Способ определения периодов гипертонической болезни

Способ определения периодов гипертонической болезни

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

Использование:.медицина, диагностика периодов (криз, вне криза) течения гипертонической болезни (ГБ). Сущность изобретения: измеряют величину активности каталазы или супероксиддисмутазы эритроцитов . Способ позволяет упростить, ускорить и обезопасить процесс диагностики различных периодов течения ГБ, не снижая точность и надежность диагностики-.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК

ГОСУДАРСТВЕЮЮЕ ПАТЕНТНОЕ

ВЕДОМСТВО СССР (ГОСПАТЕНТ СССР) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4893914/14 (22) 26.12.90 (46) 23.03.93.. Бюл. йв 11 (71) Крымский медицинский институт и Украинский институт усовершенствования врачей (72) В.Н,Нескоромный, Ю.И.Кулагин, H,С.Кузнецов и В.В.Николаев (56) Кулагин l0.И. и соавт. — В сб4 Гипертоническая болезнь, атеросклероз и коронарная недостаточность, Киев. 1988, с. 34-36.

Изобретение относится к медицине, в частности к кардиологии, преимущественной областью его использования является диагностика различных периодов клинического течения гипертонической болезни(ГБ) — гипертонического криза и внекризового периода.

Цель изобретения — упрощение способа диагностики различных клинических периодов течения ГБ за счет сокращения трудоемких операций путем определения у больных

; ГБ активности каталазы и супероксиддисмутазы (СОД) эритроцитов.

Способ осуществляется следующим образом.

Из локтевой вены больного в пробирку с раствором цитрата натрия отбирают 5 мл крови, центрифугируют 10 мин (4000 об/мин) и затем отделяют эритромассу от плазмы, Эритромассу дважды промывают физиологическим раствором (перемешиванием и центрифугированием по 5 мин при

2000 об/мин). После второго центрифугирования надосадок сливается..Для определения активности каталазы 0,1 мл промытой э ритромассы гемолизируют дистиллирован., ной водой и получают гемолизат разведения

„„5U„„1803869 А1 (st)s G 01 и 33/483, А 61 В 10/00 (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ПЕРИОДОВ

ТЕЧЕНИЯ ГИПЕРТОНИЧЕСКОЙ БОЛЕЗНИ (57) Использование: медицина, диагностика периодов(криз, вне криза) течения гипертонической болезни (ГБ). Сущность изобретения: измеряют величину активности каталазы или супероксиддисмутазы эритроцитов, Способ позволяет упростить, ускорить и обезопасить процесс диагностики различных периодов течения ГБ, не снижая точность и надежность диагностики;

1;2000. 0,1 мл полученного гемолиэата переносится в пробирку, доводится 0,05 М TpucHCl буфером рН 7,4 до 1 мл, прибавляется 2 мл 0,03 $ HzOz и инкубируется в термостате при 25 С в течение 10 мин. После инкубации вносится 2 мл 47, раствора молибдата аммония, Полученную пробу спектрофотометрируют при длине волны 410 нм, Экстинцию ойытной пробы сравнивают с экстинцией контрольной пробы, которую получак т таким же образом, только 0,1 мл гемолизата добавляется в пробирку после инкубации в термостате, непосредственно перед добавлением молибдата аммония, По разнице между экстинциями контрольной и опытной проб судят о величине катализной активности. Расчеты производят, исходя из коэффициента миллимолярной экстинции перекиси водорода, и результаты выражают в мМ инактивированной HzOz 1 л эритромассы за

1 секунду, Для определения активности

СОД брали 0,1 мл отмытой эритромассы, как это рекомендовано Е.Е Дубининой и соавт, при подготовке эритроцитов для исследования СОД в системе феназинметасульфатНАД н-нитросиний тетраэолий (Лаб. дело, 1983, 10, 30-33). Эти 0,1 мл отмытой эритро1803869 зы составила 165 мМ НгОг/л с, активность

СОД вЂ” 34%. Был сдален вывод о наличии у больной гипертонического криза.

В дальнейшем комплексное клинико-. лабораторное исследование и наблюдение

55 за течением болезни подтвердили предположение о наличии у больной гипертонического криза.

