Способ диагностики функциональных заболеваний толстой кишки с нарушением вегетативной нервной системы
Иллюстрации
Показать всеРеферат
Изобретение относится к медицине, в частности к клинической иммунологии и проктологии. Целью изобретения является повышение точности дифференциальной диагностики, сокращение времени инкубирования . Поставленная цель достигается тем, что в известном способе дифференциальной диагностики функциональных заболеваний с нарушением вегетативной нервной системы и воспалительных заболеваний толстой кишки, включающем двухэтапное инкубирование лимфоцитов с адренергическим препаратом и добавление эритроцитов барана, с последующей оценкой розеткообразующей способности используют адреналин при концентрации 10 М-10 М, который инкубируют с лимфоцитами в течение 10-15 мин и при снижении розеткообразующей способности Т-лимфоцитов более чем на 20% диагностируют функциональное заболевание толстой кишки с вегетативными нарушениями нервной системы . ел С
СОЮЗ СОВЕТСКИХ
СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ
РЕСПУБЛИК (я)ю G 01 N 33/53
ГОСУДАРСТВЕННОЕ ПАТЕНТНОЕ
ВЕДОМСТВО СССР (ГОСПАТЕНТ СССР) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
К ПАТЕНТУ (21) 4935407/14 (22) 12.05.91 (46) 07.03.93. Бюл. ¹ 9 (71) Ереванский институт усовершенствования врачей (72) Л,А.Кцоян, Э,Г,Багдасарян и П.С,Симаворян (73) Л,А.Кцоян, Э,Г.Бегдасарян и П.С,Симаворян (56) "Клиническая медицина", 1988, № 9, с.70 — 72, (54) СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ФУНКЦИОНАЛЬНЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ ТОЛСТОЙ
КИШКИ С НАРУШЕНИЕМ ВЕГЕТАТИВНОЙ
НЕРВНОЙ СИСТЕМЫ (57) Изобретение относится к медицине, в частности к клинической иммунологии и проктологии, Целью изобретения является повышение точности дифференциальной
Изобретение относится к медицине, в частности, к клинической иммунологии в проктологии.
Целью изобретения является повышение точности дифференциальной диагностики, сокращение времени инкубирования.
Способ осуществляется следующим образом.
В пробирку с соответствующим разведением гепарина берут 2,5 — 3 мл крови из локтевой вены, разводят средой 199, наслаивают на раствор фиколл-верографин или фиколл-урографии и центрифугируют при режиме 400 д в течение 40 минут в горизонтальном роторе. Выделяют лимфоциты, подсчитывают и доводят до оптимальной концентрации взвеси клеток — 2 10 в 0,1
6 мл среды 199, B центрифужную пробирку помещают 0,1 мл суспензии клеток и 0,1 мл
10 М раствора адреналина в среде 199. Ин„„. Ы„„1801213 А3 диагностики, сокращение времени инкубирования. Поставленная цель достигается тем, что в известном способе дифференциальной диагностики функциональных заболеваний с нарушением вегетативной нервной системы и воспалительных заболеваний толстой кишки, включающем двухэтапное инкубирование лимфоцитов с адренергическим препаратом и добавление эритроцитов барана, с последующей оценкой розеткообразующей способности используют адреналин при концентрации
10 М вЂ” 10 М, который инкубируют с лимфоцитами в течение 10 — 15 мин и при снижении розеткообразующей способности Т-лимфоцитов более чем íà 20% диагностируют функциональное заболевание толстой кишки с вегетативными нарушениями нервной системы. кубируют при 37 С в течение 10 мин. Параллельно ставят контрольный опыт, где вместо раствора адреналина к клеткам добавляют
0,1 мл среды 199, Затем ставят реакцию
Е-розеткообразования: к 0,1 мл суспензии клеток приливают 0,1 мл 0,5%-ой взвеси эритроцитов барана в среде 199. Перемешивают встряхиванием, инкубируют 10 минут в термостате при 37 С, центрифугируют при
200 д в течение 5 мин, после чего инкубируют при +10 С в течение 60 мин. По истечении инкубации клетки фиксируют глутаральдегидом и после отмывания готовят мазки. Мазки фиксируют в метаноле и красят по Романовскому-Гимза. Число ЕРОК вычисляют подсчетом 200 — 300 лимфоцитов в препарате, Эффект препарата
К вЂ” П определяют по формуле: . 100%, где
1801213
К вЂ” число Š— POK в контрольной пробе, П— число Е-POK в опыте.
