Способ прогнозирования гнойно-воспалительного осложнения у хирургических больных

Способ прогнозирования гнойно-воспалительного осложнения у хирургических больных

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

СОКОВ СОВГТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (si)s G 01 N 33/53

ГОСУДАРСТВЕННОЕ ПАТЕНТНОЕ

ВЕДОМСТВО СССР (ГОСПАТЕНТ СССР) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4850336/14 (22) 12.07.90 (46) 15.03.93. Бюл. ¹ 10 (71) Казахский научно-исследовательский инСтитут клинической экспериментальной хирургии им, А.Н.Сызганова . (72} M.À.Àëèåâ, С.А,Воронов, Б.B,Êàðàëüíèê, В,А.Писанка и Г.Б,Ракишев (56) Грудная хирургия, 1989, ¹ 6, 74 — 78. (54) СПОСОБ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ ГНОЙ-.

НО-ВОСПАЛИТЕЛЬНЫХ ОСЛОЖНЕНИЙ У

ХИРУРГИЧЕСКИХ БОЛЬНЫХ (57) Изобретение относится к медицине, а именно к иммунологии. Целью изобретения яв4яется прогнозирование гнойно-воспалиI тельных осложнений развивающихся в послеоперационном периоде у больных с хроническими заболеваниями легких. Цель достигается путем применения индивидуИзобретение относится к медицине, а им ьнно к иммунологии и может быть использовано для диагностики гнойных осложнений у хирургических больных в послеоперационном периоде.

Целью изобретения является упрощени и сокращение времени способа, повыше 1ие его прогностической ценности при прогнозировании послеоперационных гнойно-воспалительных осложнений у отдельно взятых больных.

Цель достигается тем, что согласно способу комплексной клинико-лабораторной диагностики, включающему клиническое обследование больных в динамике, клинико-лабораторные показатели, иммунологические показатели Т- и B-системы. Ж 1802327 А1 альной схемы забора крови в динамике процесса изменения показателей иммунологической реактивности до- и послеоперационного периода, а также применения интегрального иммунологического теста определения адгезивных свойств лейкоцитов, включающего такие процессы как: адгезию лейкоцитами эритроцитов, феномен антигеннеспецифического по.вреждения гранулоцитов, фагоцитов, прилипание лейкоцитов к поверхности пробирок. Обработка результатов исследования автоматизирована за счет применения зл ктронных счетчиков микрочастиц

Пикоскель, венгерской фирмы Медикор-Ву. дапешт, и программного обеспечения на отечественной 3ВМ СМ 1420. Способ может быть использован в иммунологических лабораториях для научных и клинических исследований. 1 ил., 1 табл. ю ° иммунитета, основные классы иммуногло- 0" булинов А, М, G, фагоцитарную актив- O ность, уровень циркулиоующих иммунных Э комплексов, определение индекса тяже- (д) сти (клинического и лабораторного), путем оценки степени риска послеоперационных гнойно-воспалительных осложнений, прогнозируют послеоперационные гнойно-воспалительные осложнения у конкретных больных путем наблюдения каждого из них в динамике по строго определенной схеме, где исходное значение определяют обяэател ьно за сутки до оперативного вмешательства, затем за 15-20 мин до начала и по окончании операции и далее в 1-е, 2-е, 3-и и последующие сутки послеоперационного периода в зависимости от конкретно сло1802327 жившейся ситуации для данного больного с использованием для этой цели интегрального иммунологического способа определения адгезивных свойств лейкоцитов (впервые разработанного в нашей лаборатории), включающего адгезию лейкоцитами эритроцитов, фагоцитов, прилипание клеток к стеклу, антигеннеспецифическое разрушение нейтрофильных лейкоцитов при определении всех этих показателей одномоментно и выражающихся суммарным индексом адгезии (ИА), который в данном случае имеет качественное значение и при наличии тенденции к снижению относительно исходного и предыдущего значения в любой точке временной последовательности послеоперационного периода расценивается как показатель развития гнойно-воспалительного осложнения, развивающегося как правило через 18-20 часов от начала снижения ИА, Предлагаемый способ интегральной оценки адгезионных свойств лейкоцитов заключается в следующем.

