Способ дифференциальной диагностики рака легкого

Способ дифференциальной диагностики рака легкого

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

Использование: определение ферментативной активности крови человека при верификации патологического процесса. Цель изобретения - повышение точности и ускорение способа. Сущность изобретения: в лимфоцитах периферической крови , ляют активность глутатион-З-трансфераэм и при активности ГТ меньше 34 пмоль/мин/10 диагностируют рак легкого. 2 табл.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛ ИСТИЧ Е С К ИХ

РЕСПУБЛИК (я>5 G 01 N 33/68

ГОСУДАРСТВЕННОЕ ПАТЕНТНОЕ

ВЕДОМСТВО СССР (ГОСПАТЕНТ СССР) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4737443/14 (22) 13.09..89 (46) 23.02.93, Бюл, N 7 (71) Ростовский научно-исследовательский онкологический институт и Научно-производственное объединение "Ростзпидкомплекс" (72) В.М.Поляков, А.В.Архангельская, С,З.Карташов и В.З.Ланкин (56) Heberer М, et al. Cancer detection and

preventation, 1983, ч. 6, р. 273 — 280.

Изобретение относится к медицине, в частности к онкологии, и может быть использовано для биохимического определения ферментативной активности крови человека при верификации патологического процесса, Цель изобретения — повышение точности и ускорение способа.

Способ осуществляется следующим образом.

Для исследования 4-6 мл венозной крови брали иэ локтевой вены в стерильную пробирку с гепарином (10 единиц гепарина на 1 мл крови). Пробирка помещалась на 1 ч в термостат при 37 С.

Полученную плазму испольэовали для выделения лимфоцитов, которые доводили до концентрации 2 10 клеток на миллилитр.

Лимфоциты из периферической крови выделяют в гра,циенте плотности фиколл-ве.рографин (1,077 г/мк)по методу Бейюма, Определение активности ГТ основано на

„„Я2„„17у7О7О А1 (54) СПОСОБ ДИФФЕРЕНЦИАЛЬНОЙ ДИАГНОСТИКИ РАКА ЛЕГКОГО (57) Использование: определение ферментативной активности крови человека при верификации патологического процесса. Цель изобретения — повышение точности и ускорение способа. Сущность изобретения: в лимфоцитах периферической крови ойредв-,, ляют активность глутатион-S-трансферазй и при активности ГТ меньше 34 пмоль/мин/10 диагностируют рак легкого, 2 табл. скорости образования конъюгата с 1-хлор2,4-динитробензолом, характеризующегося максимумом поглощения при 340 нм. К суспензии лимфоцитов добавляли "тритон X-100 . в конечной концентрации 0,17, инкубировали 30 мин при 37 С, центрифуги ровали 10 мин при 30009 и полученный лизат использовали для исследований.

Реактивы:

4 а) К-фосфатный буфер 0 1 М, рН 6,5; С б) глутатион восстановленный — 10 мМ раствор 0,1 М К-фосфатном буфере рН 6,5 (, ) в) 1-хлор-2,4-нитробензол (ХДНБ) — 100 мМ раствор в спирте, >

Смесь для определения активности ГТ (на 1 пробу): а) К-фосфатный буфер 0,1 М, рН 6,5—

1,78 мл б) глутатион восстановленный 10 мМ раствор — 0,2 мл в) ХДНБ, 10 MM спиртовый раствор—

0,02 мл.

1797070

Ход определения:

В день проведения готовят общую смесь из компонентов а-в на всю серию проб. В контрольную и опытные кюветы вносят по 2,8 мл смеси и при iL = 340 нм регистрируют 2-3 мин неферментативную реакцию. Затем в опытную кювету вносят от

0,1 до 0,2 мл лизата лимфоцитов и регистрируют ферментативную реакцию. Результаты выражают в пмоль обоазовавшегося продукта реакции/мин/10 клеток, Коэффициент мол ярной экстинции конъюгата глутатиона и ХДНБ — 9,6 10 M "см

Предложенным способом было обследовано 138 человек, Из них рак легкого выявлен у 112 человек, хроническая бронхопневмония у 18 человек, туберкулез у 8 человек. Кроме того, были обследованы доноры-курильщики — 47 человек.

Конкретные клинические примеры иллюстрируются выписками из историй болезни и табл. 1.