Пример 1, В пробирки с гепарином взяли 2,5 — 3 мл крови из локтевой вены 61 здоровых и больных лиц. Взятую кровь развели средой 199 в соотношении 1:1 и наслаивали на 2,5 — 3 мл смеси фиколуротраст— плотность раствора 1,077 г/мл, Центрифугировали 40 минут при 400 д в центрифуге с горизонтальным ротором, Сняли белое "0 кольцо (выделенную взвесь лимфоцитов) в чистую пробирку, отмыли средой 199 два раза в течение 15 минут при 400 д и произвели подсчет лимфоцитов в 1 мл. К 0,1 мл взвеси лимфоцитов прибавили 10 М адреналина в 0,1 мл среды 199, Инкубировали при 37 С в течение 12 мин, центрифугировали 15 мин при 400 д и с осадком поставили реакцию Е-розеткообразования, Параллельно поставили контрольный опыт, где 20 вместо раствора адреналина к клеткам добавили 0,1 мл среды 199. Реакция Е-розеткообразования: к 0,1 мл суспензии лимфоцитов прибавили 0,1 мл 0,5 -ой взвеси эритроцитов барана. Смесь выдержали в термостате при 37 С 10 мин, центрифугировали в течение 5 мин при 200 д и инкубировали при +10 С в течение 60 мин, Затем фиксировали клетки глутаральдегидом и после отмывания готовили мазки. Мазки фик- 30 сировали в метаноле и красили по
Романовскому-Гимза, Число E-POK вычисляли подсчетом 200 — 300 лимфоцитов в препарате. Эффект препарата опреДеляли по
<>
35 формуле: П 100/, При дозе адреналина 10 M наблюдалось достоверное уменьшение числа Е-РОК у 28 больных синдромом раздраженной толстой кишки 45 —
33, не изменялось 24 больных 40 неспецифическим язвенным колитом 46 —
46, и у 9 практически здоровых лиц — 53 —
53
Пример 2. Повторно провели вышеописанный опыт при концентрации адрена- 45 лина 10 M. Полученные результаты идентичны примеру 1.
Пример 3. Повторно провели вышеописанный опыт, но при дозе адреналина
10 М, При этой дозе адреналин не влиял íà 50 число Е-РОК ни у больных синдромом раздраженной толстой кишки 45 / — 47, ни у больных неспецифическим язвенным колитом 46 -44, ни у практически здоровых лиц 53 — 57 .
Пример 4. Повторно провели вышеописанный опыт, но при концентрации адреналина 10 М, Число E-POK у больных синдромом раздраженной толстой кишки уменьшалось статистически недостоверно
45 — 38, у больных неспецифическим язвенным колитом не изменялось 46 -41, не изменялось и у здоровых лиц 53 -49, Пример 5. Опыт произведен также, как и в примере 2 с той лишь разницей, что инкубирование проводили в течение 5 минут. При этом времени инкубирования препарат не оказывал действия ни у больных неспецифическим язвенным колитом, ни у больных синдромом раздраженной толстой кишки, ни у здоровых лиц.
Пример 6. Опыт произведен также, как и в примере 1, с той лишь разницей, что инкубирование проводили в течение 25 — 30 минут. Имели результат, подобный опыту %
1, что свидетельствует о нецелесообразности проведения инкубирования более 15 мин, Использование настоящего предложения в сравнении с базовым объектом позволит повысить точность дифференциальной диагностики за счет нового критерия иммунологического характера и сократить время диагностирования за счет сокращения срока инкубирования, Формула изобретения
Способ диагностики функциональных заболеваний толстой кишки с нарушением вегетативной нервной системы, включающий инкубирование лимфоцитов с адренергическим препаратом и добавление эритроцитов барана с последующей оценкой розеткообразующей способности клеток, отличающийся тем, что, с целью повышения точности и сокращения времени диагностики, в качестве адренергического препарата используют адреналин в концентрации 10 М вЂ” 10 М, инкубирование осуществляют в течение 10 — 15 мин и при снижении розеткообразующей способности
Т-лимфоцитов более чем на 20 диагностируют функциональное заболевание толстой кишки С нарушением вегетативной нервной системы.