В центрифужную пробирку помещают

0,1 мл чистой взвеси лейкоцитов, состоящих из нейтрофилов, лимфоцитов, моноцитов и др. клеток, с содержанием 5 +. 0,5 тыс, клеток в 1 мм и 0,1 мл эритроцитов барана с содержанием 50 1,0 тыс.клеток, Соотношение 1:10, Клетки подсчитывают аппаратным способом (контрольная проба). Взвесь клеток инкубируют в течение 5 мин при 37 С на водяной бане, центрифугируют 5 мин при

1000 об/мин и выдерживают в течение 60 мин при 12 С, За это время в клетках заканчиваются все биологические процессы. Затем клетки ресуспендируют и вновь подсчитывают(опытная проба). Полученное .значение счета опытной пробы вычитают из значения счета контрольной пробы и полученную разницу выражают в процентах по отношению к контрольной пробе.

ИА . 100 где ИА — индекс адгезии лейкоцитов;

К вЂ” контрольная проба;

Оп — опытная проба.

Разница между контрольной и опытной пробами представляет собой 4-х системный интегральный показатель, который включает в себя такие процессы как: адгезия, фагоцитоз, прилипание, антигеннеспецифичесчкое повреждение гранулоцитов, накладывающиеся во время реакции лейкоцитов с эритроцитами один на другой и определяемый в виде суммарного индекса адгезии (ИА).

В зависимости от происходящих в организме человека изменений в норме и патологии, различают два основных вида иммунологических сдвигов, в положительную или отрицательную сторону. При антигеннеспецифическом повреждении лейкоцитов преобладает отрицательная реакция, когда опыт превышает контроль. При адгезии лейкоцитами эритроцитов, фагоцитозе, прилипания лейкоцитов к стенкам пробирок— преобладает положительная реакция. В этом случае контроль превышает опыт, 15 В зависимости от конкретной иммунологической ситуации, наблюдаемой у больного в динамике в до- и послеоперационном периоде, а также у практически здоровых людей и доноров станции переливания крови, значения показателей распределяются . следующим образом: I, "контроль меньше опыта" — отрицательная реакция; превалирует процесс антигеннеспецифического разрушения гранулоцитов, наблюдается у доноров, II. "контроль превышает опыт" — положительная реакция; превалируют процессы адгезии лейкоцитами эритроцитов, фагоцитоз, прилипание клеток к стеклу; наблюда30 ются у больных с патологией легких (рак, хронические заболевания), .

1И. "контроль равен опыту" — процессы уравновешены; наблюдаются у практически здоровых людей.

35 "ИА" в.норме и патологии в абсолютных значениях распределяются следующим образом: у доноров — /-/ 11 — /-/ 3 ; у практически

40 здоровых людей — /-! 3 — /+/ 3 ; у больных с патологией легких— — раковые больные — /+/ 3 — /+/ 10 ; — хронические забо45 левания легких — /+/ 10 — /+/ 30 .

Отрицательные значения ИА свидетельствуют о том, что в реакции взаимодействия лейкоцитов с эритроцитами барана преоб- . ладает процесс антигеннеспецифического

50 повреждения нейтрофильных лейкоцитов.

Положительные значения ИА свидетельствуют о преобладании процессов адгезии лейкоцитами бараньих эритроцитов, фагоцитоза и прилипания клеток к поверхности пробирок.

У практически здоровых людей процессом антигеннеспецифического повреждения гранулоцитов, адгезии, фагоцитоза и прилипания — уравновешены.

1802327

Схема индивидуального прогнозирования послеоперационных гнойно-воспалительных осложнений показана на фиг, По оси ординат графика откладывают значения ИА здоровых и больных людей, По 5 оси абсцисс — время забора крови в сутках и часах до- и послеоперационном периоде, Пример. Точки la, б, в, r нанесенные . на ось ординат за сутки до начала оперативного вмешательства свидетельствуют о раз- 10 личных вариантах исходных уровней

Состояния иммунологической реактивности

Организма больных.

