-oí-17Р -карбоновой кислоты 15 этиламин (275 мг) растворяют в 20 мл диме(100 мг) в 25 мл ацетона добавляют 175 мг -тилформамида. Смесь перемешивают при а-бромдиэтилкарбоната и 45 мг безводного 80 С 3 ч, разбавляют 200 мл метиленхлорикарбоната калия. Смесь нагревают 6 ч. с да, промывают водой, высушивают и выпаобратным холодильником. Охлажденную ривают. "Сырой" продукт очищают,. как реакционнуюсмесь выливают в150мл воды 20 указано в процедуре А. Получают.69 мг 1 и экстрагируют метиленхлоридом. Экстракт этоксикарбонилоксиэтил 6а, 9(x -дифторпромывают водой, высушивают над сульфа- 11/ - гидрокси-16а, 17af(1- метилэтитом натрия и выпаривают. Выход 65мгтвер- лиден)бис (окси))андроста-1,4-диен-3- ондого 1 -этоксикарбонилоксиэтил ба, 9a - 17/ -карбоксилат, Чистота (HPLC) 97,8 и дифтор-11Р-гидрокси-16а, 17а((1-метили- 25 отношение эпимеров А/В = 48/52. ден)бис(окси))андроста- 1,4-диен-3-он-178- Пример 5. 1 -Ацетоксиэтил 6а, 9й карбоксилата, Чистота, определенная -дифтор-11Р-гидрокси-16а, 17а-((1-метилиHPLC, составила 97,6 / и отношение зпиме- ден)бис(окси))андроста-1,4-дйен-З-он-17/3 ров А/В = 49/51. карбоксилат.
Е, ба, 9а-Дифтор-11 -гидрокси-16а, 3 6а, 9а-Дифтор-11В-гидрокси-16а, 17а
17а -((1-метилэтилиден) бис(окси))андро- ((1-метилэтилиден)бис (окси))андроста-1,4ста-1,4-диен-З-он-17Д -карбоновую кислоту диен-3-он-17Р-карбоновую кислоту (500 мг) (500 мг) и кислый тетрабутиламмоний суль- и бикарбонат калия (575 мг) растворяют в 40 фат (577 мг) добавляют к 3 мл 1-м гидроокси мл диметилформамида, Добавляют 1-хлорэнатрия. Добавляют также раствор 435 мг 35 тилацетат(1 мл) и реакционную смесь пере1-бромдиэтилкарбоната. в 50 мл метиленх- мешивают при комнатной температуре 40 ч. лорида. Смесь нагревают с обратным холо- Реакционную смесь выливают в 50 мл воды дильником. Происходит разделение на 2 иэкстрагируютметиленхлоридом. Экстракт слоя. Органический слой промывают 2 х 10 промывают водным бикарбонатом натрия и мл воды, высушивают и выпаривают, "сы- 0 водой, высушивают и выпаривают. Остаток рой" продукт очищают хроматографией на хроматографируют на колонке "Сефадекс, колонке "Сефадекс LH-20" (72 х 6,3 см) с LH-20" (72 х 6,3 см), применяя хлороформ применением хлороформа, в качестве по- как подвижную фазу, Фракции 1755-2025 и движной фазы. Собирают фракцию 1545- 2026-2325 мл собирают и выпаривают.