1, Больной Солдатенко Ф.М., 53 лет, ист. болезни No 12396/т, Поступил в торальное отделение Ростовского научно-исследовательского онкологического института

27.10.87 с жалобами нэ боли в грудной клетке, периодический кашель с кровянистой мокротой, одышкой, слабость, повышенную температуру. В результате проведенного клинико-лабораторно-рентгенологического обследования поставлен диагноз: центральный рак правого легкого ст. И1, гр. Ii.

04.11.87- тест с определением активно.сти ГТ в лимфоцитах перифеоической крови дал активность 18,2/мин/10 клеток.

10,11,87 произведена операция — пневмоэктомия справа, Гистоанализ М 222487491 — плоскоклеточный рак с ороговением, После операционный период протекал гладко. Больной выписан 8,12.87 в удовлетворительном состоянии.

2, Больной Дубовсков А.А,. 49 лет, история бол. N 14/ф. Поступил в торакальное отделение Ростовского научно-исследовательского онкологического института

05.01..88 с жалобами на периодический сухой кашель, субфебрильную температуру по вечерам, потливость, слабость. Проведено клинико-рентгенологическое обследование. Поставлен предположительный диагноз: периферическая опухоль верхней доли правого легкого..

Формула изобретения

Способ дифференциальной диагностики рака легкого путем определения активности фермента в крови, отличающийся

07,01,88 — тест определение активности

CT. Она составила 84,6 пмоль/мин/10 кле7 ток.

15,01.88 проведена операция — клиновидная резекция верхней доли правого легкого. Гистологический анализ — N. 226266— туберкулома. Больному проведено специфическое лечение, Выписан 29.01.88 в удовлетворительном состоянии для дальней"0 шего лечения у туболога..

3, Больной Ткалин Н.Г., 50 лет, история бол. М 2043/ф, поступил в торакэльное отделение РНИОИ 12.01.88 с жалобами на боли в грудной клетке, кашель с гнойной

15 мокротой, одышку, слабость, повышенную температуру. В результате проведенного обследования поставлен предварительный диагноз: полостная форма опухоли верхней доли левого легкого, 20 19,02.88 тест дал активность ГТ 128,3 пмоль/мин/10 клеток.

24.02.88 проведена операция — верхняя лобэктомия слева. Гистоэнализ N. 228877879 — хроническая пневмония с образовани25 ем абсцесса. Проводилось противовоспалительное лечение, Выписан 1,03,88 в удовлетворительном состоянии, Из таблицы видно, что низкий уровень

30 активности ГТ указывает на наличие у больного опухолевого заболевания, а средние и высокие показатели активности свидетельствуют о заболевании неонкологического характера, либо вообще об отсутствии забо35 левания легких.

Для сравнения с прототипом (способ

Хаберера и соав.) приводится табл. 2, в которой сравниваются предлагаемые параметры у онкологических и неонкологических

40 больных в способе-прототипе, Из представленных в табл, 2 данных следует, что предлагаемый способ имеет следующие преимущества; — позволяет получать достоверную диф45 ференциальную диагностику рака легкого, тогда как прототип не дает такой возможности; — дает возможность за 15 мин определить уровень активности глутэтион-S-транс50 феразы вместо 60 мин по способупрототипу.

Таким образом, предлагаемый способ дает высокий положительный эффект. тем, что, с целью повышения точности и ускорения способа, из веноэной крови выделяют лимфоциты, доводят концентрацию клеток до 2 10 в мл, клетки лизируют, е е

1797070

Таблица 1

Уровни активности ГТ в лимфоцитах крови в зависимости от патологического процесса в легких

Таблица 2

Сравнительный анализ изучаемых параметров у онкологических и неонкологических больных*

* В способе-прототипе изучаемым параметром являлась специфическая активность, выраженная в имп/мин/10 клеток, а в предлагаемом способе — удельная активность з

ГТ, выраженная в пмоль/мин/10 клеток, Составитель С.Рыбалин

Техред М.Моргентал

Корректор Н.Ревская

Редактор А.Козориз

Заказ 652 Тираж Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб„4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул,Гагарина. 101 супернатанте определяют активность глутатион-S-трансферазы и при ее активности меньше 34 пмоль/мин/10 клеток диагнос7 цируют рак легких.