Затем наносят значения ИА, полученные за 15-20 мин до начала оперативного 15 вмешательства. Эти значения имеют тенденцию к резкому снижению по сравнению с исходными данными, Процесс снижения исходных значений ИА расценивается как стрессовая реакция организма, возникаю- 20 щая под воздействием психо-эмоциональных факторов на предстоящую операцию (на фиг. отрезки la, б, в, г — 2), В конце операции отмечается небольшой подъем показателей ИА (отрезок 2 — 3), 25 . В первые сутки послеоперационного периода значения ИА оезко возрастают и в некоторых случаях достигают исходных показателей превосходят их (отрезок 3 — 4).

Собственно прогнозирование гнойно- 30 воспалительных осложнений начинается с того момента когда, в первые, или на вторые, или на третьи, или на четвертые и т.д; сутки (точки 4, 6, 8, 10...) послеоперационного периода отмечается резкое снижение по- 35 казателей ИА (отрезки 4 — 5, 6 — 7, 8 — 9, 10 — 11) относительно их исходных значений (la, б, в, r) или предыдущих максимальных значений (;гочки 4, 6, 8, 10).

Таким образом диагностика гнойных 40 осложнений осуществляется в динамике г1ри сравнении показателей ИА по вертикали и горизонтали координатной сетки осей ординат и абсцисс.

При установлении факта снижения по- 45 казателей ИА в определенный временной

Момент послеоперационного периода, гной но-вос пал ител ьн ые осложнения развиваются как правило через 18 — 20 ч.

Пример 1. Больной И., 42 года . Дз: 50

Хронический абсцесс.

Кровь у больного забирали из локтевой вены в количестве 4-5 мл.

Для стабилизации крови применяли гекларин из расчета 25 ед на 1 мл. 55

Затем кровь отстаивали при комнатной температуре 20 — 25 С в течение 40-60 мин.

Верхний слой плазмы, содержащий лейкоциты, переносили в чистую пробирку.

Для отсасывания и переноса клеток из одной пробирки в другую использовали шприц с иглой 130 мм и диаметром отверстия канала 0,6 мм.

Полученную взвесь клеток разливали в центрифужные пробирки 1 мл и центрифугировали в течение 10 мин при 1000 об/мин.

После окончания центрифугирования верхний слой плазмы отсасывали до плотного осадка и затем осторожно ресуспендировали. Небольшую примесь эритроцитов удаляли осмотическим шоком. Для этого в пробирку добавляли 0,3 мл дистиллированной вбды на 15 сек и поперечными колебаниями пробирки обеспечивали полный лизис эритроцитов. Время лизиса эритроцитов строго выдерживали. По прошествии 15 сек быстро добавляли 1 мл 0,85) -ного раствора хлористого натрия или среды 199.

Полученную взвесь лейкоцитов дважды отмывали центрифугированием по 10 мин при

1000 об/мин. Клетки подсчитывали аппаратным способом.

Подсчет клеток на аппарате типа Пикоскель: С помощью микропипетки 0,02 мл взвеси клеток переносили в стаканчик с 12,5 мл электролита (0,85 -ный раствор хл, натрия) и наклонными движениями перемешивают содержимое. После этого флакончик устанавливают в аппарат. Для подсчета лейкоцитов используют измерительный капилляр диаметром 100 мкм. Режим подсчета клеток на аппарате — "для лейкоцитов", устанавливают путем нажатия соответствующей клавиши.

Измерения проводят не менее 3-х раз, после чего выводят среднее арифметическое. Полученное значение счета умножают на 100 и получают количество лейкоцитов в

1 MM . Например: На табло аппарата или после усреднения получено значение счета равное 50. Это значение умножают на 100 и получают 5000 клеток и в частности лейкоцитов в 1 мм .

Затем готовят стандартные количества эритроцитов (50 +. 1,0 тыс. в 1 ммз) и лейкоцитов (5 0,5тыс. в 1 ммз).