1950 мл, выпаривают и остаток осаждают из 45 Твердый продукт от фракции 1755 — 2025 смеси метиленхлорида и петролейным мл дополнительно очищают хроматограэфиром. Остается 341 мг 1 -этоксикарбо- фией на колонке "Сефадекс LH-20" (76 х 6,3 нилоксиэтил ба, 9а-дифтор-11/ -гидро- см — внутренний диаметр), используя смесь кси-16а, 17а-((1-метилэтилиден)- бис(окси)) гептан-хлороформ-этанол, 20:20:1 в качестандроста -1,4-диен -3- он-1 7/3-карбоксилат. 50 ве подвижной фазы. Фракцию 2505-2880 мл
Степень чистоты, определенная посред- собирают и выпаривают. Остаток растворяcTBoM HPLC: 99,2 . Отношение эпиме- ют в метиленхлориде и осаждают петролейров А/В = 56/44. ным эфиром, причем остается 167 мг
F. 6a, 9а-Дифтор-11/З-гидрокси-16а, твердого продукта (А). Чистота, определен17а.-f(1-метилиден)бис (окси))андроста-1,4- 55 ная НР С = 99,1 . Точка плавления 238— диен-3-он-17Р-карбоновую кислоту (200 мг) 259 С (а )o = + 94 (С = 0,192; СН С) ). и трикаприлметиламмоний хлорид (200 мг) Молекулярный вес = 254. добавляют к 5 мл насыщенного водного би- Твердый продукт из указанной выше карбоната натрия. Добавляюг 100 мг 1- фракции 2026-2325 мл дополнительно очи1795972 щают хроматографией так же, как указано выше, Фракцию 5100-5670 мл собирают и выпаривают, Остаток растворяют в метиленхлориде и осаждают посредством петролейного эфира, что дает 165 мг твердого продукта "В". Чистота, определенная путем
HPLC, составляет 99,4 ь. Т .чка плавления
261 — 265 С (Q)D =+ 34 (С -= 0,262; СН2С!2).
Молекулярный вес = 524, Н-ЯМР спектры А и В являются почти тождественными, за. исключением того, что метиновый квартет от сложноэфирной группы, который сдвинут на 0,16 млн,дол, в нижнюю область соединения В в сравнении с соединением А. Характеристики m/е
А и В в масс-спектре являются идентичными, исключая интенсивности. Такие спектроскопические характеристики А и В показывают, что они являются эпимерами вследствие хирального центра в сложноэфирной группе.
Пример 6-88. Вещества, приведенные в таблицах 1-3. приготовлены, выделены и очищены по способу, аналогичному описанному в примерах 4 и 5.
Примечание к таблице 1.
1) На колонке "Сефадекс 1 Н-20" (76 х 6,3 см); применяя хлороформ- гептан-этанол (20;20. 1), в качестве подвижной фазы;
2) На колонке "Сефадекс LH-20" (87,5 х х 2,5 см), применяя хлороформ-гептан-этанол (20:20:1) в качестве подвижной фазы.
3) На колонке "Сефадекс LH-20" (85 х 2,5 см), применяя хлороформ в качестве подвижной фазы.
4) На колонке "Сефадекс 1 Н-20" (72,6 х х 3 см), применяя хлороформ в качестве подвижной фазы.
5) На колонке "Сефадекс LH-20" (71,5 х х 6,3 см), применяя хлороформ в качестве подвижной фазы, Примечание к таблице 2.
1) На колонке " Сефадекс ЕН-20" (72 х 6,3 см), применяя хлороформ в качестве подвижной фазы.
2) На колонке "Сефадекс LH-20" (83 х 2,5 см), применяя хлороформ в качеСтве подвижной фазы, Примечание к таблице 3, 1) На колонке "Сефадекс LH-20" (76 х 6,3 см), применяя гептан-хлороформ-этанол (20:10:1) в качестве подвижной фазы.
2) На колонке "Сефадекс 0+20" (87,5 х х 2,5 см), применяя гептан- хлороформ-этанол (20;10:1) в качестве подвижной фазы.
3) На колонке "Сефадекс LH-20" (72 х 6,3 см), применяя хлороформ в качестве подвйжной фазы, 50
55 (вес/объем) суспензии декстрана 170 в 20 ммоль Трис, рН 7,4 1 ммоль ЭДТА и 20 ммоль NaMo04 10 мин при 0 С. После этого центрифугируют при 500 х Ig 10 мин, и 230 мкл всплывшего слоя сосчитывают в 10 мл
Insta-Gel в сцинтилляционном спектрофотометре "Packard". Всплывшие слои инкубируют с а) с одним (Н) дексаметазоном, б) (Н) дексаметазоном вместе с 1000-кратным з избытком немеченого дексаметазона и в) 4) На колонке "Сефадекс LH-20" (80 х 2,5 см), применяя хлороформ в качестве подвижной фазы, 5) На колонке "Сефадекс LH-20" (81,5 х
5 х 2,5 см), применяя хлороформ в качестве подвижной фазы.
Фармокология.
Сродство новых сложных эфиров андростан-17Р -карбоновой кислоты по отноше10 нию к рецептору глюкокортикоида.
