Способ получения слившихся эритроцитов

Способ получения слившихся эритроцитов

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

Использование: в биологии и медицине, в частности в области биотехнологии, Сущность изобретения: выделенные эритроциты предварительно инкубируют в присутствии 1,5-2,5 мМ аденина, 9-11 мМ инозина, 4-6 мМ глюкозы и 100-150 мМ неорганического фосфора, а слияние осуществляют инкубацией с 20-160 мкМ хлористого лантана. 1 табл.

СОК)З СОВЕТСКИХ сОциАлистических

РЕСПУБЛИК

„„«Ж„„1812209 Al (я)5 С 12 М 15/00

ГОСУДАРСТВЕННОЕ ПАТЕНТНОЕ

ВЕДОМСТВО СССР (ГОСПАТЕНТ СССР) УНЗЛ ОКиЧи

Й39ЮПЫ - . i 1

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ ® ®"

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4905992/14 (22) 28.01.91 (46) 30.04.93, Бюл. М 16 (71) Нижегородский сельскохозяйственный институт (72) Ю.А.Шереметьев, Ф.Ю.Суслов, Г.И.Макин и Г.Н.Нестерова (56) Рингерц Н. Севидж P. Гибридные клетки, M„1979, с.63, Изобретение относится к биологии и медицине, в частности, к биотехнологии и может быть использовано для получения большого количества слившихся клеток и изучения механизма их слияния.

Цель изобретения — повышение выхода целевого продукта, Поставленная цель достигается тем, что эритроциты выделяют из крови, отмывают и производят их слияние в присутствии химических агентов, при этом выделенные эритроциты предварительно инкубируют 14-16 часов 8 забуференном физиологическом растворе, содержащем 1,5-2,5 мМ аденина, 9 — 11 мМ инозина, 4 — 8 мМ глюкозы и 100150 мМ Ма2НРО4, затем отмывают, разводят в 200 — 400 раз эабуференным физиологическим раствором, а слияние осуществляют инкубацией в присутствии 20 — 160 мкМ хлористого лантана.

Способ осуществляется следующим образом.

Полученную кровь человека центрифугируют, плазму,и клетки белой крови убирают, а эритроциты трижды отмывают физиологическим раствором. Отмытые эритроциты помещают в эабуфуренный физиологический раствор (15 мМ трис-НО, 146 (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ СЛИВШИХСЯ

ЗРИТРОЦИТОВ (57) Использование: в биологии и медицине, в частности в области биотехнологии, Сущность изобретения: выделенные эритроциты и редварительно инкубируют в присутствии 1,5-2,5 мМ аденина, 9-11 мМ инозина, 4-6 мМ глюкозы и 100-150 мМ неорганического фосфора, а слияние осуществляют инкубацией с 20 — 160 мкМ хлористого лантана. 1 табл. мМ NaCI, рН-7,4), содержащий 1,5-2,5 мМ аденина, 9 — 11 мМ инозина, 4-6 мМ глюкозы и 100-150 мМ Na2HP04 (в качестве источника неорганического фосфора) и ставят на

14-16 ч в водяную баню при 37 С, После инкубации эритроциты дважды отмывают физиологическим раствором.

Осадок отмытых эритроцитов разводят забуференным физиологическим раствором в 200-400 раз, после чего добавляют хлористый лантан до конечной концентрации 20160 мкМ и помещают в водяную баню при

37 С на 60 мин. Слияние клеток контролируют с помощью светового микроскопа. Выход слившихся клеток составляют 60-80 Р.

Выход слившихся клеток в зависимости от концентрации химических агентов при предварительной инкубации — 15 часов, разведении эритроцитов в суспензии s 200 раз представлен в таблице.

Продолжительность инкубации менее

14 и более 16 ч, а также разведение менее чем в 200 и более чем в 400 раз при указанных концентрациях химических агентов, приводит к снижению процента слившихся клеток.

Таким образом, использование предложенного способа получения слившихся

1812209 зритроцитов, обеспечивает по сравнению с прототипом более высокий выход целевого продукта, Составитель Ф.Суслов

Техред М.Моргентал Корректор С,Шекмар

Редактор

Заказ 1559 Тираж Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР t13035, Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5

Производственно.издательский комГинат "Патент", r. Ужгород. ул.Гагарина, 101

Формула изобретения

Способ получения слившихся эритроцитов, включающий выделение эритроцитов из крови, их отмывание с последующим слиянием в присутствии химических агентов, о т л ич а ю шийся тем, что, с целью повышения выхода целевого продукта, выделенные эритроциты предварительно инкубируют

14-16 ч в забуференном физиологическом растворе, содержащем 1,5-2,5 мМ аденина, 5 9-11 мМ инозина, 4 — 6 мМ глюкозы и 100150 мМ Na2HP04, затем отмывают, разводят в 200-400 раз забуференным физиологическим раствором, а слияние осуществляют инкубацией в присутствии 20 — 160 мкМ хло10 ристого лантана.