Способ определения титра антител в противохолерных иммунных сыворотках, препятствующих вибриоцидному действию протаминсульфата

Способ определения титра антител в противохолерных иммунных сыворотках, препятствующих вибриоцидному действию протаминсульфата

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

. Использование: иммунология. Сущность изобретения: определение титра ан- |тител в противохолерных иммунных |сыворотках, препятствующих вибриоцидному действию протаминсульфатэ, заключается втом, что к разным разведениям иммунных и контрольных нормальных сывороток добавляют по 0,0125-0,015 мг/мл протаминсульфата и 10Т живых холерных вибрионов , полученные смеси инкубируют в течение 3-х ч при 37°С, высевают на питательный агар и по разнице концентраций вибрионов в смесях с иммунной и нормальной сыворотках определяют титр антител, за который принимают максимальное разведение иммунной сыворотки в смеси, содержащей в два раза больше холерных вибрионов, чем в смеси с нормальной сывороткой.9 табл.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК

1 ! ГОСУДАРСТВЕННОЕ ПАТЕНТНОЕ, : ВЕДОМСТВО СССР (ГОСПАТЕНТ СССР) ! ЭПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

IK АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (si>s G 01 N 33/53 (21) 4870591/13 (22) 02.07.90 (46) 30.08.93. Бюл. ¹ 32 (71) Всесоюзный научно-исследовательский институт "Микроб"

:(72) А.К,Адамов, Ю.П.Павлова и О.А.Адамов (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ТИТРА АНТИТЕЛ В ПРОТИВОХОЛЕРНЫХ ИММУННЫХ СЫВОРОТКАХ, ПРЕПЯТСТВУЮЩИХ

ВИБРИОЦИДНОМУ ДЕЙСТВИЮ ПРОТАМИНСУЛЬФАТА (57) Использование: иммунология. Сущность изобретения: определение титра ан1тител в противохолерных иммунных, сыворотках, препятствующих вибриоцидно-!

Изобретение относится к области имму1нологии, а именно к определению титров

;антител в сыворотке крови животных, и мо1жет быть использовано в научной работе и лабораторной практике, Цель изобретения заключается в раэра1 ботке нового способа определения иммуно-. логической перестройки организма, позволяющего более точно охарактеризовать напряженность иммунитета, формиру1ющегося под влиянием холерных вакцин.

Способ заключается в определении титра антител, препятствующих вибриоцидному ействию протаминсульфата, Наиболее близким техническим реше-! нием является известный способ обработки ,микробных клеток разными разведениями

,иммунных сывороток или секретов организ. ма, содержащих антитела, с последующей

„„ 4 „„1837232 А1 му действию протаминсульфата, заключается в том, что к разным разведениям иммунных и контрольных нормальных сывороток добавляют по 0,0125 — 0,015 мг/мл протаминсульфата и 10 живых холерных вибрионов, полученные смеси инкубируют в течение 3-х ч при 37 С, высевают на питательный агар и по разнице концентраций вибрионов в смесях с иммунной и нормальной сыворотках определяют титр антител, за который принимают максимальное разведение иммунной сыворотки в смеси, содержащей в два раза больше холерных вибрионов, чем в смеси с нормальной сывороткой. 9 табл, обработкой мазков люминесцирующими антителами против иммуноглобулинов, которыми обрабатывались микроорганизмы.

Недостаток этого способа заключается в невозможности оценки иммунной активности сыворотки по титру антител, препятствующих вибриоцидному действию протаминсул ьфата.

Предлагаемый способ основан на принципе блокирования антителами вибриоцидного действия протаминсульфата. Для проведения исследований используется тест-штамм холерных вибрионов, чувствительный к протаминсульфату. Культуру тест-штамма холерного вибриона предварительно проверяют на чувствительность к протаминсульфату в среде с нормальной кроличьей сывороткой, инактивированной прогреванием при 56 С в течение 30 мин.

1837232

Пригодны для выполнения исследований по предлагаемому способу штаммы, на которые в сыворотке, разведенной 1:320-1:640, протаминсульфат в концентрации 0,0125—

0,015 мгlмл действует вибриоцидно.