Пример 2. Больной M., 47 лет, был впервые госпитализирован в терапевтическое отделение по поводу повышения АД с,массы гемолизируют и разбавляют 0,9 мл 5 мМ трис-НС! буфера (рН 7,4), переносят в центрифужную пробирку, добавляют 0,25 мл этанола, 0,15 мл хлороформа и 0,6 г кристаллического КНгРО4. Все это перемешивается стеклянной палочкой в течении 15 мин, выдерживается в холодильнике при

4ОС 30 мин и центрифугируется при 5000 аб/мин 15 мин, Затем отбирается надосадочная жидкость. В пробирку последовательно вносят 1,7 мл фосфатного буфера (0,15 М, рН 7,8), 2 мл раствора нитросинего тетразолия (0,01 г на 100 мл 0,15 М фосфатного буфера, рН 7,8), 0,5 мл раствора феназинметасульфата (0,003 r на 150 мл 0,15 M фосфатного буфера, рН 7,8). 0,1 мл надосадочной жидкости и 0,9 мл раствора НАД Н (0,01 г на 24 мл 0,15 M фосфатного буфера, рН 7,8). Содержимое перемешивали стеклянной палочкой, и пробирку помещали в темноту и термостэтирвали при 25 С в течении 10 мин. После чего, сразу на фотоэлектроколориметре при длине волны 450 нм определяли величину экстинции и сравнивали с экстинцией контрольной пробы, которую получали таким же образом, только в пробирку не вносили надосадочную жидкость. О величине активности СОД судят по разнице экстинций контрольной и опытной проб и выражают в. процентах (от экстинции 30 контрольной пробы).

При рассмотрении изучаемых показателей в исследуемых группах было выявлено, что у 90% больных 1Б во время криза активность кэтэлазы составила от 165 MM

НгОг/л.с до 235 мМ НгОг/л.с, тогда как во внекризовом периоде у 90% больных этот показатель находился в пределах 240 — 314 мМНгОг/л.с, Активность СОД от 32% яо

44% отмечена у 90,5% больных ГБ во время 40 криза, а от 47- до 64оь — у 90,5% больных во внекризовом периоде.

Пример 1. Больная Г., 50 лет, была госпитализирована в терапевтическое отде ление предварительным диагнозом; гипер- 45 тоническая болезнь И стадии, При исследовании антиоксидантных ферментов обнаружено: активность. каталадиагнозом: гипертоническая болезнь II стадии, При исследовании антиоксидантных ферментов обнаружено: активность каталазы составила 183 мМ НгОг/л.с., активность

СОД вЂ” 32%. На основании этих данных было высказано мнение о наличии у больного гипертонического криза.

Детальное изучение анамнеза, клиниколабораторные данные, наблюдение за динамикой процесса и эффективностью терапии подтвердили данное предположение.

Пример 3. Больная К,; 48 лет, поступила в терапевтическое отделение в плановом порядке при отсутствии значительных жалоб с умеренно повышенным АД (170175/100-105 мм рт.ст.), Диагноз при поступлении; гипертоническая болезнь li.ñòàäèè, При исследовании антиоксидантных ферментов обнаружено: активность кэталазы составила 221 мМ НгОг/л.с, активность

СОД вЂ” 41%. На основании этих данных был сделан вывод о наличии у больной гипертонического криза.

Тщательное изучение анамнеза, эффективность терапии и динамика реабилитации больной подтвердили наличие у нее гипертонического криза.

Пример 4. Больная Л., 43 года, поступила в терапевтическое отделение по поводу повышенного АД. Диагноз при поступлении: гипертоническая болезнь ll стадии, криз.

При исследовании энтиоксидантных ферментов обнаружено: активность катэлазы составила 235 мМ НгОг/л.с., активность

СОД вЂ” 40%, Полученные данные позволили сделать вывод о наличии у больной гипертонического криза.

В дальнейшем данный клинический диагноз изменен не был, Пример 5, Больной С., 50 лет, был впервые госпитализирован в терапевтическое отделение по поводу повышения АД, Диагноз при поступлении; гипертоническая болезнь И стадии, криз.

При исследовании антиоксидантных ферментов обнаружено: активность каталазы составила 230 мМ НгОг/л с, активность

СОД вЂ” 4%. Был сделан вывод о наличии у больного гипертонического криза.

