Способ определения сенсибилизации организма к билиарным антигенам

Способ определения сенсибилизации организма к билиарным антигенам

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (si>s G 01 М 33/53

ГОСУДАРСТВЕННОЕ ПАТЕНТНОЕ

ВЕДОМСТВО СССР (ГОСПАТЕНТ СССР) СПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21 4918541/14 (22 12,03.91 (46! 15,03.93. Бюл. ¹ 10 (71) Киевский медицинский институт им, А,А.Богомольца (7 ) Т,Д.Никула, В,И.Бульда, A,Â.Ôåäîðè÷ и

А..Сзинцицкий (5 Фомий Д,Х. Эпидемический гепатит, Те,докл. XY научной сессии института вирусо огии им. Ивановского. М., 1962, с.16 — 18. (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ СЕНСИБИЛИЗАЦИИ ОРГАНИЗМА К БИЛИАРНЫМ.

А ТИГЕНАМ (57) Способ определения сенсибилизации организма к билиарным антигенам относится к медицине, к разделу иммунологической диагностике. Цель изобретения — повы шеИзобретение относится к медицине, в частности к разделу иммунологической диагностики сенсибилизации организма к били рным антигенам.

Целью изобретения является повышени1е точности способа за счет выявления се сибилизации к билиарным антигенам в от ельной желчной кислоте,, Способ осуществляется следующим обра ом.

При постановке реакции с желчью 1 ча ть сыворотки крови смешивают с 0,3 част ми желчи для каждой фракции (пузырной и еченочной) желчи в отдельности. При пост новке реакции с желчными кислотами

on еделяют дозы реагентов с использованием реакции потребления комплемента, .которые составляют для: дезоксихолевой кислоты 1:2 (50 мг кислоты + 3 мл изотоничефкого раствора хлорида натрия, неболь„„ЯЦ„„1802332 Al ние точности способа за счет выявления сенсибилизации организма к билиарным антигенам в отдельной желчной кислоте.

Сущность заключается в том, что инкубируют сыворотку крови с цельной желчью и с каждой из желчных кислот в отдельности, проводят количественную оценку связывающей способности иммуноглобулинов основных классов сыворотки крови с желчью и желчными кислотами путем установления процентного соотношения суммарных иммуноглобулин-антител к суммарным иммуноглобулинам и при его значении от 3,2 до

9,4 для любой из желчных кислот или цельной желчи устанавливают наличие сенсибилизации организма к соответствующей желчной кислоте или цельной желчи, 3 табл. шой осадок); холевой кислоты 1;2 (50 мг кислоты+ 1 мл изотонического раствора хлори. да натрия); литохолевой кислоты 1:16 (50 мг кислоты + 5 мл изотонического раствора CO хлорида натрия, небольшой осадок); глико- С) холевой кислоты 1:32 (50 мг кислоты + 1 мл . ) изотонического раствора хлорида натрия). (Д

Разведение антигенэ подбирают таким об- (Ъ разом, чтобы в нем проявились лишь начальные антикомплементарные свойства, если они имеются. Кроме того, создаются две контрольные пробы, одна из которых содержит 1 часть сыворотки крови и 0,3 части изотонического раствора хлорида натрия, а вторая — 1 часть изотонического раствора хлорида натрия и 0,3 части желчи или 0,3 части найденного разведения для каждой кислоты в отдельности. Пробы инкубируют при 37 С в течение 1 ч, затем центрифугируют при 8000 об/мин 20 мин. После осажде1802332

50

3 ния центрифугированием образовавшихся комплексов энтиген-антитело определяют связавшиеся с антигеном иммуноглобулинантитела по разнице между суммарным количеством. иммуноглобулинов сыворотки крови в цельной желчи либо в отдельной желчной кислоте, инкубированных (сыворотка и желчь) раздельно, и количеством иммуноглобулинов сыворотки крови и желчи, либо отдельной желчной кислоты, инкубированных вместе, причем указанное определение проводят для каждого класса иммуноглобулинов, например, при помощи реакции преципитации в геле методом радиальной иммунодиффузии. Указанное определение проводят для каждого класса иммуноглобулинов, Затем высчитывают показатель процентного соотношения суммарных иммуноглобулин-антител к суммарным иммуноглобулинам и при его значениях от 3,2 до 9,4 для любой из желчных кислот или цельной желчи устанавливают наличие сенсибилизации организма к соответствующей желчной кислоте или другим компонентам желчи.