Для определения титра антител, препятствующих вибриоцидному действию протаминсульфата, сравнивают количество вибрионов в 1 мл разных разведений иммунной сыворотки, в которые добавляли протаминсульфат. с аналогичными разведениями нормальной кроличьей сыворотки. 3а титр иммунной сыворотки принимают максимальное ее разведение, в котором эа 3 ч вырастает не менее чем в 2 раза больше вибрионов по сравнению с нормальной сывороткой.

Контроли (иммунная и нормальная сыво., ротки в смесях без протаминсульфата) сви= детельствуют об отсутствии у сывороток свойства существенно подавлять размножение вибрионов, Пример расчета титра антител, препятствующих вибриоцидному действию протаминсульфата. В табл.2 (графе 3) в смесях, содержащих иммунную холерную сыворотку в разведении 1:40 — 1:160, количество вибрионов через 3 ч инкубирования превышает более чем в 2 раза количество вибрионов в смесях с соответствующими разведениями нормальной кроличьей сыворотки (табл.2, графа 4). В смесях, содержащих иммунную и нормальную сыворотки в разведении

1:320 выросло, примерно, одинаковое количество вибрионов — 230 и 390 соответственно (графы 3 и 4). Иммунная и нормальная сыворотки без добавления протаминсульфата не оказывают существенного влияния на размножение вибрионов. Следовательно. титр антител, препятствующих вибриоцидному действию протаминсульфата, равен 1:160.

Исследования разных вариантов смешивания компонентов показало, что в максимальных титрах антитела, препятствующие вибриоцидному действию протаминсульфата, обнаруживаются при смешивании компонентов в следующем порядке: а) иммунная сыворотка + холерные вибрионы + протаминсульфат, б) иммунная сыворотка + протаминсульфат + холерные вибрионы (табл.1 и 2). Однако, при смешивании компонентов в последовательности: иммунная сыворотка + протаминсульфат+ холерные вибрионы различия в конечных концентрациях вибрионов после 3-х ч инкубирования были более контрастны (табл.1 и 2).

В табл,1 и 2 видно, что при смешивании сыворотки с протаминсульфатом и последу50

Специфичность способа определения активности иммунных сывороток по титру антител, препятствующих вибриоцидному действию протаминсульфата была испытана в экспериментах с НАГ-вибрионами и Е.

coll. В этих опытах установлено, что способ определения иммунной активности сывороток по титрам антител, препятствующих вибриоцидному действию протаминсульфата, специфичен: антитела к холерным вибрионам не влияли на бактерицидное действие протаминсульфата в отношении НАГ-вибрионов и кишечной палочки (табл,7). ющим добавлением суспензии холерных вибрионов титр сыворотки (при конечной концентрации протаминсульфата 0,0125 мгlмл) выше, чем при добавлении раствора протаминсульфата к смеси иммунной сыворотки с суспензией холерных вибрионов (табл.1, строки 11-14 и 15-18 соответственно, табл.2, граф 3 и 7 соответственно).

В связи с этим для определения активности иммунной сыворотки по титру антител, препятствующих вибриоцидному действию протаминсульфата, целесообразно применять следующий порядок смешивания компонентов: иммунная сыворотка+

15 +протаминсульфат+ холерные вибрионы.

Зависимость чувствительности и редложенного способа от времени инкубирования приведена в табл.3.

В табл.3 видно, что после 3 ч инкубиро20 вания экспериментальных смесей различия в опытных и контрольных смесях хорошо выражены. Следовательно, этого времени инкубирования реакционных смесей достаточно для проявления свойства иммунных

25 антител препятствовать вибриоцидному действию протаминсульфата. Удлинение срока инкубирования до 6 ч уменьшает величину титра антител.

Влияние концентрации протаминсуль30 фата на величину титров антител показано в табл 1, 4 и 5. Приведенные в табл.1, 4 и 5 данные служат основанием считать оптимальной концентрацией протаминсульфата, позволяющей точно определять титр анти35 тел, концентрацию, равную 0,0125 мг/мл.