Подсчет эритроцитов в данном случае проводится в режиме работы аппарата "Для лейкоцитов".

Способ определения адгезивных свойств лейкоцитов осуществляется следующим образом: 0,1 мл эритроцитов барана с содержанием 50 тыс. клеток с 1 мм помещают в центрифужную пробирку. В эту же пробирку добавляют 0,1 мл лейкоцитов с содержанием 5 тыс. клсток в 1 мм . Взвесь клеток осторожно перемешивают путем

1802327 вращения пробирки вокруг ее продольной оси, С целью повышения достоверности результатов готовили не менее 3 параллельных проб. 5

Из каждой пробы по 0,02 мл взвеси клеток переносят в три флакона с 12,5 мл электролита и подсчитывают на аппарате

Пикоскель в режиме работы аппарата для подсчета лейкоцитов (контрольная проба). 10

Полученные значения измерений в трех пробах усредняют. Затем пробы выдерживают на водяной бане 5 мин при 37 С, После этого центрифугируют 5 мин при 1000 об/мин и инкубируют в течение 60 мин при 15

12" С. Осадок клеток осторожно ресуспендируют и подсчитывают на аппарате Пикоскель (опытная проба) в том же режиме.

Полученное значение счета опытной пробы вычитают иэ значения счета конт- 20 рольной пробы и полученную разницу выражают в процентах по отношению к контрольной пробе.

Все математические и статистические расчеты производились на ЭВМ СМ 1420 25 отечественного производства по специально составленной для этих целей программе и распечатывались в виде бланка с указанием паспортных данных больного, диагноза и полученных результатов исследования. 30

По мере накопления данных в динамике

Э ВМ изображает их в виде графика и распечатывает на бланке.

Динамика показателей ИА у больного

И о . 35 за сутки до операции 18,6 перед началом операции 3,4 в конце операции 13,1 в первые сутки послеоперационного периода 15,9 40 на 6-е сутки 3,5 на 8-е сутки 1,8

Интервал между 1-ыми и 6-ыми сутками послеоперационного периода характеризуется резким снижением ИА, Снижение со- 45 ставило относительно исходного уровня—

81,2%.

Осложнения гнойно-воспалительного характера у больного начались на 2-е сутки послеоперационного периода и достигли 50 своего наивысшего развития к 6-ым суткам.

В это время у больного появились температура 38 С, недомогание, слабость, В периферической крови обнаружены пэлочкоядерные нейтрофильные лейкоциты, СОЭ увеличи- 55 лась до 51 мм/ч.

Пример 2. Больной Г., 55 лет. Дз:

Плоскоклеточный неороговевэющий рак нижней доли левого легкого.

Динамика показателей ИА у больного Г., 7,: эа сутки до операции 5,4 перед началом операции 2,9 в конце операции 8,4 на вторые сутки послеоперационного периода 19,2 на пятые . 5.6

Интервал между 2-ыми и 5-ыми сутками послеоперационного периода у больного характеризуется резким снижением ИА.

Снижение составило относительно предыдущего уровня — 70,8,.

Гнойно-воспалительные осложнения начались на 3-и сутки послеоперационного периода и характеризовались подьемом температуры до 37,8 С, увеличением СОЭ до 47 мм/ч, появлением палочкоядерных нейтрофильных лейкоцитов — 7 ф,.

Пример 3, Больной С., 72 года. Дэ:

Кавернозный рак правого легкого, Динамика показателей ИА у больного о(, за сутки до операции 3,8 в первые сутки послеоперационного периода 4,7 на вторые стуки 4,7 на восьмые 11,3

Резких снижений ИА на протяжении 8ми суток послеоперационного периода у больного не отмечается.

Гнойно-воспалительное осложнение не развилось.

Пример 4. Больной Т. 23 года. Дз:

Эхинококкоз легких, Динамика показателей ИА у больного T„g: за сутки до операции 1,5 в первые сутки послеоперационного периода 6,7 на третьи сутки /-/1,2 на шестые сутки 7,0

Интервал значений ИА между 1-ыми и

3-ми сутками послеоперационного периода резко снижен — до 117,9 относительно предыдущего значения (6,7).