Все стероиды, соответствующие насто- ящему изобретению, являются физиологически активными соединениями, Сродство новых сложных эфиров андростан-17Р -кар15 боновой кислоты к глюкокортикоидному рецептору использовано в качестве модели для определения способности к противовоспалительному действию. Их средства к рецептору сравнивают с будезони20 дом//22В/S/-16а, 17а -бутилидендиокси1 1Р, 21-диоксипрегна-1,4-див н-3,20-дион/, гл юкокортикоидом повышенной активности, с благоприятным соотношением между локальным действием, и действием, относя25 щимся к организму в целом (Fhalen and
Brattsand. Arzneim. — Forsch, 29, 1687 — 90 (1979).
Во время всех исследований используют крыс — самцов "Spraqve-Dawley" в возра30 сте 1-2 месяцев. Зобную железу удаляют и помещают в физиологический раствор поваренной соли, охлаждаемый льдом, Ткань гомогенизируют в гомогенизаторе "Potter
EIvehjem" в 10 мл буферного раствора, 35 содержащего 20 ммоль.Трис, рН 7,4 107, (вес-объем) глицерина, 1 ммоль этилендиаминтетрауксусной кислоты (ЭДТА), 20 ммоль NaMo04, 10 ммоль меркаптоэтанола.
Гомогенат концентрируют 15 мин. при
40 20000х ig, Долислоя, всплывшего при20000 х Ig (230 мкл), инкубируют около 24 ч при 0 С с 100 мкл фенилметилсульфонилфторида (ингибитор эстеразы, конечная концентрация 0,5 ммоль), 20 мкл немеченного "сопер45 ника" и 50 мкл Н-меченого дексаметазона (конечная концентрация 3 нмоль). Связанный и свободный стероиды разделяют инкубированием смеси с 60 мкл 2,57, (вес/объем) активированного угля и 0,25%
1795972
Формула изобретения
Способ получения сложных эфиров
16,17-ацетальзамещенной андростан-17Ркарбоновой кислоты общей формулы 20
Я о, з
c*o
----о
- ся
ОЯ
I с=о о э 1
-о с
Ъц
Ф г или его 20R эпимер 2 с.
-- -0 "R
1 и его 20S эпимер
40 (H) дексаметазоном вместе с 0,03-300кратным избытком "соперника", Неспецифическую связь определяют, когда
1000-кратный избыток немеченого дексаметазона добавляют к(Н)-меченому дексаз метазону. Радиоактивность, связанная с рецептором в присутствии "соперника", разделенная на радиоактивность, связанную с рецептором в отсутствии "соперника" и умноженная на 100, дает выраженную в ф специфическую связь для меченого дексаметаэона. Для каждой ко. центрации "соо
Хг где Х1 и Хг — водород или фтор;
R> —. водород или Ci-C4-алкил;
Rz — водород или С i — С5-алкил;
Вз — груп и а С R
CRqRsOCOYRe, где R4 — водород, С1-Св-алкил или фенил; Вв — водород или метил; Вв— водород или линейная или разветвленная насыщенная или ненасыщенная цепь C<—
Сз, С>-С4-алкил, замещенный фтором, фенил или бензил, или радикал
1,2-положение является насыщенным или означает двойную связь.
Y — кислород, при условии, если Rz— водород. то В1 — С1-С4-алкил. от л и ч а ю щи и с я тем, что соединение общей формулы перника" специфически связанная радиоактивность, выраженная в, наносится на график по отношению к логарифму концентрации "соперника". Кривые сравнивают
5 при 50o ном уровне специфической связи, и относят к будезониду, относительное сродство связуемости (RBA), которого принимают за 1.
Табл.4 суммирует относительное срод10 ство связуемости (RBA) по отношению к глюкостероидному рецептору для. некоторых исследованных соединений, -- — о я
С.