Допустимы колебания концентрации протаминсульфата 0,012-0,015 мгl мл (табл.5).

Результаты исследования зависимости титров антител, препятствующих антивиб40 рационному действию протаминсульфата, от исходной концентрации вибрионов в реакционной смеси суммированы в табл.6.

Из данных табл.6 следует, что в максимальных титрах действие антител проявля45 ется при концентрации вибрионов, равной

107

1837232

1 !

Способ определения титра антител. репятствующих вибриоцидному действию ротаминсульфата, был применен для ха: актеристики иммунных сывороток, пол, ченных от кроликов, вакцинированных 5 азличными антигенными препаратами, риготовленными из холерных вибрионов., дновременно определяли титры агглютиинов в сыворотках. Результаты опытов риведены в табл.8. 10

Из табл.8 видно, что накопление антиел, препятствующих вибриоцидному дейтвию протаминсульфата, в сыворотке роликов коррелирует с титрами агглютиинов, но имеются и существенные рас- 15 ождения в некоторых сыворотках, что видетельствует об определенном значеии этого показателя в иммунологичекой характеристике сыворотки и, ероятно, иммунитете организма в целом. 20

Динамика накопления антител, препяттвующих вибриоцидному действию протаинсульфата, в сыворотке крови была зучена на кроликах после однократной одкожной иммунизации холерогеноманэ- 25 оксином (табл.9).

Как видно, из табл.9, образование антиел, препятствующйх вибриоцидному дейтвиюпротаминсульфата, начинается после днократного введения антигенов в первые 30 ни, также как агглютининов и вибриоцидых антител. На 7 день титры этих антител ревышали титры агглютининов, но были иже титров вибриоцидинов. В последую-ие две недели титры агглютининов и виб- 35 иоцидинов превышали титры антител (репятствующих вибриоцидному действию ротаминсульфата), снижаясь к 36 дню от ачэла иммунизации. Максимальных значе-: ий титры антител, препятствующих вибри- 40 цидному действию протаминсульфата, 1 достигали на 14 сут от начала иммунизации, но они были, примерно, в 2,3 раза ниже титров агглютининов. Титры антител, препятствующих вибриоцидному действию протаминсульфата, на 7 сут. от начала иммунизации колебались в интервале 0 — 320,0; в последующие 3 недели — 80,0 — 640.0 (различия в титрах на 7, 14, 21 и 28сут. от начала иммунизации не существенны). Снижение титров антител, препятствующих вибриоцидному действию протаминсульфата, на 36 сут, от начала иммунизации достоверно.

Применение предложенного способа. определения антител иммунных сывороток, препятствугощих вибриоцидному действию протаминсульфата, позволяет по сравнению с существующими: — охарактеризовать новое свойство иммунных сывороток; — повысить точность определения иммунологической перестройки организма и напряженности иммунитета при иммунизации холерными вакцинами.

Формула изобретения

Способ определения титра антител в противохолерных иммунных сыворотках, препятствующих вибриоцидному действию протаминсульфата, заключающийся в том, что к фазным разведениям иммунных и контрольных нормальных сывороток добавляют по 0.0125-0,015 мг/мл протамин-. сульфата и 10 м ° кл живых холерных

7 вибрионов, полученные смеси инкубируют в течение 3-х при 37 С, высевают на питательный агар и по разнице концентраций вибрионов в смесях с иммунной и нормальной сывороток определяют титр антител, за который принимают максимальное разведеНие иммунной сыворотки в смеси, содержащей в 2 раза больше холерных вибрионов, чем в смеси с нормальной сывороткой.

1837232

Таблица 1

Зависимость свойства иимунных сывороток препятствовать вибриоцидноиу действию протаминсульфата от соотношения компонентов и последовательности их смешивания

Состав экспериментальных сиесей

Титры агглютининов

Иаксииальные разведения сывороток, в которых концентрация вибрионов врыла в

2 раза выше или. ниже, чем в контроле

Последовательность смешивания компонентов

1(он це нтрация .:. протаминсульфата, мг/ил

Серии сывороток (разведения от

1:2,5 до

10240) 1(онцентра ц ия вибрионов в

1 ил

2 5 х 10

2,5 х 10

2,5 х 10

1,25 х 10

2,5 х10

2560, О !!