Дополнительное изучение анамнеза, наблюдение эа динамикой процесса, эффективностью терапии и реабилитации подтвердили первоначальный диагноз, Пример 6, Больной В., 50 лет, поступил в терапевтическое отделение с резким повышением АД на фоне эмоционального стресса, Диагноз при поступлении: гипертоническая болезнь II стадии, криз, 1803869

Формула изобретения.

Способ определения периодов гипертонической болезни, включающий отбор венозной крови, получение зритроцитов и последующий их бихимический анализ, о т30

35 л и ч а ю шийся тем, что, с целью упрощения способа за счет сокращения трудоемких операций, проводят гемолиз зритроцитов, в гемолизате определяют активность катэлазы или супероксиддисмутазы и при активно40 сти кэтапазы 165 — 235 ммолей Н201/л х с или активности супероксиддисмутазы 32 — 44% ступени ингибирования восстановления нитросинего тетразолиевого определяют наличие гипертонического криза, а при активности кэталазы 240-313 ммолей НрОр/л

° с или активности супероксиддисмутазы 4764% определяют внекризовый период гипертонической болезни.

Составитель В.Нескоромный

Техред М.Моргентал Корректор А. Козориз

Редактор А.Козлова

Заказ 1055 Тираж . Подписное

ЦНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул.Гагарина, 101

При исследовании антиоксидантных ферментов обнаружено: активность каталазы составила 240 мМ HzOz/л.с„активность

СОД вЂ” 47%, НА основании этих данных был сделан вывод об отсутствии у больного гипертонического криза.

В дальнейшем динамика состояния больного, быстрая нормализация АД при поддерживающей терапии позволили отказаться от предварительного диагноза наличия у больного гипертонического криза.

Пример 7. Больная Ф., 45 лет, обследована амбулаторно по поводу повышения АД.

Диагноз: гипертоническая болезнь !! стадии, При исследовании энтиоксидантных ферментов обнаружено; активность каталазы составила 259 мМ HzOz/л с, активность

СОД вЂ” 52%. Был сделан вывод об отсутствии у больной гипертонического криза.

В дальнейшем при динамическом наблюдении данное предположение было подтверждено.

Пример 8; Больной С., 53 гЬда, поступил в терапевтическое отделение с диагнозом: гипертоническая болезнь !! стадии, криз.

При исследовании антиоксидантных ферментов обнаружено: активность каталазы Составила 314 мМ Н20г/л с, активность

СОД вЂ” 60%. На основании этих данных было высказано мнение об отсутствии у больного . гипертонического криза.

8, дальнейшем наблюдение за больным, быстрая нормализация его состояния с переходом на поддерживающую гипотензивную терапию, э также выписка больного на 8-й день подтвердили предположение об отсутствии гипертонического криза у данного больного.

Пример 9. Больная Н., 40 лет, находится на диспансерном учете по поводу гипертонической болезни II стадии в течении

4 лет. При профилактическом осмотре обследована.

Активность каталазы составила 297 мМ

Нг02/л с, активность СОД вЂ” 64%. 4

Отсутствие гипертонического криза и стабильное течение гипертонической болезни было подтвержено.

Пример 10. У служащей Е., 37 лет, при проведении профосмотра какой-либо патологии обнаружено не было.

Исследование антиоксидантных ферментов показало: активность катэлазы составила

322 мМ Н20г/л с, активность СОД вЂ” 67%.

Таким образом было подтверждено, что обследуемая практически здорова.

Предлагаемый способ диагностики различных периодов клинического течения ГБ позволяет сократить (по сравнению с прототипом) время проведения методики в 11,3 раза при определении активности каталэзы и — В 3,8 раза при определении активности

СОД. Значительно сокращается количество трудоемких операций, таких как получение мембран, зкстрагирование липидов. Кроме того, устраняется влияние токсичных веществ (гептан, серная кислота по Савэлю) и необходимость дополнительных рассчетов (вычисление ди агностического козффициента). Разработанный способ является простым, надежным и доступным для обычной клиникобиохимической лаборатории, при этом точность диагностики различных периодов клинического течения ГБ в сравнении с известным способом не снижается.