---о =ц
30. г 1 где В1, Вг, Х1 и Х2 имеют указанные значения, подвергают взаимодействию с соединением общей формулы
",ъ
z-с-осо-н ! Si 5 где Я4-Rg имеют укаэанные значения, или общей формулы
Р», е-сто-со-у-Rg
k S где R4-йв u Y имеют укаэанные значения;
45 Z — галоген, с последующим при необходимости хроматографическим разделением полученной эпимерной смеси на отдельные эпимеры, 1795972
Таблмца1
I)4 0
ОСНВ
О СЛ(з
--о
Нб
840
1 а
СООСОС)(0
С)(80 о..сн, -- -о -сн з а,о соосос((, Ь 0
-о снэ
Х2
Эпнмер 8 к
»н !э нолемулярмкд
c 0,2 е еес
СН Cl к к ем ч. медлено
Эпммер Т.пл., С
Rs
Сахрэмяемк1 обзен (нл) Ор- Х
1 мер к
Еемнл 242 (еес)
221 (dec) Н Н фаннл сн(сн ) сй(сн )
0et5ul
° 1) Нэ Сефадексе LH-20 колонка (76 х 8,3 см) подемм.фаза хлороформ-гептан-зтэнол (20:20:1).
2) Нэ Сефадексе LH 20 колонка (87,5 х 2,5 см) подэмм.фаза хлороформ кентам-ззенал (20:20:1).
3) На Сефадексе LH-20 колами (85 к 25 см) подеакк.фаза — хлороформ.
4) На Сефадексе LH-20 колонка (72 к В 3 см) подэмх.фээа - хлороформ.
5) Нэ Сефедексе СН-20 колонка (71.5.x 0.3 си) поленц,фаза - хлороформ.
ТаОлмца2
1) На Сефэдексе LH-20 колом ко (72 х 5.3 см) одмак.фазе — хлороформ.
2) На Сефадексе LH-20 колонка (83 х 2.5 см) подемм.фаза — хлороформ, 7
Ь
11
12
13
14
16
17
18
19
21 22
23
24
26
27
28
29 . 30
31
32
33
34
ЗЬ
37
38 н н
Р . H
Р. Н
Н
t Н
F Р
F Р
P Р
Р
Р H
Р H
Н Р
Р
F Р
Р Р
Р Р
Р. Р.
Р . Г
t Г
t Р
Р F
t . Р
P Г
Р Р
t t
F Р
Г Г
Р Р
F t фаннл сн, Сн,. сн, сн сн сн сн, сн, сн
Сйз сн
СИ, Снз
Сна сн, снз. сн сн сн
CH сн сн сн сн, си сн сн
Н
H н.
H
Н н и
Н сн„
И
Н
Н н
Н
И
Н
И
Н
Н
Н"
Н
Н
Н
Н
Н
H н сн сн А сй, СН, А ,СН . В сн, А сн в с(сн») А с(си) . в . Ееммл Л
Оеннп 8 сн, О«снз)з А ос(си ) в
ОСН(СНк)к А осн(сн,), в осн, осн в (Сн ) сн а к з
ОСН(снз)к .. А+О . осн(сн,), А
ОСН(СН ) В осн(сн,сн,), . А
ОС»1(СНксйк)4 В оснрй(снуй,), А оснксн(СИ из)е в ос(сн,) мв
ОС (Сна)з А
ОС(СИэ), В осн,с(сн,) мв
ОСНкС(Сна)з А осн,с (сн,) 0
ОСНэСИ, 249
238
262- 70
268-77
224-30
259-67
130-42
184-87
>300
250-53
230-35
235-42
225-33
224-31
227-30
205-28
210-25
242»47
226-28
183-97
217-21
207 10
170-78
177 79
190"92
208-ЗЬ
248-56
22Ь-28
+79
+89
+102
+40
+73
+75
+87
+50
+9Ь
+48
+61
+98
+30
+109
+58
+102
+31
+10Ь
+28
+59
+95
+31
+95
+30
+89
+30
+05
+100
+27
+60
+98
+28
550,7
550,7
534,Ь
534,ь
565,0
566,6
5ЬЬ,6
566,6
500>б
500,6
538,6
504,7
564,7
550,6
550,6
54о,6
540 ° 6
5ьв,б
568,Ь
568,6
568,6
568,6
596,7
596,7
610,7
610,7
582,6
582,6
502,6
596,7
596 ° 7
59Ь,7
508,6
534
534
5ЬВ
568
566
566
58fi
566
5Ь4
564
566
568
568
568
568
596
596
582
582
582
596
596
596
568
1065-1690 "
1891-2175
2325-25ЬО
ЗIЬ5-3555
2040"2355
2895 3285
2190-1505 к)
3525 "3990
2825-2025
4350-4075
1965-2220
235"200з»
525-630з»
1530"1770
2295-2бсО
590-690к»
395-43аз»
410495з»
690-900з» ! 365-1566
400-475э»
625 780*»
1785 2085
3150-3600
1725-1980
3120-3460
1290-1920
255-310з)
650-ВООз»
1605-1995
1845-2130
3270-3750 »
405-460з»
1795972
1 I
1 1
Я 1
z c
Q l
K l
X 1
e x
1 а Е I х, О !О
l oo
1 л
Ъ о О О О
1 l о о
Ch сЧ
М
ОС!