-1280,0

-1280, О

-640,0

+93,3(-320)

-80,0

tr 94

1,0

0,2

О,1

«lI»

0,1

«! !»

0,1

0,02

1!" 19

Д

« l I»

«!!»

Ю 21

0,125

«I I»!

Г 19

« l l

«! .»

Г 20

Г 21

Г 23

0,0125 1О

Сыворотка, разведенная t;5-1:5120 + равный объем суспен-зии вибрионов 4х10 + равный объем раствора протаиинсульфата (0 025 иг/ил) «! l

«!!

Г 20

I1»

tt 21

«l!»!! 23

I!»

t- 46

«ll»

Примечание. Титры антител приведены в аеличцнах, обратных разведениям.

Сыворотка, разведенная 1:2,5 + равный объем раствора про" таминсульфата, затем разведение смеси с коэффициентом 2 до 1:5120 и добавление во все разведе.-. ния равного объема суспензии вибрионов

Сыворотка, разведенная 1:5-1:5120 + равный объеи раство" ра протаминсульфата ,(0,05 иг/мл) + рав- . ный объем суспензии вибрионов 2х10

+80,0

+20,0

+40,0

+160,0

+1280, О

+640,0

+320,0

+160,0

+320,0

+160,0

+160,0

+40,0

2560,0

1280,0

640,0

320,0

2560,0

1280,0

640,0

320,0

640, О

1280, О

640, О

320, О

640, О

1280,0

> е

1 1

1 I

I 1

1 3

I I

I I

1 1

1 1 с»> ! С 1 т

3 — —

1 1

1 1

I 1

I 1

1 I

1 I о

) 1 х

)Х

1 л

ГО Х сп

Ш ГП а

Х t»

Э О е о х л -и о

x o

Э Z е о со о а

>g а о

io

ГП а S

О.

»Р 1Н ГП

СО Х

Ю Г0 сХ

x s э а р о

>С>

Ю

)в х м

>П ОП

О Ю

x x м ю

° л

C)C>

Ю х м

CCI

О х

)Х

>ф

О х О л

Ф

X Х

Х m

Q )0

CZ а

Э

m + с)(Г0 Х а о

tQ o л а о

C)t Й

Cg л а о о

Э

% л а.

° ° . ГП

К л Х

ГП С{О

zQo

Х

Г0 X Э

Ф о * аГПm о

ФЬХ

s ao

1- 1- S

r s a.

Г0 1- {О

Х S

I Cg ф

Ю х л ъО ф»

С:> х О л О

1 1 о о

x x

С> л ° лл с

О х с"( л

Г

О х .О л

1 1 ф

>Х I

Ш 1

О 1

Э I

ПГ

О 1 (m

ГП I

1- I о

О 3 о

1

I

I

1

I

t

I

1 с

1

CU L

X о ае

{: сл(Ю

ГП ° ао о

Й П( (О ГП

>g а .и с л

Q o

Р Х

L0 о х

I

I

1 ! !

I

3

1

1

1

I

1 >S

{О 2

S Z

ГП

S CL

Л +

Х3

Q О

1 о

Л-П. о

ГП х о

Э Х р о

CO S

o ..а

7 4 о о

x x

° л с 3 ее>

Ю х се \ л

Q ГП с{ а

Э

m +

Г9

Cg Y а о

1э о ъ а

z o

Й ГП

ГП а о

Ю

О

О

LA м

О х м

Ф

О х

Г» м ф ее>

О О

x x сл О л л с4

CD х с ( сч! 1

I 1

1 1

1 I !

I l ! I

1 3 о

I Z. "I

1 . I

1 1

3 — 3

l I

1 ! 3 ! I

3 I

1 3 о

I 1

i Х 1

S

X m

a z

1- Э

ГП C

v лг

ГП VcD

Г esxx а Эсч о р с .о m

Г0 >х а л ох а

Й Й,о

1- Г0 о аm

+ I

Й х а о

1- ))Р ое ао> о

m cD о х

Q р

X О о

Се >Х

Э

m z

Я П(ГП Г0 а а

1 t ю о

x x О Ф

° ° м (Ю х о л

С>

>О л

CD х

LA м м

3»

Ю х

>Х 1

Q 1

I л

Х 1 о

Z l

X 1

-"С 3 о !