Гнойно-воспалительное осложнение развивалось на 2-е сутки послеоперационного периода и характеризовалось подьемом температуры до 38 С, появлением в периферической крови палочкоядерных лейкоцитов, увеличением СОЭ до 50 мм/час.

Таким образом, предлагаемый способ прогнозирования гнойно-воспалительных осложнений позволяет с высокой степенью надежности, в отличие от известного способа оценки степени риска гнойных осложнений, прогнозировать послеоперационные гнойно-воспалительные осложнения у отдельно взятых больных, 10

1802327

Формула изобретения

Иммунологические показатели прогнозирования послеоперационных осложнений у больных с хроническими заболеваниями легких

Использование в предлагаемом способе интегрального иммунологического теста определения адгезивных свойств лейкоцитов, включающего такие одновременно протекающие процессы как: адгезия лейкоцитами 5

Эритроцитов, феномен антигеннеспецифичеСкого повреждения нейтрофильных лейкоцитов, фагоцитоз, прилипание клеток к стеклу пробирок и выражающихся через суммарный индекс адгезии (ИА), определяемого одномо- 10 ментно, позволяет упростить и сократить время диагностики гнойно-воспалительных осложнений.

Одномоментное определение в предлагаемом спосоое ведущих иммунологических 15 тестов путем автоматизированных вычислений полученных значений счета контрольйой и опытной проб, минуя промежуточные подсчеты клеток визуальным способом на предметных стеклах, как это происходит в 20 известном способе, также упрощает и сокращает время способа.

Использование отечественной ЭВМ СМ

1420 со специально составленными программами и электронных счетчиков клеток 25 т! па Пикоскель ПС-4, венгерской фирмы

"Медикор", позволяет в автоматическом режиме следить за состоянием больного и своевременно сообщать об изменениях в иМмунном статусе больного, что обеспечи- 30 вает точную и надежную диагностику гнойно-воспалительных осложнений.

Способ поясняется таблицей и чертежом, где

I — доноры станции переливания крови

II — практически здоровые люди

И! — больные с раковыми заболеваниями легких

IV — больные с хроническими заболеваниями легких ! сдо/оп — 1-е сутки до операции до/on — до операции за 15-20 мин и/on — после окончания операции

Ic n/on — 1-е сутки послеоперационного периода

2,3,4,5„, — и т.д. сутки послеоперационного периода

Способ прогнозирования гнойно-воспалительного осложнения у хирургических больных с заболеванием легких путем иммунологического обследования больного, отличающийся тем, что, с целью повышения точности прогнозирования и упрощения способа, в динамике определяют показатели адгезии лейкоцитами эритроцитов, адгезии клеток к стеклу, фагоцитоза и антигеннеспецифического разрушения гранулоцитов за сутки за 15 — 20 мин до операции, в конце операции и далее в первые, вторые и третьи сутки послеоперационного периода высчитывают суммарный индекс адгезии и при снижении его относительно исходного или предыдущего значения прогнозируют гнойно-воспалительное осложнение.

1802327

И ндекс тяжести

И-ая г ппа

I — ая r nna

Ill — r ппа

1,7+0,2

6,8+0,6

Клинический Пк

Лабо ато ный Пл

1,2"=0,1

4,9 0,6

1,1 +0,1

4,3 +0,2

**! — группа тестов свысокими показателями, I — — "— — "— с низкими

;Н ф — нейтрофил ьн ые лейкоциты, Лф — лимфоциты, Е-РОК вЂ” Š— розеткообразующие клетки (Лф с 3-мя и более адгезированными эритроцитами), Ig М вЂ” иммуноглобулин, ЦИК вЂ” циркулирующие иммунные комплексы

Составитель Г,Крюкова

Техред M.Ìoðãåíòàë Корректор М.Керецман

Редактор В.Трубченко

Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул.Гагарина, 101

Заказ 847 Тираж Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35. Раушская наб., 4/5