CO
СЧ
С1 СЧ
СЧ сЧ О сО
1.! О и! С С!
О СО О О м -Ф Ф а а СС! Л
С»! О0 о со
СГ\ ф О О ьО л л л сЧ О СО
СС1 О сс
1 О О л л
С»1 СО о со
-Ф! л л л О О
»3 и
О 1 lA! л л
О О0 м сс! ф I
41 сЧ I мф, ЮО 1! 1 и и> и 1 о о о. o o o o
СО Cn N < O 1= М
Л О l О О
+ + + + + + + 1 1
СЭ о л
СЧ в о л
Ch l
СО М т»
С! О л Ч) сО
1 I 1
М СО О М О
СО
СО СГ! б 1 а о а м О 00
О ССЪ
1 I
СЧ 4
О кГ!
СЧ
z а.8. а о
Э 1
E I
S 1
1 I
I 1 I
6 сч
Ц, ц о о о о
G.
S со
I ж
S ф
6 "6
Ъ. Д».
С о г о о
LA л
СЧ. х м
CO л .О х
СЧ
1»»
I
Ot 1
1 — 3
6 6
° Ъ " "Ц
Ц о
С о
И
УО
1 S а а е
l C
Л О л
1 б
СЧ М
»С»С
)S
z а
К с о з Ф
У В
9 с
1 1
I l
I о !
1 Х !
I C0 1
l tf 1
1 з I
I fD I
1 1
) ° I
I X I
1 Б l
1 ф 1! ч о о о
СО
СГ! СГ!
1 СО б
\ л
О1 сч о о
1 о о о СЧ СЧ м л О т ли л и
СЧ
I 1 о о
СЧ б О
C)
СЧ
Б о
У
С.Э
Ю сЧ
Б о
У
С.Э
1795972
Т а б л и ц а 3 ((ф
COt)k04R8
О гс(5$
--ю
С)(3
ИЬО
t в
СООСОСЦ, (((RS ---О снэ
--0 СНЭ
Й,Оп
0 (00C0Ct(Ь!
)Э И С>(3
Эпинер А
Эпинер В
Rg/YNв Элинор Т.пл, С
92 ! к !л (с0,2 >
СИ,С)а) R4
Xtt Ri
Прн не р
1!элеиуллрныд вес охранке>в>д
Ьмм (нл) ° ичисп (наиде
1650-!995 »
1305-1560»
1950-2100 >
2145-2370
1905-217S>
3300-3720
430-490»
630-715>т
2100-2400
2850"3225
2100-2400
2760-3075
1$00-1665
IЬ20-1785
250-29S"I
245-290»
325-370»
2235-2550
+67
Н . К ° (Н
192-97
Ы Н
502
196-200 .81
49
$!
Н Н (нэ и (a)g g
502
+694
+63 (alg)g cN в
Н (СН,),(йэ (CNg)i%7
261-61
255-59
226-31
232-38
S48
548
548
548
582
582
+101
+35
Я
Ю
atg
al си(сн,), сн(сн,), фенил
Н (alg)gala (!Ну) е(йэ ((Нэ)в СН, (CNg)g CNg (CN g) аСК g
5 н (CN g)g CN
Н (си,),сиэ (Юа)лснg (CNg)аCNg н
176-88 +104
Н н
К
Н н
2 !4-19 . 133-35
210"1 2
235-40
151-82 .
140-42
160-65
171-7Ý ! 61-64
203-11
196-209
138-52
+46
*1!0 л44
+75
+75
S6
57
58
59
Р
1>
Р
Н (сна)всиэ
Н аУ к
+77
+69
546
546
61
62 и
+66
+72
564
Р Н
564
+99
+70
+102.