X 1 а ! О) !

Х

Щ

X л

Э

X о

lv о

Й ! х

Ш

ГП о

z о

1 о х м

° l сл(!

Ю х

00 с (1- t ю о

x x с(сЧ е ° с"(С (!

»

О х с 3

t. 1 (>(с !

>Х 1

Э о

Q 1

X 1 о !

Ш I

Г0 1

1О 1

О 1 о 1

l !

1

1

I

1 1 ! I

1 I

I 1

1 I

I 1

1 о

I т

3

1 1

1 3

I

3 О

I ЬС х

S 3

П> 1

I х

X 1

Б I

Я I л (ГП 1

1- 1

1- 1

CL I с

Q l а

{ 1

I

I

CL

lO

Й х

2i

X о

Iо

Э

X с о

z с

Э

1Ф о

ГХ

Э с о о

Э

Х

X с

>е>

Ю х

C 4

О о

° О

CD Ch

СО М

Ю л с(о

l C0 о х

>.Г\

CD л

1 о

Л(v

К

z

Э

Г-Е

Э

Z

Cg

Э

X

CL о о со

- П с4

).О о о О N м

У (о а

Ю

° ° ° ° ° ° ° л л ° е л с

Э (S

1Х

ГП о а

1(л

Х

Б г

S с

Й

ГП

m о (z

Э

z о с

1

1

1

I

3

1

1 !

I

1

I

I !

I

1

1

1

1

ГП I

ГП 1 е 1 л

Г 1 л 1 о 1

Х 1

S I

ГП 3

1- о а

C 1

>2

S 1

ГП 1

1о

CL

Z

fg

Ш о а

{О л

z

Г

Г"\

Э с о о с

>Х

Э о

Q х о х л

z л

Г

Г0

1z

Е а

Э с о

1 + Х

>Х о Э ш л СС

ХХЛГ О

mîxo

Э Г0 ХW О

cX O. S 1- Ф э хххо

mic0 QZ р О

ГП Y ОО )О X аОа лоа

1- c cD ta

ЭО >К S даx am!

ХОЭmz о

cg.m р 3- m X

Cg g CO f0 Cg S X а v î e a. cg сч

I

I

1 Г .а.

1 О О е — лх х со л л

Z 1 м

3 !

Ч>

I О е

1 X

I LA (л! С

О х

tA х О

О х сч сл(1

1

CD е

3

СЪ ! ° !

1 х л

I, В

I

I !

I

1

1 о

° °

1 е о о!м (с(о ь

>С>

CD х м

С> х

СО

С(1

Ю л

О оз

° >t

Ю х О л ь

Ю х л сл(О

О о ч> (се

П(-z х

ГП I- 2

Х Л Ф о *

s r а а (О Э 1>

S У

Ф Г О о о с

ГП о -1Х >Х ГП а cg e л сх с о ш

xmo о х

mo.s

S X

1 m ГП ох O.1- O с а

Г0

ГЧ X Я

S сс Й л I{с о

f0 S >S

z c Q

z o

:, а х с л

X о щ Х л л

Y с =у

SГ0C

s о а а

O. O 30

Х * S

Г0 Й

r Y x

oat а а-а оол

Ш Ш Ф

2l 2

ovo

1I I % с а хт с

1837232

Т с) () I I И ц Э О

Завис3(мость величин титра антител, препятствующих вибриоцидному действию протаминсульфатэ, от времени инкубирования смесей перед высевом на плотные среды для их определения

Время инкубирования смесей перед высевом на плотные среды для определения титров антител, ч

Титры антител, препятствующие вибриоцидному действию протаминсульфата

40,0

320,0

40,0

3

Примечание: см.примечание к табл.1.