Пример. Больной Н., 45 лет, Поступил с жалобами на периодически возникающее чувство тяжести в правом подреберье, сопровождающееся зудом и лихорадкой, При проведении традиционных методов исследования (трехмоментного дуоденального зондирования и внутривенной контрастной холецистографии) патологических изменения со стороны желчного пузыря и желчевыводящих путей не выявлено, Общий анализ крови: гемоглобин 148 г/л; эритроциты 4,7х х10 в 1 л; цветной показатель 0,94; тромбоциты 280 . 10 в 1 л; лейкоциты 6,0 10 в

1 л; палочкоядерные нейтрофилы 2%; сегментоядерные нейтрофилы 68%; энзинофилы 5%; базофилы 1%; лимфоциты 20%; моноциты 4%; скорость оседания эритроцитов 8 мм/ч, Проведено определение сенсибилизэции к желчным кислотам и другим компонентам желчи, Для этого использовали сыворотку и кровь больного.

Определяли связавшиеся с антигеном иммуноглобулин-антитела следующим образом: в две пробирки (опытнуюи контроль. 1) наливали по 0,15 мл сыворотки крови, а в

3-ю пробирку (контроль II) — такое же количество изотонического раствора хлорида натрия. Антиген в объеме 0,05 мл добавляли в опытную пробирку в контроль II, а в контроль I — такое же количество изотонического раствора хлорида натрия. Разведения антигена, как было указано выше, подбирались таким образом, чтобы в нем,проявлялись лишь начальные энтикомплементарные свойства, если они имелись. Содержимое пробирок смешивали, инкубировали в течение 1 часа при 37 С, затем центрифугировали при 8000 об/мин. После осаждения центрифугированием образовавшихся комплексов антиген-антител определяли связавшиеся с антигеном иммуноглобулинантитела по разнице междусуммарным количеством иммуноглобулинов в сыворотке крови и антигене, инкубированных раздельно, и количеством иммуноглобулинов сыворотки крови и антигена, инкубировэнных вместе, причем указанное определение проводили для каждого класса иммуногл обул ин о в (см.табл, 1).

B табл.2 представлено количество сывороточных иммуноглобулинов, определенных при помощи реакции преципитации в геле методом радиальной иммунодиффузии (в г/л).

Расчет показателя процентного соотношения суммарных иммуноглобулин-антител к суммарным иммуноглобулинам приведен в табл.3.

На основании полученных данных была определена сенсибилизация организма больного к холевой кислоте, а также к печеночной пузырной желчи в целом, причем к холевой кислоте в большей степени. После проведенного трехнедельного курса специфической гипсосенсибилизирующей терапии самочувствие больного нормализовалось.

Эффективность предлагаемого способа по сравнению с прототипом заключается в повышении точности определения сенсибилизации организма к билиарным антигенам в количественном выражении (в прототипе использован менее точный качественный метод), Предложенный способ в отличие от прототипа, обеспечивает возможность дифференцировки сенсибилизации к отдельным билиарным антигенам.

Формула изобретения

Способ определения сенсибилизации организма к билиарным антигенам, включающий инкубацию сыворотки крови с желчью того же лица, отличающийся тем, что, с целью повышения точности способа за счет выявления сенсибилизации к отдельной желчной кислоте определяют количественное содержание иммуноглобулинов классов А, G, M и иммуноглобулин-антитела к ним в цельной желчи и в отдельной желчной кислоте, далее высвечивают показатель процентного соотношения суммарных иммуноглобулин-антител к суммарным иммуноглобулинам и при значении его 3,2 — 9,4 для любой из желчных кислот или цельной желчи определяют наличие сенсибилизации организма к билиарным антигенам.

1802332

Таблица 2

Составитель Г.Крюкова

Техред M.Ìîðãåíòàë Корректор M.Ñàìáîðcêàÿ

Редактор В.Трубченко

Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул.Гагарина, 101

Заказ 847 Тираж Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж 35, Раушская наб., 4/5