+ЭЗ
+110
+Эб
+92
+27
+107 а39
+103
+31
+95
+t8
+!15
+34
+9$
+26
554
Н э а в
568
532
А+В
300-3 70 > ((Н т)в а)3 (at в)в сиа (cN ),а!э
67
68
69
Н
Л+В .158-91
400-460»
405-41$»
58S-670»
532
5S0
P И
P . Н!
9698
212-14
Н (СК,), СН, (си ) си н
578
578
564
564
518 154-57
345-400»
Н (СН в)в Сйэ (cN ) сн (etta) g си, (а! ) си
71
161-68
485-565»
355-425>!
535-635»
485-570»
255-310
380-430»
540-ЬЭО >
385-4S5»
5Ь5-695»
ЭОО-330 . 365-39$
3720-4 !55
290-340
341-39S
gJ
2 !90-3900
2190-2355
3630-3900
И
72
221-24
212-15
168-71
IN-19
220-22
227-31
И
7 В с(сне), Н
518
564
564
564
564
568
568
$á8
77 т р,И
Н с(си )
С(СИэ)э
18
229-32
24Ь-51
167-70
79
P
Ы (at,),at, (at,),сн, И
Р
И (CN э)к at2 (Снв)койз (Скв)а а!э (atg)g Сйэ (at,), сн, (Сйэ)аatg (CNg) gCNэ!
88-9О
118-96
217-21
211-15
+68>
+105
+32
+67
+96
+37
А+в,83
568
84
568
Н
А+В 198-210
582
582
$82
$82
86
232-31
22S-Э2
385-440> (20:20:1).
1) эта СвфадЕКСЕ LH 20 КОЛОНКЕ (76 К 8,3 СМ) ПОдаИж.фааа твлтаи-КЛОрюфарн-Э кло рм-этенол . (20:20:1).
2) На Сефадексе LH-20 колонке (87.8 х 2.5 см) подвиж.фаза тептан-клороформ-э о рм-этенол
3) H* Сефэдексе LH.20 колонка Р2 к 8.3 см) подвиж.фаза хлороформ.
Л) На Сефадексе LH-20 колонка (80 к 2.5 см) подвиж.фаэа клороформ.
5) t>a Сефадексе LH-20 колонка (81.5 к 2.5 см> подвиж.фаэа клорпформ. э (Н
СК, а!э
СН, Сйл
СНЭ
atJ
Сйэ
СН (Н
Ф тй
CNg
СН ск !. Н снэ сй, a!a а1 сн
СК н с(а! ) н с(си ) н с(си ) н с(сн ) н си н сй н сна к ala N al
К СК н а!в
СН» к ос(сн > н ос(снэ) н ос(сн ) н ос(сн ) н осн сн к осн(а1,), и оа1„cN, Оа>ка!Э
Н ОСК Сй
ОСИасиэ э э
К 0C(CNa), Н 0CN(CN,), н осн(си ) к ос(сн ) н ос(сн ), К ОСКВСИ> к оси (н
OCNga!ó
Оа! ск н о(н,сн, Н 0(Н СН н оси,а1, И ОСИ эalэ к оси сн
К ОСИ((Н ) к оа1(сн,), и ОСИ(СК )
СИ oat at, 502,6
502, 6
548, 7
548, 7
520,6
520,6
520,6
$20,6
548,7
548>7
S82 ° 7
582 ° 7
546,7
546,7
564,7
564,7
554,6
568,6
SÝ2,6
532,6
$$0, 1
5$0> 7
S78>1
578,?
564,7
564 ° 7
578,7
578,7
564,7
364 ° 7
564, 1
564 ° 7
568 ° 6
568,6
568,6
568>6
568,6
582,6
582 ° 6
582 ° 6
SÂ2,5
25
1795972
Таблица 4
Составитель И.Федосеева
Техред M.Ìoðãåíòàë Корректор Л.Филь
Редактор Т.Иванова
Производственно-издательский комбинат "Патент", r. Ужгород, ул.Гагарина, 101
Заказ 441 Тираж Подписное
ВНИИПИ Государственного комитета по изобре;ениям и открытиям при ГКНТ СССР
113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5