Таблица 4

Значения титра антител в холерной сыворотке 4 94 при разных кснцентрациях протанинсульоата

Титр антител в реакци агглютинации

Среднее количество нивых вибрионов в 1 нл снесей после 3 ч ннкубироеания

Разведения сыворотки

Концентрация протанинсульеата, .мг/мл

0,00625 0,0125

0,02 0,03 хкс J IIKC Хкс (хкс нкс

ХКС нкс

+Н+

++++

++Ф+

++ Ф+

220,0

90,0

О

О О 0

P т

Примечание: концентрация холерных вибрионов в снесях 10 условные обозначения. XKC - холерная кроличья иинунная сыворотка 4 94; НКС - нормальная кроличья сыворотка; подчеркнуты титры антител.

Сн.примечание к табл.2.

Таблица 5

Значения титра антител в холерной сыворотке 4 98 при разных концентрациях протаминсульФата

Среднее количество иивых вмбрионов в 1 мл смесей после 3 ч инкубирования

Титры антител в резкции агглетинации

Разведения сывороток

Концентрация протанинсульоата, нг/нл

0,01 0,0125

О. 015

О,О03 хкс нкс

ХКС нкс хкс нкс хкс нкс

2,5х10

1 бхlС

1 ° Ох(оа

2,8xtOI

2 Охlо

1,7xl0

4,0x10

1,3 10

4,6xlO

1 9xlO

7,8х10

В,бхlо

7 б,!x!0

B,Ox!0

2,6xIO б, Ixl Î

2,9х107

5,0х10

6,0xtO

1,7х10

1,8х1 о

1,3х!О

8,2х!О

7,Ox 1 0

2,6хlо

5,4xl0

3,7х10

4,6х10

3,0xlO

6,9xlO

2,0х10

2,0хlо

4,бх(оз

2,0х10

5,1хlое ++!+

4,0х10 г-ь++

6,4xl0 +++

3, 9x10 +++

1,7кIO ++

i:4O

1:80

1: 160

1:320

1:64О

Примечание. XKC - холерная иммунная кроличья сыворотка Ф 98, титр вгглотниинов 1:64С.

НКС вЂ” кроличья ««панельная сыеооотка; подчеркнуты «ит!)ы гн«итал.

1:20

1:40

1:80

I:160

1:320

1:640

1:1280

1:2560

1:5120

1:10240

2,бхlоа

3, lхlо

6, Ox! 0à

5,2х1 ос

4,8х10

3,7õ10а

5,0х!О

3,0х10

4,Ix!0

4, Ох l о"

3, Ох10

3,0х10

5,6х10

5,5х10

4,5х10с

4, 1х10

4, !x!0

2,5xtO

4,4х10г

3,9х10

1 . .

6,4xlo

6,0xlO

3,7х101

3,8xlO

l,3õ10

6,5xl0

319xI 0

60,0

1OOiO

30,0

2110 О 0 ! 250 О О

40 О О

О С С

О 0 . О

0 О С

О О О

1837232

Таблица 8.

Титры антител, препятствующих вибрационному действию протаминсульфата в сыворотках кроликов, иммунизиророванных холерными антигенами

Способы иммунизации

Серии сывор ток

Средние титры антител

Деингибирующих

Агглютини" рующих м вvaееююма °

160,0

160,0

320,0

8

640, 0

320,0

320,0

160,0

640,о

80,0

640, 0

320,0

320, 0

320,0

640,0

640,0

640,0

640, 0

80,0

320, 0

80,0

0 0

40,0

80,0

80,0

Подкожно, однократно холерогеном-анаФоксином в смеси е

0-антигеном и алювантом

Подкожно, однократно без 10 адъюванта холерогеном" анаток- 11 сином с 0-антигеном l2

