Способ определения карнитина в сыворотке крови

Способ определения карнитина в сыворотке крови

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

Использование; в области аналитической химии. Сущность изобретения: анализируемую пробу обрабатывают щелочным раствором боргидрида натрия при 155- 165°С, избыток боргидрида натрия разлагают соляной кислотой, полученную смесь экстрагируют хлороформом и экстракт фотометрируют.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (st)s G 01 N 30 / 00

ГОСУДАРСТВЕННОЕ ПАТЕНТНОР

ВЕДОМСТВО СССР (ГОСПАТЕНТ СССР) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИ4ЕТЕЛЬСТВУ (21) 4874783/04 (22) 09.07.90 (46) 23.03;93. Бюл.N 11 (71) Рязанский медицинский институт им, акад. И.П.Павлова (72) Е,А.Строев, В.Г,Макарова, Л.Г.Рябикина и Л.К. Веден ькина (56) Cederblad G,7.indstedt S., Clin, Chim.

Acta.1972, 37, 235-243.

Изобретение относится к биохимии, гигиене питания, витаминологии, клинической фармакологии, а именно к способам определения витаминоподобного вещества карнитина, и может быть использовано в клинической практике и для исследовательских работ при изучении физиологических и патологических состояний организма человека и животных, Целью данного изобретения является газохроматографический способ определения карнитина в сыворотке крови, обеспечивающий безопасность работы и повышение чувствительности определения.

Пример. К 2 мл супернатанта, полученного после добавления к сыворотке трихлоруксусной кислоты и центрифугирования в течение 15 минут при 3000 об/мин добавляют 0,3 мл реагента (2,0 M NaOН, содержащая 40 мг NaÂÍ4/ìë) и нагревают на масляной бане при 160 в течение 30 минут, После охлаждения избыток непрореагировавшего боргидрида натрия разлагают соляной кислотой (0,5 мл HCI 5,5М), и полученную смесь экстрагируют 0,5 мл хлороформа при энергичном встряхивании.

Полученный экстракт упаривают до объема., .. Ы 1803855 А1 (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ КАРНИТИНА

В СЫВОРОТКЕ КРОВИ (57) Использование; в области аналитической химии. Сущность изобретения: анализируемую пробу обрабатывают щелочным раствором боргидрида натрия при 155—

165 С, избыток боргидрида натрия разлагают соляной кислотой, полученную смесь экстрагируют хлороформом и экстракт фотометрируют.

0,2 мл и аликвоту 2 — 5 мкл анализируют на хроматографе с пламенно-ионизационным детектором. Условия хроматографирования: Металлическая колонка длиной 3 м и диаметром 3 мм заполнена полиэтиленгликольадипинатом (20%), нанесенным на хроматон N-AW (0,20-0,25 мм). предварительно обработанный о-фосфорной кислотой (3%).

Температура колонки 130 С, испарителя 180 С. Расход газа-носителя (гелий) 40 мл/мин, водорода 30 мл/мин, воздуха 300 мл/мин, Чувствительность усилителя 20х

-12

10 . скорость движения диаграммной ленты

200 мм/ч, В этих условиях время выхода у -бутиролактона составляет 42 мин 10 с.

Количественную оценку карнитина в неизвестных образцах сыворотки проводили по калибровочной кривой, полученной методом абсолютной калибровки.

С использованием предлагаемого способа была определена концентрация карнитина в сыворотке крови доноров, Она колебалась от 20 до 70 мкмоль/л. Относительная ошибка определения не превышала

15%.

1803855

15

30

40

50

Составитель И. Кесоян

Техред М,Моргентал Корректор М, Андрушенко

Редактор

Заказ 1054 Тираж Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул.Гагарина, 101

Формула изобретения

Способ определения карнитина в сыворотке крови, включающий обработку химическим реагентом, отличающийся тем, что, с целью сокращения времени определения и обеспечения безопасности проведения способа, анализируемую пробу обрабатывают щелочным раствором боргидрида натрия при температуре 155-165 С, избыток боргидрида натрия разлагают соляной кислотой, полученную смесь экстрагируют хлороформом и экстракт фотометрируют.