Подкожно, однократно хаперо- 13 геном-анатоксином в смеси с 14

0-антигеном и с адьювантом 15

Подкожно, однократно без адъю" 16 ванта холерогеном-анатокси-., 17 ном в смеси с 0"антигеном 18

Подкожно, однократно с адъю" вантом холергеном-анатокси" ноч в смеси с 0-антигеном

Подкожно, однократно без адъю- 23 ванта холерогеном"анатоксином. 24 в смеси с 0-антигеном

Подкожно, однократно с адъю- 25 вантом холергеном-анатокси- 26 ном в смеси с 0-антигеном 27

Подкожно однократно без адью- 28 ванта холерогеном"анатоксином .30 в смеси с 0-антигеном

Подкожно, .однократно с адъю" 31 ванта холерогеном-анатокси", 32 ном в смеси с 0-антигеном 33

Подкожно, однократно без адъа" 34 ванта, холерогеном-анатоксином, Я в смеси с 0-антигеном 36

160, 0

160, 0

320,0

160,0

160,0

640,0

160, 0 l60,0

640, 0

640, 0

320, 0

160, 0

320,0

640,0

80,0

80,0

80,0

160,0

160, 0

1280,0

1280, 0

640, 0

640, 0

1280, 0

1280, 0

1280, 0

640,0

320,0

640, 0

640,0

1837232

2 г60, 0

2560, 0

2i60, 0

Двукратная подкожная иммуни" зация: 1 введение холерогенаанатоксина с О-антигеном; 2убитые клетки вибрионов

37

38

39.0

40,0

Убитыми клетками эльтор виб; рионов серовара Огава, штамм

N 308

1280, 0

640,0

46

0

40,0

2560,0

1280, 0

Убитыми клетками холерных вибрионов классического биввара, серовара ИнаЬа, штамм

569-8

640, 0

320, 0

Убитыми клетками эльтор вибрионов серовара Инаба, штамм т"4

Убитыми клетками эльтор виЬ- рионов серовара Инаба, штамм

И-633

2560,0

40,0

102

640, 0

106

20,0

Убитыми клетками холерных вибрионов классического биовара, . серовара Инаба, штамм Ю 2

1280, 0

335 . 40,0

Убитыми клетками холерных виЬ рионов классического биовара, серовара Инаба, штамм Р 17

« ««

Примечание: "Холероген-анатоксин +,0-антиген" вводили 1,25 ч/д . на 1 кг веса; сыворотки в строках 1" 32-38 получали от кроликов, иммунизированных трехкратно: первое и второе введение подкожно по 20 млрд. клеток вибрио" нов, уЬитых формалином, третье введение внутривенно 5 млрд. убитых вибрионов; интервал между иньек-, циями 3 дня; сыворотки получали на 7 день после .1. третьей иммунизации; % - деингибирующих - антител, препятствующих виьриоцидному действию протаминсуль»

Фата. См. примечание м табл.1.

1837232

Т аблицэ 9

Динаника титров антител, препятстаующих аибрационному действию протанинсульфата агглютининоа и аибриоцидиноа у кроликоа, инмуниаироаанных холерной вакциной

"холероген-анатоксим+О-антиген"

Средние титры антител "

Дни после ааедения животным

Вибрыоцидных

1 Л:.™..

Препятствующих аибриоцидном действию протаминсульфата дгллютининоа ртм р

28

333,3

60,0

Примечание: а - средние данные по 6 жиаотнын1а» - по 3 жиаотным; см.примечание к табл.1.

Составитель А. Адамов

Техред М.Моргентал Корректор A. Обручар

Редактор

Заказ 2863 Тираж Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", r. Ужгород, ул.Гагарина, 101

213 3

400,0

400,0

<0,025

>0,025

>0,025

>0,025

<О>025

93,3

1066,6

693,3

373>3

346,0 к0,025

<0i025

<0,025

> 0,025

>О 025

5,3xl0 3

1,8х10 а

2 ° Ox10 т

5,2х10

7,0х10

<0,025

<0,025

>0,025

>0,025

>0,025